寡核苷酸-聚合物多手臂偶联物以及使用方法技术

公开了具有精确数量的聚合物臂和与主链结合的寡核苷酸链的单分散结构。该结构称为多手臂偶联物，对核酸酶降解具有抗性，并且能够在没有共运载体的情况下调节基因表达。在没有共运载体的情况下调节基因表达。在没有共运载体的情况下调节基因表达。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】寡核苷酸
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聚合物多手臂偶联物以及使用方法
[0001]政府利益声明
[0002]本专利技术是在国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的基金号GM121612下由政府资助完成。政府享有本专利技术的某些权利。
[0003]相关申请交叉参考
[0004]根据35U.S.C.
§
119的规定，本申请要求Zhang于2018年4月11日提交的美国临时专利申请62/382,317的优先权，将其全部公开内容通过引用纳入本文。
专利

[0005]本公开提供明确定义分子结构的聚合物
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寡核苷酸纳米偶联物(称为多手臂偶联物)。每个偶联物精确地带有一个、两个、三个、四个或五个寡核苷酸和预定数量的聚合物链，例如，五到五十条链。寡核苷酸和聚合物链连接到中心核，其可以是线性(例如，聚合物主链)或非线性(例如，多价球核)。与线性或轻微支链化的聚合物
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DNA偶联物相比，这些纳米偶联物创造高密度局部聚合物环境。增加的聚合物密度提供了具有空间选择性的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多手臂偶联物，其包括：主链；预定数量的5至50个共价连接至主链的聚合物臂；和预定数量的1至10个共价连接至主链的寡核苷酸，其中，每个寡核苷酸与靶多核苷酸充分互补以与靶多核苷酸杂交或能够在预定条件下与非核酸靶标结合。2.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中所述聚合物臂是聚(乙二醇)。3.如权利要求2所述的多手臂偶联物，其中所述聚合物臂每个为3kDa至30kDa。4.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中所述聚合物臂基本相同。5.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中，所述寡核苷酸选自单链DNA、双链DNA、单链RNA、双链RNA、适体、核酶、DNA酶、反义寡核苷酸、外显子跳跃寡核苷酸、siRNA寡核苷酸、三螺旋形成寡核苷酸、核酶、脱氧核糖核酸酶，或其化学修饰形式或其组合。6.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中，聚合物臂的长度和密度足以通过空间位阻保护1至10个寡核苷酸。7.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中，主链是线性的、二维的或三维的。8.如权利要求7所述的多手臂偶联物，其中，主链选自纳米颗粒、合成的聚合物、天然生物聚合物、或生物聚合物的修饰形式。9.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中，多手臂偶联物是生物相容性的。10.如权利要求1所述的多手臂偶联物，其中，预定数量的寡核苷酸包含至少一种反义寡核苷酸。11.如权利要求1～10中任一项所述的多手臂偶联物，其中，1至10个寡核苷酸各自包括8至30个碱基。12.如权利要求11所述的多手臂偶联物，其中，1至10个寡核苷酸的每一个独立地在寡核苷酸的5'或3'端偶联至主链，或通过寡核苷酸序列内的非末端位点连接。13.如权利要求11所述的多手臂偶联物，其中，1至10个寡核苷酸通过可切割的键偶联至主链。14.如权利要求11所述的多手臂偶联物，其中，1至10个寡核苷酸包括不同长度和/或不同序列的寡核苷酸。15.如权利要求11所述的多手臂偶联物，其中，1至10个寡核苷酸中的至少一个通过寡核苷酸的非末端位点共价连接到主链上。16.如权利要求15所述的多手臂偶联物，其中，寡核苷酸的非末端偶联位点位于或靠近序列的中间。17.如权利要求11所述的多手臂偶联物，其中，所述聚合物臂包含PEG并且1至10个寡核苷酸包含至少一个双链或单链DNA寡核苷酸，其共价连接至DNA核。18.一种调节或改变由靶多核苷酸编码的基因产物的表达的方法，包括使靶多核苷酸与权利要求11所述的多手臂偶联物接触，其中所述接触在不存在转染载体的情况下发生。19.如权利要求18所述的方法，其中，多手臂偶联物的1至10个寡核苷酸的每一个独立地在寡核苷酸的5'或3'端偶联至主链，或通过寡核苷酸序列内的非末端位点连接。20.如权利要求18所述的方法，其中，多手臂偶联物的1至10个寡核苷酸的至少一个通过可切割的键偶联至主链。21.如权利要求18所述的方法，其中，多手臂偶联物的1至10个寡核苷酸包括不同长度
和/或不同序列的寡核苷酸。22.如权利要求18所述的方法，其中，多手臂偶联物的1至10个寡核苷酸中的至少一个通过寡核苷酸的非末端位点共价连接到主链上。23.如权利要求22所述的方法，其中，寡核苷酸的非末端偶联位点位于或靠近序列的中间。24.如权利要求18～23中任一项所述的方法，其中所述靶多核苷酸选自真核、原核和病毒多核苷酸。25.如权利要求24所述的方法，其中，所述靶多核苷酸是对哺乳动物癌细胞、非癌哺乳动物细胞、植物细胞、细菌或病毒具有特异性的多核苷酸。26.一种促进靶细胞对寡核苷酸的细胞摄取的方法，包括使靶细胞与权利要求11所述的多手臂偶联物接触，其中所述细胞摄取在不存在转染载体的情况下发生。27.如权利要求26所述的方法，其中，主链是疏水性的。28.如权利要求26所述的方法，其中，多手臂偶联物的1至10个寡核苷酸的每一个独立地在寡核苷酸的5'或3'端偶联至主链(或核)，或通过寡核苷酸序列内的非末端位点连接。29.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：张可，
申请(专利权)人：东北大学，
类型：发明
国别省市：