一种食源性骨汤纳米颗粒的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及食源性骨汤纳米颗粒的应用，本发明专利技术从猪骨汤中经凝胶过滤色谱分离纯化获得的食源性猪骨汤纳米颗粒组分，通过降低炎症因子IL1β，IL

【技术实现步骤摘要】
一种食源性骨汤纳米颗粒的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及一种食源性骨汤纳米颗粒的应用。

技术介绍

[0002]溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)是一种病因未明，结直肠黏膜的慢性非特异性疾病，该病具有慢性进展、病程长、反复发作等特点，以细胞因子异常产生炎症，增加黏附分子表达和细胞浸润，最终导致上皮细胞凋亡和黏膜损伤为病理特征。目前缺乏有效治疗方法，被WHO列为难治性疾病之一。近20年在中国的发病率和患病率持续增高，并与结肠癌的发生密切相关，UC的治疗已经成为临床的棘手问题。虽然一些糖皮质激素与免疫抑制剂能够缓解症状，但是效果不甚满意，而且长期应用会带来严重的不良反应。因此急需具有安全性高且具有治疗UC的药物。
[0003]近年来，一些食品中广泛存在的天然发生纳米颗粒（naturally occurring nanoparticles）引起了广泛的注意。这些食源性天然发生纳米颗粒这些纳米颗粒伴随着食品已为人们食用了很长时间，具有良好的安全性、生物利用度和生物相容性，更适合在食物和药物产业中的应用。
[0004]例如，绿茶抽提物组装形成抗癌化学治疗剂的纳米载体在安全性和生物相容性方面的优势显示了作为药物的良好前景。
[0005]牛奶蛋白纳米颗粒可以改善口服叶酸和 ω
‑
3 多不饱和脂肪酸在体内的吸收效率。
[0006]明胶自组装形成的纳米颗粒可以搭载儿茶素 EGCG 并保留其生物活性，是一种未来的功能型食品添加剂。
[0007]甘草蛋白自组装的纳米颗粒可以包埋乌头碱，并可以有效降低乌头碱对机体的毒性。
[0008]甚至一些植物来源的可食用天然发生纳米颗粒已经被表明对肠道炎症具有治疗效果。
[0009]猪骨内含有骨髓，富含骨胶原、蛋白质、脂质、多糖、核酸和矿物质成分，经高温煮沸文火慢炖制备成的猪骨汤，不仅味道鲜美，且富有营养，越来越受到世界各地人士的青睐。经研究发现，猪骨汤含有大量的天然发生纳米颗粒，已经被表明具有调节免疫功能与修复肠道屏障受损功能。然而目前为止还尚未有关于食源性骨汤纳米颗粒在防治肠道炎症疾病中的报道。

