【技术实现步骤摘要】
一种基于宏基因组测序的游离核酸建库方法
[0001]本专利技术涉及宏基因组检测领域，具体涉及一种基于宏基因组测序的游离核酸建库方法。
技术介绍
[0002]感染性疾病是世界范围内导致人类死亡的主要原因之一。传统的病原体检测方法主要受限于通量低，时间长，灵敏度低。新兴的宏基因组二代测序可一次性检测样本中的未知、罕见、不典型等所有病原体，提示耐药基因和毒力因子，且具有最高的阴性预测值，适用于疑难危重症病例病原体的快速诊断、新发和罕见病原体的发现，以及“排除”感染。
[0003]随着宏基因组测序技术的不断发展，其在临床疑难感染性疾病诊断方面的应用越来越广泛，广泛用于败血症、脑膜炎、脑炎等感染性疾病。其中对于血流感染患者，如果使用全血进行核酸提取及建库，虽然包括了最全面的病原信息，但是大量的人源基因会掩盖了极微量的病原微生物信息，同时游离短片段容易丢失，降低了有效病原体检出。如果用血浆中的游离核酸检测，虽然克服了全血样本中大量红细胞、血红素、白细胞干扰的检测，但是也会有部分血液细胞内病原微生物的丢失，这在一定程度上降低了准确...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于宏基因组测序的游离核酸建库方法，其特征在于，所述方法包括样本前处理、样本破壁处理、样本核酸提取和样本核酸文库构建步骤；所述样本为无细胞体液样本；所述样本破壁处理是将样本置于匀浆机中进行3个循环的破壁处理。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无细胞体液样本为血浆或脑脊液。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，样本前处理时，当所述样本为血浆时，在血浆样本中加入全血，且全血与血浆的体积比为1:50至3:50。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述全血与血浆的体积比为2:50。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，样本核酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：余艳，许寻寻，代冰，唐春燕，葛虎，谭兵健，谢琴，
申请(专利权)人：长沙金域医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：
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