大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液及其分离方法技术

本申请属于生物技术领域，尤其涉及大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液及其分离方法。本申请提供了大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液，包括：第一缓冲液、第二缓冲液和第三缓冲液；其中，所述第一缓冲液包括4

【技术实现步骤摘要】
大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液及其分离方法


[0001]本申请属于生物
，尤其涉及大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液及其分离方法。

技术介绍

[0002]随着分子生物学的迅速发展，核酸的研究越来越多。而大脑皮层血管RNA被广泛应用于医学研究、尤其是临床诊断中。从大脑皮层血管样本中提取高质量的总RNA，是进行下游的测序、qPCR、芯片检测等技术的基础。但是，在大脑皮层血管中提取高质量的总RNA存在技术难点，RNA难以保存是基因表达组研究的一大瓶颈。RNA非常脆弱，极难保存，由于自然界广泛存在的RNA酶，包括组织内及病原体的RNA酶，使得RNA在室温几分钟内就开始降解，30分钟内完全降解成为检测不可用的小片段，限制了RNA的试验研究。
[0003]当前动物大脑皮层血管RNA纯化的方法主要是将大脑组织匀浆后通过不同孔径的筛网过滤分离微血管或者大血管组织，然后再提取组织RNA。但是现有技术方案纯化的血管组织普遍纯度不高，且常规方法中缺少对RNA保护的措施，获得的RNA结构不完整，质量差，无法进行后续的RNA测序。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.大脑皮层微血管和大血管RNA的纯化分离液，其特征在于，包括：第一缓冲液、第二缓冲液和第三缓冲液；其中，所述第一缓冲液包括4
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羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES、RNA酶抑制剂和Hank's平衡盐溶液HBSS；所述第二缓冲液包括葡聚糖和第一缓冲液，所述葡聚糖的分子量为65000～75000；第三缓冲液包括动物血清和第一缓冲液。2.根据权利要求1所述的纯化分离液，其特征在于，所述第一缓冲液中，所述Hank's平衡盐溶液HBSS为溶剂，所述4
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羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES的终浓度为1％～5％；所述RNA酶抑制剂的终浓度为0.1％～0.5％。3.根据权利要求1所述的纯化分离液，其特征在于，所述第一缓冲液中，所述RNA酶抑制剂选自焦碳酸二乙酯DEPC、异硫氰酸胍和氧钒核糖核苷复合物中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的纯化分离液，其特征在于，所述第二缓冲液中，所述第一缓冲液为溶剂，所述葡聚糖的质量百分比为150g/L～200g/L。5.根据权利要求1所述的纯化分离液，其特征在于，所述第三缓冲液中，所述第一缓冲液为溶剂，所述动物血清的用量为1v/v％～10v/v％。6.根据权利要求1所述的纯化分离液，其特征在于，所述第三缓冲液中，所述动物血清选自山羊血清及其白蛋白、驴血清...

【专利技术属性】
技术研发人员：李泰霖，王志，彭俊，彭英，唐亚梅，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：