一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，所述方法包括将外植体脱分化培养形成愈伤组织；将愈伤组织诱导培养得到体细胞胚；体细胞胚依次经过成熟培养、萌发培养、目标性状亲本筛选和生根培养得到组培苗。其中目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，剔除后代致死植株或非目标性状亲本植株。本发明专利技术方法能够优化杂交育种中父母本的性状，有效提升育种效率，可以在以嵌合体为亲本的菠萝杂交育种中推广应用。中推广应用。中推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法


[0001]本专利技术属于植物育种
，涉及一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法。

技术介绍

[0002]果皮色泽是果实重要的外观品质，随着菠萝育种目标不断向品质提升和特色品种选育方向的转变，红色果皮性状已成为菠萝特色品种选育的新热点。红苞凤梨(Ananas comosus var.bracteatus)具有艳丽的红色果皮，是菠萝果皮色泽育种重要的杂交亲本。但是，因其源于细胞嵌合体，其杂交后代白化失绿株(致死株)较多，严重影响育种效率。另外，例如冰糖红菠萝(Ananas comosus
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)，如果前期不经过嵌合体的分离和目标亲本的筛选，杂交后代就会出现绿色果皮等非目标性状植株比例升高。因此，需要研究一种育种技术，对嵌合体植株进行分离筛选，以期能够克服杂交后代出现致死植株或能够提高目标性状比例的杂交亲本材料。

