一种在鲤EPC细胞中高效瞬时转染质粒的方法技术

本发明专利技术公开了用于鲤EPC细胞转染的乳白蛋白载体，乳白蛋白载体为表面修饰有马来酰亚胺的α

【技术实现步骤摘要】
一种在鲤EPC细胞中高效瞬时转染质粒的方法


[0001]本专利技术属于基因工程
，涉及一种用于细胞转染的乳白蛋白载体，还涉及一种用于细胞转染的乳白蛋白载体的制备方法，还涉及一种在鲤EPC细胞中高效瞬时转染质粒的方法，还涉及乳白蛋白载体的用途。

技术介绍

[0002]鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini,EPC)起源于鲤鱼表皮疱疹病毒感染引起的病变组织，目前已经衍生出80多株细胞系。其生长适应温度范围较广(15℃
‑
33℃)，且能在7℃
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10℃的环境种存活数月。EPC细胞的生长特性使其成为研究鲤基因功能、细胞增殖、分化、凋亡的理想材料，也是其他淡水鱼类基因功能研究的重要材料。
[0003]细胞转染是研究和控制真核细胞基因功能的常规实验，在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。转染是将外源DNA片段导入真核细胞以获得新的生物学特性的方式，大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。(1)物理介导是通过物理方法将基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于细胞转染的乳白蛋白载体，其特征在于，所述乳白蛋白载体为表面修饰有马来酰亚胺的α
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乳白蛋白球型颗粒。2.如权利要求1所述的用于细胞转染的乳白蛋白载体，其特征在于，所述乳白蛋白载体具有正电势。3.用于细胞转染的乳白蛋白载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1.1)将α
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乳白蛋白通过酶解后以超声重聚的方法使其成为球型颗粒；1.2)连接马来酰亚胺至球型的α
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乳白蛋白颗粒中使其形成乳白蛋白载体。4.如权利要求3所述的用于细胞转染的乳白蛋白载体的制备方法，其特征在于，步骤1.1)中，将α
‑
乳白蛋白粉末溶解于PBS溶液中，加入地衣芽孢杆菌水解酶进行酶解，之后超声震荡约45s。5.如权利要求3所述的用于细胞转染的乳白蛋白载体的制备方法，其特征在于，在所述步骤1.1)之后还包括如下步骤：1.3)向经过超声震荡的蛋白中加入1
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乙基
‑3‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵然，李炯棠，张研，王琦，李尚琪，孙晓晴，黄杨美迪，崔明姝，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院，
类型：发明
国别省市：