技术实现思路

[0010]本专利技术的第一个目的在于将制备得到的食源性骨汤纳米颗粒在制备抗溃疡性结肠炎药物中的应用。
[0011]本专利技术的第二个目的在于会将食源性骨汤纳米颗粒在建立溃疡性结肠炎小鼠影响模型中的应用。
[0012]为实现上述专利技术目的，本专利技术通过以下技术方案实现：食源性骨汤纳米颗粒在制备抗溃疡性结肠炎药物中的应用。
[0013]食源性骨汤纳米颗粒在调控菌群失调，修复肠粘膜损伤药物中的应用。
[0014]食源性骨汤纳米颗粒在降低炎症因子的产生，抑制炎症表达药物中的应用。
[0015]作为优选，所述炎症因子包括IL1β、IL
‑
6、TNF
‑
α中的任意一种或多种的组合。
[0016]上述食源性骨汤纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：（1）对猪骨进行热加工制备猪骨汤；（2）对步骤（1）获得的猪骨汤进行离心处理，获得上清液；（3）通过凝胶排阻色谱联合动态光散射仪对步骤（2）得到的上清液进行分离，获得猪骨汤功能性纳米颗粒。
[0017]作为优选，步骤（1）中所述猪骨热加工工艺如下：将猪骨于柠檬酸钠溶液中浸泡后，经蒸馏水清洗去除血水，加入蒸馏水沸煮后过滤得到猪骨汤。
[0018]作为优选，柠檬酸钠溶液的浓度为0.5~3%。
[0019]作为优选，沸煮过程中猪骨与蒸馏水的料液比为1:（1
‑
3）kg/L。
[0020]作为优选，沸煮时间为0.5
‑
3h。
[0021]作为优选，步骤（2）中离心速度为5000
‑
10000r
•
min
‑1，离心时间为10
‑
20min。
[0022]作为优选，步骤（3）中分离步骤如下：将上清液通入凝胶排阻色谱柱，使功能性纳米颗粒结合在凝胶排阻柱上，然后用缓冲液洗脱，同时以280 nm紫外波段联合在线动态光散射对洗脱液进行监测，收集光散射峰的洗脱液，将洗脱液干燥后即获得猪骨汤中功能性纳米颗粒。
[0023]作为优选，所述凝胶排阻色谱柱为琼脂糖或其衍生交联物；其分离范围为60KDa
‑
20000 KDa，孔径为45
‑
165μm。
[0024]作为优选，所述凝胶排阻色谱柱型号为Sephacryl S
‑
1000 SF。
[0025]作为优选，所述缓冲洗脱液为浓度为0.01~0.1M，pH为6.5~7.5的磷酸缓冲液。
[0026]作为优选，所述功能性纳米颗粒的粒径为100
‑
300nm。
[0027]食源性骨汤纳米颗粒在建立结肠炎动物影响模型中的应用。
[0028]所述结肠炎动物影响模型的建立方法如下：（S.1）将实验动物随机分为正常组、模型组、食源性骨汤颗粒组、骨汤组、阳性对照组，对环境进行适应；（S.2）将以蒸馏水将DSS配制成溶液，分别给模型组，食源性骨汤颗粒组，骨汤组，阳性对照组自由饮用，进行造模；其中，在造模过程中：正常组与模型组每天予以蒸馏水灌胃；食源性骨汤颗粒组与骨汤组分别予以食源性骨汤颗粒溶液以及骨汤进行灌胃；阳性对照组每天予以柳氮磺胺吡啶溶液灌胃；（S.3）从给药第一天开始，每日定点定时记录实验动物体重、粪便形态、粪便带血情况，并按参考文献标准对粪便形态、粪便带血情况进行打分；（S.4）给药结束后，对于将实验动物脱颈处死，取出结肠，收集结肠内粪便，评价食源性骨汤纳米颗粒对于实验动物结肠炎的影响。
[0029]作为优选，所述结肠炎为溃疡性结肠炎。
[0030]作为优选，所述步骤（S.1）中实验动物为SPF级五周龄雌性BALB/c小鼠(20
±
2g)；适应环境条件如下：温度为23
±
2℃、湿度为50
±
5％，小鼠适应时间为7天。
[0031]作为优选，所述步骤（S.2）中食源性骨汤颗粒溶液与骨汤的浓度一致。
[0032]作为优选，DSS溶液的浓度为5％。
[0033]作为优选，食源性骨汤颗粒组与骨汤组分别以50 mL（食源性骨汤颗粒组溶液或骨汤）/kg/天的剂量进行灌胃。
[0034]作为优选，阳性对照组按照柳氮磺胺吡啶溶液250 mg/kg/天的剂量进行灌胃。
[0035]进一步，所述的食源性骨汤纳米颗粒在增加结肠炎小鼠的体重、结肠长度，改善结肠炎小鼠的便血情况、粪便形态，改善肠炎小鼠的结肠病理结构中的应用。
[0036]因此，本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术从猪骨汤中经凝胶过滤色谱分离纯化获得的食源性猪骨汤纳米颗粒组分，通过降低炎症因子IL1b，IL
‑
6、TNF
‑
α的产本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.食源性骨汤纳米颗粒在制备抗溃疡性结肠炎药物中的应用。2.食源性骨汤纳米颗粒在调控菌群失调，修复肠粘膜损伤药物中的应用。3.食源性骨汤纳米颗粒在降低炎症因子的产生，抑制炎症表达药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述炎症因子包括IL1β、IL
‑
6、TNF
‑
α中的任意一种或多种的组合。5.食源性骨汤纳米颗粒在建立结肠炎动物影响模型中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述结肠炎动物影响模型的建立方法如下：（S.1）将实验动物随机分为正常组、模型组、食源性骨汤颗粒组、骨汤组、阳性对照组，对环境进行适应；（S.2）将以蒸馏水将DSS配制成溶液，分别给模型组，食源性骨汤颗粒组，骨汤组，阳性对照组自由饮用，进行造模；其中，在造模过程中：正常组与模型组每天予以蒸馏水灌胃；食源性骨汤...

【专利技术属性】
技术研发人员：高观祯，汪惠勤，周建武，余兆硕，柯李晶，饶平凡，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：