牛痘病毒加帽酶突变体、重组载体、重组工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种牛痘病毒加帽酶突变体、重组载体、重组工程菌及其应用。该牛痘病毒加帽酶突变体包括：(a)、由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸组成的多肽；或，(b)、与如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90％同源性的多肽。上述牛痘病毒加帽酶突变体在45℃下的半衰期在35min以上，高于野生型牛痘病毒加帽酶突变体的半衰期，在较高的温度下对mRNA加帽时，仍然表现出优良的的催化活性，在临床医药、流感疫苗、肿瘤疫苗、生物制药等领域都能发挥重要作用。作用。作用。

【技术实现步骤摘要】
牛痘病毒加帽酶突变体、重组载体、重组工程菌及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种牛痘病毒加帽酶突变体、重组载体、重组工程菌及其应用。

技术介绍

[0002]真核生物中mRNA经转录后修饰在5'端形成一个特殊结构，即帽子结构，该结构对mRNA的稳定、转运与翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶，其由D1和D12两个亚基组成，兼具RNA三磷酸酯酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性，可将7
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甲基鸟嘌呤帽结构(m7Gppp)连接到RNA的5'末端(m7Gppp5'N)。牛痘病毒加帽酶，在合适浓度的加帽缓冲液(Capping buffer)，鸟苷三磷酸(GTP)，S
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腺苷甲硫氨酸(SAM)等存在条件下，能够在一个小时之内对RNA进行加帽，并且保证正确的方向，耐热的牛痘病毒加帽酶突变体，对mRNA在流行病疫苗以及肿瘤疫苗等多个领域，具有重要研究价值。然而，市场上大多数牛痘病毒加帽酶突变体的热稳定性较差，难以满足实际需求。
专利
技术实现思路

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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛痘病毒加帽酶突变体，其特征在于，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：(a)、由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸组成的多肽；或，(b)、与如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90％同源性的多肽。2.根据权利要求1所述的牛痘病毒加帽酶突变体，其特征在于，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列中第424位氨基酸、第461位氨基酸、第513位氨基酸及第750位氨基酸中的至少一个发生突变得到的多肽。3.根据权利要求2所述的牛痘病毒加帽酶突变体，其特征在于，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生V424I突变、Y461F突变、I513V突变及V750L突变中至少一种得到的多肽。4.根据权利要求3所述的牛痘病毒加帽酶突变体，其特征在于，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生V424I突变、Y461F突变、I513V突变、V750L突变中的任意一种得到的多肽；或者，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生V424I突变、Y461F突变、I513V突变、V750L突变中的任意两种得到的多肽；或者，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生V424I突变、Y461F突变、I513V突变、V750L突变中的任意三种得到的多肽；或者，所述牛痘病毒加帽酶突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生V424I突变、Y461F突变、I513V突变、V750L突变得到的多肽。5.根据权利要求4所述的牛痘病毒加帽酶突变体，其特征在于，所述牛痘病毒加帽酶突变体的氨基酸序列为如SEQ ID No.3～SEQ ID No.17所示的序列中的一种。6.根据权利要求1所述的牛痘病毒加帽酶突...

【专利技术属性】
技术研发人员：马富强，罗成坤，陆泽林，王志耘，杨广宇，
申请(专利权)人：苏州瀚源新酶生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：