芦笋多糖在制备抗炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了芦笋多糖在制备抗炎药物中的应用，属于医药技术领域。是芦笋多糖的新用途。经过验证结果表明，芦笋多糖可抑制LPS(脂多糖)诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型中一氧化氮NO的释放，并且对细胞无毒性。芦笋多糖可作为活性成分用于制备抗炎药物或保健品。为活性成分用于制备抗炎药物或保健品。为活性成分用于制备抗炎药物或保健品。

【技术实现步骤摘要】
芦笋多糖在制备抗炎药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及芦笋多糖在制备抗炎药物和保健食品中的应用。

技术介绍

[0002]芦笋(Asparagus officinalis.L)为百合科天门冬属宿根性草本植物，又名石刁柏、龙须菜等，是一种药食同源的蔬菜。芦笋皮是芦笋在加工过程中产生的下脚料，占鲜品的15％～25％，这不仅造成了资源浪费，还大大增加了废弃料的成本。芦笋多糖是芦笋含有的重要活性物质之一。目前，对芦笋多糖活性的研究主要集中在调节免疫力、抗衰老、抗肿瘤活性等方面，有关芦笋多糖抗炎作用的研究还未见报道(李娟等.中国生化药物杂志，2009，30(03):215
‑
217.)。
[0003]炎症是机体应对刺激的一种防御反应，保护机体免受有害刺激。然而，当炎症不受控制时，容易导致自身免疫性疾病、神经退行性疾病以及癌症。目前，甾体抗炎药和非甾体抗炎药已经被广泛用于炎症的治疗，但是药物长期使用会导致严重的副作用，例如：胃肠道损伤(刘莹等.特产研究，2017，39(01):69
‑
76.)。因此，开发成本低、安全性高和效果好的抗炎药物或功能食品已经成为治疗炎症性疾病的迫切需求。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于提供芦笋多糖在制备抗炎药物中的应用。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术采用了下列技术方案：
[0006]本专利技术提供一种以芦笋多糖为活性成分在制备抗炎药物或保健品中的应用。所述芦笋多糖采用现有技术制备得到。
[0007]与现有技术相比本专利技术具有以下优点：
[0008]本专利技术以芦笋多糖为活性成分，采用LPS(脂多糖)诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型，观察芦笋多糖对巨噬细胞中NO的影响，发现芦笋多糖可抑制巨噬细胞一氧化氮NO的释放，并且对细胞无毒性。芦笋多糖可作为活性成分用于制备抗炎药物或保健品。
附图说明
[0009]图1为芦笋多糖对LPS(脂多糖)诱导的RAW264.7巨噬细胞活力的影响。
[0010]图2为芦笋多糖对LPS(脂多糖)诱导的RAW264.7巨噬细胞NO释放率的影响。注：与正常组比较，
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P<0.01；与模型组比较，*P<0.01，**P<0.001。
具体实施方式
[0011]下面结合实例对本专利技术作进一步详细、完整的说明。
[0012]材料与仪器
[0013](1)材料：芦笋皮购于运城市金惠芦笋种植专业合作社；小鼠RAW264.7巨噬细胞
株，来自美国模式菌种收集中心；DMEM培养基购于美国Gibco公司；胎牛血清购于四季青公司；脂多糖(LPS)购于北京索莱宝科技有限公司；噻唑蓝(MTT)购于生工生物工程(上海)股份有限公司；一氧化氮(NO)检测试剂盒购于上海碧云天生物技术有限公司。
[0014](2)仪器：BSA124S分析天平，Sartorius公司；电热恒温水浴锅，上海博讯医疗生物仪器股份有限公司；SC
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3610低速离心机，安徽中科中佳科学仪器有限公司；HF90二氧化碳细胞培养箱，力康生物医疗科技控股有限公司；Neofuge1600R台式高速离心机，力康生物医疗科技控股有限公司；M200 pro酶标仪，Tecan公司；MH
