一株耐盐促生的辽宁慢生根瘤菌RY6菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株耐盐促生的辽宁慢生根瘤菌(Bradyrhizobium liaoningense)RY6菌株及其应用，所述菌株于2021年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2021478。本发明专利技术所述RY6菌株具有较强的耐盐能力，是花生的高效匹配菌株，接种后可使花生高效结瘤并达到高产的特性，以不接菌对比，接种该根瘤菌能够显著提高花生的产量，产量提高86.03％以上，能广泛适用于我国南方土壤，并且能够使花生达到高产，具有较大的应用前景。具有较大的应用前景。具有较大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株耐盐促生的辽宁慢生根瘤菌RY6菌株及其应用


[0001]本专利技术涉及功能微生物
，更具体地，涉及一株适合南方花生种植的具有耐盐能力且能使花生高效结瘤、促进生长的辽宁慢生根瘤菌RY6菌株及其应用。

技术介绍

[0002]氮素是植物生长最重要的营养元素之一，土壤中氮素主要由土壤矿物分解出的氮、土壤微生物所固定的氮及施用化肥的氮三部分组成。农业生产中氮肥的施用是保证高产的重要手段，但盲目的大量施用氮肥使得土壤中化肥的含量已大大超过了土壤库容和作物吸收的需要，导致化肥利用率降低，同时造成土壤板结及环境污染等生态问题。统计表明，我国氮肥的利用率极低，50％以上通过氨挥发、径流、硝化
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反硝化、淋洗等途径损失。生物固氮具有高效和环境友好的特点，据统计报告估算，全球每年粮食、油料和纤维作物生长所需的氮肥价值达330 亿美元,其中豆科作物的生物固氮作用提供了约50亿美元的氮源。据计算，全世界每年收获的农产品约从土壤中带走11000万吨氮素，而现代合成氨工业所能提供的氮素仅为4500万吨，即使其利用率高达60
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70％也只能提供世界农业对氮素需要的20
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30％，其余的70
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80％，均来自有机肥料和生物固氮。接种根瘤菌是豆科作物种植必要的栽培手段，豆科植物与根瘤共生能将大气中的N2转化为NH
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，此过程是高效和环境友好的。据估计，全球每年生物固氮量达1.75亿吨，为世界工业氮肥产量的4.37倍，其中通过豆科植物和根瘤菌所固定的氮素约有5500 万吨。在美国、巴西等国家，接种根瘤菌面积一般都占播种面积的50％以上，既改善了土壤，保护了环境，又有利于维持氮素平衡。目前，我国共生固氮的基础研究已达到国际先进水平，但根瘤菌剂的产业化和大面积推广应用却很落后，豆科作物接种根瘤菌剂的面积仅占播种面积的1％～3％，与国外相比差距甚大。
[0003]根瘤菌与豆科植物共生受豆科植物、根瘤菌及土壤理化性状的影响，只有在特定环境下筛选出的高效根瘤菌菌株接种到相应豆科植物上才能发挥最大的固氮效率。豆科植物接种根瘤菌除有固氮作用外，还有融磷和分泌生长素等促进植物生长的作用。
[0004]花生(Arachis hypogaea Linn.)是主要的油料作物，在南方适宜的气候条件下可以1年3熟。花生接种高效根瘤菌有较强的固氮能力，实践证明，花生在播种时，采用人工接种根瘤菌，一般能增产15％左右。花生栽培接种根瘤菌技术至今已有40余年，在山东施用“富思德”，在常规施肥基础上施用固体根瘤菌肥比常规施肥处理的根瘤数、产量和效益分别增加261.97％、15.2％和50835元/hm2。在常规施肥基础上减少氮肥一半用量并分别施用固体和液体花生根瘤菌肥的两处理比常规施肥根瘤数增加247.18％、8％；产量增加8.4％、7.9％；效益增加2870.7 元/hm2、3346.8元/hm2。
[0005]在南方花生适合种植于沙壤中，而在沿海区域的沙壤含盐量都较高，故需筛选耐盐的根瘤菌株用于接种才能达到增产的目的。有的根瘤菌还能溶解难容性磷和分泌生长素，在盐胁迫下接种根瘤至少有缓解植物的营养亏缺，提高植物的耐盐能力的作用。苜蓿接种耐盐根瘤菌的研究表明：盐渍地接种耐盐根瘤菌可使紫花苜蓿干草产量提高50.0％～93.2％，根系生物量提高39.2～44.53％，结瘤量提高70.97～73.39％，第二茬的草产量提
高91.6～104.7％，接种根瘤菌显著的提高了苜蓿的成苗率和生长势。例如中国专利公开了一株适合东北地区的抗逆固氮的慢生根瘤菌DBPB1，然而目前尚无适合南方花生种植具有耐盐能力且能促进生长的根瘤菌菌株和菌剂。故从我国南方种植花生不同类型土壤中筛选适合于特定区域的花生高效固氮根瘤菌有重要的现实意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一株适合南方花生种植的具有耐盐能力且能促进生长、根瘤固氮的辽宁慢生根瘤菌RY6菌株。