技术实现思路

[0003]为了克服杂交后代出现高比例非目标性状的杂交亲本材料，包括克服出现致死植株，本专利技术提供了一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法。该方法能优化杂交育种中父母本的性状，有效提升育种效率，可以在以嵌合体为亲本的菠萝杂交育种中推广应用。
[0004]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0005]一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，所述方法包括如下步骤：
[0006]将外植体脱分化培养形成愈伤组织；<br/>[0007]将愈伤组织诱导培养得到体细胞胚；
[0008]体细胞胚依次经过成熟培养、萌发培养、目标性状亲本筛选和生根培养得到组培苗；
[0009]其中目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，剔除白化致死植株或非目标性状亲本植株。
[0010]进一步的，还包括：将组培苗移至温室炼苗；炼苗结束后移栽至营养杯中继续生长成亲本植株。
[0011]进一步的，所述外植体为嵌合体植株。
[0012]进一步的，所述外植体为叶片为白绿嵌合体的红苞凤梨的离体芽时，目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，白化植株导致后代植株致死，苗期剔除白化植株。
[0013]进一步的，所述外植体为冰糖红菠萝的离体芽时，目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，深绿色叶片植株为非目标性状亲本植株，剔除深
绿色叶片植株。
[0014]进一步的，将外植体脱分化培养形成愈伤组织过程中，采用脱分化培养基为：MS培养基含2.0～4.0mg/L 6
‑
BA和1.0～3.0mg/L NAA。
[0015]进一步的，将愈伤组织诱导培养得到体细胞胚过程中，采用诱导培养基为：MS培养基含0.01～0.03mg/L TDZ和4～6mg/L 2,4
‑
D。
[0016]进一步的，体细胞胚成熟培养、萌发培养过程中，培养基为：MS培养基含2.0～4.0mg/L 6
‑
BA和1.0～3.0mg/L NAA。
[0017]进一步的，体细胞胚生根培养过程中，采用生根培养基为：MS培养基含0.4～0.6mg/L IBA和0.5～1.5mg/L NAA。
[0018]进一步的，所述外植体和体细胞胚培养过程中，培养基温度25
±
2℃，16h光照、8h黑暗，pH值5.6～6.0，湿度65～75％。
[0019]相比于现有技术，本专利技术具有如下优点：
[0020]本专利技术方法在育种过程中，通过在体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，剔除白化致死植株或非目标性状亲本植株的方式获得亲本植株，待开花后作为父本或母本与其他品种配制杂交组合，完成杂交制种。本专利技术方法有效的克服了杂交后代出现高比例非目标性状的杂交亲本材料，包括克服出现致死植株。
[0021]本专利技术技术可在多个菠萝嵌合体亲本的挖掘及杂交选育红皮菠萝新品种中推广应用。红苞凤梨通过本专利技术获得的亲本植株经杂交后获得的子代中无白化致死植株；冰糖红菠萝通过本专利技术获得的亲本植株经杂交后能够克服杂交后代出现绿皮后代比例高的问题，是符合选育目标性状的优异果皮色泽育种亲本材料。
附图说明
[0022]图1中，A～E为体细胞胚未经目标性状亲本筛选获得的组培苗过程示意图；
[0023]图2为体细胞胚经本专利技术目标性状亲本筛选后获得的组培苗示意图；
[0024]图3中，A为红苞凤梨嵌合性状示意图；
[0025]B为嵌合体亲本杂交后代出现白化致死植株示意图；
[0026]C为以本专利技术获得的非嵌合体为亲本的杂交后代示意图(结果为无白化致死植株)；
[0027]图4中，A为冰糖红菠萝嵌合体植株示意图(箭头指示嵌合性状的叶条纹)；
[0028]B左侧和C左侧为非嵌合体植株的红皮果实和对应的浅绿叶片，B右侧和C右侧为非嵌合体植株的绿皮果实和对应的深绿叶片。
具体实施方式
[0029]下面对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。
[0030]实施例1
[0031]本专利技术提供了一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，所述方法包括如下步骤：
[0032](1)将外植体脱分化培养形成愈伤组织：
[0033]采用的脱分化培养基为MS培养基含3.0mg/L 6
‑
BA和2.0mg/LNAA，将外植体纵切并接种在该培养基上，其中，所述外植体为红苞凤梨嵌合体植株的离体芽，控制培养基的温度、光照、pH值和湿度，培养基温度应保持在25
±
2℃，光照周期应为16h光照、8h黑暗，pH值应保持为5.6～6.0，湿度应保持在70％左右。
[0034](2)将愈伤组织诱导培养得到体细胞胚：
[0035]采用的诱导培养基为MS培养基含0.01mg/L TDZ和5mg/L 2,4
‑
D，将愈伤组织切至约3mm
×
3mm
×
3mm大小，置于培养基上进行体细胞胚诱导，控制培养基的温度、光照、pH值和湿度，培养基温度应保持在25
±
2℃，光照周期应为16h光照、8h黑暗，pH值应保持为5.6～6.0，湿度应保持在70％左右。
[0036](3)体细胞胚依次经过成熟培养、萌发培养、目标性状亲本筛选和生根培养得到组培苗：
[0037]成熟培养、萌发培养过程中，培养基配方是MS培养基含3.5mg/L 6
‑
BA和2.5NAAmg/L；控制培养基温度25
±
2℃，16h光照、8h黑暗，pH值5.6～6.0，湿度70％左右；
[0038]目标性状亲本筛选：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将外植体脱分化培养形成愈伤组织；将愈伤组织诱导培养得到体细胞胚；体细胞胚依次经过成熟培养、萌发培养、目标性状亲本筛选和生根培养得到组培苗；其中目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，剔除白化致死植株或非目标性状亲本植株。2.根据权利要求1所述的提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，其特征在于还包括：将组培苗移至温室炼苗；炼苗结束后移栽至营养杯中继续生长成亲本植株。3.根据权利要求1所述的提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，其特征在于，所述外植体为嵌合体植株。4.根据权利要求1所述的提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，其特征在于，所述外植体为叶片为白绿嵌合体的红苞凤梨的离体芽时，目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，白化植株导致后代植株致死，苗期剔除白化植株。5.根据权利要求1所述的提高菠萝嵌合体亲本杂交后代目标性状比例的方法，其特征在于，所述外植体为冰糖红菠萝的离体芽时，目标性状亲本筛选过程为：当体细胞胚萌发成苗至肉眼可以区别颜色时，深绿色叶片植株为非目标性状亲本植株，剔除深绿色叶片植株。6.根据权利要求1所述的提高菠萝嵌合体亲本杂交...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺军虎，栾爱萍，钟紫琴，吴竞，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：