‑
2微型振荡器，海门市其林贝尔仪器制造有限公司；96孔板，生工生物科技有限公司
[0015]实施例1
[0016]芦笋多糖的制备
[0017]取约100g芦笋皮加入约20～40倍体积的蒸馏水浸泡，经热水浸提2h，于3000rpm离心15min取上清；收集沉淀重复浸提两次，合并上清液并过滤，将上清液减压浓缩至体积的1/5左右后，加入约4倍体积的95％乙醇沉淀芦笋多糖，4℃冰箱静置过夜。3000rpm离心15min取沉淀，冷冻干燥机中冻干即得到芦笋多糖12.65g，得率12.65％。
[0018]实施例2
[0019]芦笋多糖抗炎药效学实验
[0020](1)细胞培养：RAW 264.7巨噬细胞在含有10％胎牛血清、100μg/mL链霉素和100μg/mL青霉素的DMEM中培养。将处于对数期的细胞以5
×
104个/孔的密度接种于96孔板中，每孔100μL，并在37℃、5％CO2的加湿培养箱中过夜培养，用于后续实验。
[0021](2)细胞活力的测定：待RAW264.7细胞生长至对数生长期，以1
×
104/孔的密度接种到96孔培养板中，每孔加入100μL细胞悬液，每组设置3个复孔，且每次实验至少重复3次；培养12h后，弃去原培养基。
[0022]分别设置正常对照组(DMEM培养基)、炎性模型组(LPS1μg/mL)、芦笋多糖(50、100、200μg/mL)药物处理组。待RAW264.7细胞生长至对数期，将芦笋多糖加入细胞中预孵育2h后，加入LPS(脂多糖)1μg/mL，继续培养24h后，每孔加入10μLMTT(5mg/mL)溶液，置于细胞培养箱中继续孵育4h，弃去上清，每孔加入100μL DMSO，放置振荡器中使结晶完全溶解，在490nm处测量吸光度值。
[0023]按照公式：
[0024][0025](3)NO含量的测定：通过格里斯(Griess)法检测NO含量。待RAW264.7细胞生长至对数生长期，以1
×
104/孔的密度接种到96孔培养板中，每孔加入100μL细胞悬液，每组设置3个复孔，且每次实验至少重复3次；培养12h后，弃去原培养基。，将芦笋多糖加入细胞中预孵育2h后，加入LPS(脂多糖)1μg/mL，继续培养24h后。培养结束后收集细胞培养液上清，用NO检测试剂盒进行NO含量的测定。将50μL上清液铺在96孔板中，并在其中加入等量的Griess试剂，然后用酶标仪测定540nm处的吸光度。使用亚硝酸钠(NaNO2)标准品绘制标准曲线(0—100μM)，根据标准曲线计算NO的含量。
[0026]结果分析
[0027]如图1所示，为本专利技术实例中芦笋多糖对LPS(脂多糖)诱导的RAW264.7巨噬细胞活力的影响结果，结果表明芦笋多糖对RAW264.7巨噬细胞无毒性，并且对细胞有显著的增殖作用。如图2所示，为本专利技术实例中芦笋多糖对LPS(脂多糖)诱导的RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响结果，结果表明，芦笋多糖可显著抑制LPS(脂多糖)诱导的RAW264.7巨噬细胞上清液中NO的分泌，且呈剂量依赖性。研究结果表明芦笋多糖在体外抗炎上有明显的效果，可应用在药物、功能食品的开发中。
[0028]本专利技术说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。尽管上面对本专利技术说明性的具体实施方式进行了描述，以便于本技术领的技术人员理解本专利技术，但应该清楚，本专利技术不限于具体实施方式的范围，对本
的普通技术人员来讲，只要各种变化在所附的权利要求限定和确定的本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.芦笋多糖在制备抗炎药物或保健品中的应用。2.根据权利要求1所述的芦笋多糖在制备抗炎药...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔婷，李震宇，李紫珊，张蕊，秦雪梅，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：