一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒及应用。本发明专利技术研究证实乳腺癌中SHISAL2A表达显著上升。SHISAL2A表达水平与免疫微环境指标StromalScore，ImmuneScore和ESTIMATEScore均呈正相关，与多种免疫细胞浸润正相关，且与免疫检查点基因表达正相关，并且设计了SHISAL2A检测试剂盒。检测试剂盒。检测试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒及应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体地，涉及一种检测SHISAL2A表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用，以及一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌(Breast cancer，BRCA)是世界范围内女性常见的恶性肿瘤之一，其新发率和死亡率位居各类癌症首位。尽管我国乳腺癌发病率相对较低，但人口基数大，总体发病人数多，发病率有逐年上升的趋势，且发病年龄呈年轻化趋势。免疫治疗是一种具有前景的乳腺癌治疗新方式，但存在治疗响应率不高、副作用等问题，因此开发新型辅助免疫治疗新靶点对于临床肿瘤免疫治疗具有重要意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种乳腺癌免疫治疗新靶点SHISAL2A，并由此提供一种检测SHISAL2A表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用，以及一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒及应用。
[0004]本专利技术的第一方面提供一种检测SHISAL2A表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。
[0005]进一步地，所述检测SHISAL2A表达水平包括检测SHISAL2A的mRNA表达水平和/或检测SHISAL2A的蛋白表达水平。
[0006]进一步地，所述检测SHISAL2A表达水平的方法包括：通过RT
‑
qPCR方法检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2A mRNA的表达量；通过分子探针技术检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2A mRNA表达量；通过免疫组化或Western
‑
Blot检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2A蛋白表达量。
[0007]更具体地，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为SHISAL2A基因DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向SHISAL2A的抗体。
[0008]根据本专利技术，优选地，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。
[0009]5’‑
CTTCCGCGACCACAAGTA
‑3’
(SEQ ID NO：1)
[0010]5’‑
ATGAGAGCGCCAATGCTGA
‑3’
(SEQ ID NO：2)
[0011]本专利技术的第二方面提供一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因SHISAL2A检测试剂盒，该试剂盒包括：检测SHISAL2A表达水平的试剂。
[0012]进一步地，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为靶向SHISAL2A基因DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向SHISAL2A的抗体。
[0013]具体地，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为具有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。
[0014]根据本专利技术，所述试剂盒还可以含有其他常规的用于实时荧光定量的试剂，优选地，所述试剂盒还包括以下组分中的至少一种：Trizol、异丙醇、氯仿、无水乙醇、无RNA酶水、随机引物、5
×
M
‑
MLV缓冲液、dNTPs、RNA酶抑制剂、M
‑
MLV逆转录酶、具有SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的ACTB实时荧光定量PCR特异性引物。
[0015]5’‑
GGCACCCAGCACAATGAAGA
‑3’
(SEQ ID NO：3)
[0016]5’‑
ACTCCTGCTTGCTGATCCAC
‑3’
(SEQ ID NO：4)
[0017]本专利技术第三方面提供上述试剂盒在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。
[0018]SHISAL2A是一种蛋白编码基因，本专利技术研究证实乳腺癌中SHISAL2A表达显著上升。SHISAL2A表达水平与免疫微环境指标StromalScore，ImmuneScore和ESTIMATEScore均呈正相关，与多种免疫细胞浸润正相关，且与免疫检查点基因表达正相关，由此说明，SHISAL2A可以作为乳腺癌免疫治疗新靶点。并且基于此设计了SHISAL2A检测试剂盒。
[0019]本专利技术的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
[0020]通过结合附图对本专利技术示例性实施方式进行更详细的描述，本专利技术的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显。
[0021]图1示出了乳腺癌中靶基因SHISAL2A的表达变化。乳腺癌组织中SHISAL2A表达显著上升。
[0022]图2示出了乳腺癌中SHISAL2A表达与肿瘤免疫微环境的相关性。SHISAL2A表达与ESTIMATEScore、StromalScore和ImmuneScore均显著正相关。
[0023]图3示出了乳腺癌中SHISAL2A表达与免疫细胞浸润的相关性。(A)EPIC法检测SHISAL2A表达与免疫细胞浸润显著正相关；(B)Timer法检测SHISAL2A表达与免疫细胞浸润显著正相关；(C)MCPcounter法检测SHISAL2A表达与免疫细胞浸润显著正相关；(D)xCELL法检测SHISAL2A表达与免疫细胞浸润显著正相关。
[0024]图4示出了乳腺癌中SHISAL2A表达与免疫检查点基因的相关性。SHISAL2A表达与免疫检查点基因显著正相关。
[0025]图5示出了乳腺癌中SHISAL2A的表达变化。
具体实施方式
[0026]下面将更详细地描述本专利技术的优选实施方式。虽然以下描述了本专利技术的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施方式所限制。
[0027]实施例中未注明具体条件者，皆按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0028]实施例1
[0029]本实施例用于说明乳腺癌中靶基因SHISAL2A的表达显著上调。
[0030]乳腺癌中SHISAL2A表达分析：
[0031]1、数据下载与整理：
[0032]利用UCSC XENA网站(https://xenabrowser.net/datapages/)下载TCGA乳腺癌表
达谱数据和临床数据资料，SHISAL2A表达谱数据经log2转化后进行组间比较。
[0033]2、乳腺癌中SHISAL2A的表达差异分析
[0034]利用R软件包分析乳腺癌组织与正常组织间SHISAL2A mRNA水平差异，ggplot2包用于可视化，如图1所示。
[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测SHISAL2A表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测SHISAL2A表达水平包括检测SHISAL2A的mRNA表达水平和/或检测SHISAL2A的蛋白表达水平。3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测SHISAL2A表达水平的方法包括：通过RT
‑
qPCR方法检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2AmRNA的表达量；通过分子探针技术检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2AmRNA表达量；通过免疫组化或Western
‑
Blot检测乳腺癌和癌旁组织中SHISAL2A蛋白表达量。4.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为靶向SHISAL2A基因DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向SHISAL2A的抗体。5.根据权利要求4所述的应用，其中，所述检测SHISAL2A表达水平的试剂为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。6.一种乳腺癌辅助...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊伟平，赵小芳，胡明，张虎，
申请(专利权)人：江苏医药职业学院，
类型：发明
国别省市：