一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液及其应用。本发明专利技术提出的一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液，在M16培养液中添加伴刀豆球蛋白A，通过调节皮质张力恢复冷冻卵母细胞机械特性从而提高冷冻卵母细胞体外培育质量。本发明专利技术首次提出通过调节皮质张力恢复冷冻卵母细胞机械特性从而提高冷冻卵母细胞体外培育质量的技术路线，明确了通过调节皮质张力可以恢复冷冻卵母细胞机械特性，增强纺锤体组装检验点活性，降低非整倍体比例，进而提高冷冻卵母细胞体外培育的内在质量。本发同时给出ConA在M16培养液中的添加浓度为1

【技术实现步骤摘要】
一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液及其应用


[0001]本专利技术涉及繁殖
，具体涉及一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液及其应用。
技术背景
[0002]卵母细胞冷冻技术是重要的生殖生物学技术，广泛应用于种质资源保存、生育力保存及辅助生殖技术中，但解冻后卵母细胞存在发育潜能下降等问题，有报道称至少冷冻20枚成熟卵母细胞方可获得出生后代，严重制约了此项技术的广泛应用，因此，提高冷冻卵母细胞利用效率是亟待解决的问题，对解冻损伤机制的深入解析是提高冷冻卵母细胞有效利用的前提。
[0003]卵母细胞发育经历了由GV、GVBD(卵母细胞开始体外成熟后2.5h)至MII期(卵母细胞开始体外成熟后12h)的减数分裂过程，我们前期研究发现冷冻GV期卵母细胞体外成熟后非整倍体比例显著升高，动粒
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微管(kinetochore
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microtubule,KT
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MT)错误连接可造成染色体不正确分离。皮质位于质膜下，在维持细胞形状及机械特性方面发挥重要作用。玻璃化冷冻中，卵母细胞在脱水<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液，其特征在于，在M16培养液中添加伴刀豆球蛋白A，通过调节皮质张力恢复冷冻卵母细胞机械特性从而提高冷冻卵母细胞体外培育质量。2.根据权利要求1所述提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液，其特征在于，所述伴刀豆球蛋白A的添加浓度为1
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100μg/ml。3.根据权利要求2所述提高冷冻卵母细胞体外培育质量的培养液，其特征在于，所述伴刀豆球蛋白A的添加浓度为10μg/ml。4.一种提高冷冻卵母细胞体外培育质量的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、采集GV期卵母细胞并置于M2液滴中备用；S2、将卵母细胞转移至平衡液中30秒，随后转移至玻璃化冷冻液中20
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30秒，然后迅速将卵母细胞置于载杆前端，投...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅祥伟，李俊，杜幸柱，颛清芮，侯云鹏，
申请(专利权)人：河北医科大学第一医院，
类型：发明
国别省市：