[0007]本专利技术的第二个目的在于提供所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株的应用。
[0008]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：
[0009]一株耐盐促生的辽宁慢生根瘤菌(Bradyrhizobium liaoningense)RY6菌株，所述菌株于2021年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：M 2021478。
[0010]具体地，所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株其16S rDNA序列如SEQ ID NO 1 所示。
[0011]本专利技术RY6菌株从南方花生主要种植地采集新鲜根瘤回到实验室进行分离和纯化而来，并对菌株的16S rDNA部分序列进行测定，通过系统发育分析，确定为慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、辽宁慢生根瘤菌(Bradyrhizobiumliaoningense)的新株系，并命名为热研6号(RY6)，并将该菌株于2021年4月 28日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO： M 2021478。本专利技术的辽宁慢生根瘤菌(Bradyrhizobium liaoningense)RY6菌株通过耐盐试验、实验室盆栽、回接试验证明其具有较强的耐盐能力，且接种花生后后可使花生高效结瘤并达到高产的特性，以不接菌对比，接种该根瘤菌能够显著提高花生的产量，产量提高86.03％以上，可适用于花生种植中，作为花生常规栽培的措施之一。
[0012]因此，本专利技术请求保护所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株或其发酵菌液在花生根瘤固氮促生长中或在制备花生根瘤菌菌剂中的应用。所述促生长具体表现在促进花生的整株鲜重增加、花生产量增加和根瘤数量增加。
[0013]本专利技术还提供一种根瘤菌菌剂，所述菌剂含有上述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株或其发酵菌液。
[0014]优选地，所述发酵菌液的浓度为大于1
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109CFU/mL。
[0015]进一步优选地，还包括菌体吸附材料。
[0016]进一步优选地，所述菌体吸附材料包括但不限于草炭、蛭石、珍珠岩或椰糠中的任一一种或多种。
[0017]进一步优选地，所述发酵菌液与菌体吸附材料的比例为：10mL发酵菌液 /15～50g菌体吸附材料。混合比例优选10mL菌液/50g草炭、10mL菌液/15g蛭石或10mL菌液/15g珍珠岩。其中以50％的草炭和50％椰糠混合制备的菌剂性价比最高。
[0018]本专利技术还提供上述任一所述根瘤菌菌剂在花生根瘤固氮促生长中的应用。
[0019]一种促进花生根瘤固氮的方法，是将上述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株接种于液体培养基得到发酵菌液后拌种或直接回接到花生根部，或将上述任一所述根瘤菌菌剂在花生播种前拌种或直接回接到花生根部。
[0020]优选地，所述液体培养基为YMA液体培养基。
[0021]优选地，所述拌种处理为用菌液浸泡种子8分钟～10分钟。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株耐盐促生的辽宁慢生根瘤菌(Bradyrhizobium liaoningense)RY6菌株，其特征在于，所述菌株于2021年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2021478。2.根据权利要求1所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株，其特征在于，其16S rDNA序列如SEQ ID NO 1所示。3.权利要求1所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株或其发酵菌液在花生根瘤固氮促生长中或在制备花生根瘤菌菌剂中的应用。4.一种根瘤菌菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述辽宁慢生根瘤菌RY6菌株或其发酵菌液。5.根据权利要求4所述根瘤菌菌剂，其特征在于，所述发酵菌液的浓度为大于1
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【专利技术属性】
技术研发人员：张洁，董荣书，刘国道，刘攀道，陈志坚，李欣勇，黄睿，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：