AAV介导的RPGRX连锁视网膜变性的基因编辑治疗制造技术

提供一种特异性靶向编码视网膜色素变性GTP酶调节剂(RPGR)基因的gRNA，所述gRNA特异性结合所述RPGR基因的第14号内含子，还提供包含密码子优化的人RPGR ORF15核苷酸序列的核酸分子，及所述gRNA和所述核酸分子在治疗RPGR X连锁视网膜变性中的应用。X连锁视网膜变性中的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】AAV介导的RPGR X连锁视网膜变性的基因编辑治疗


[0001]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种用于基因编辑治疗RPGR X连锁视网膜变性的gRNA和靶向载体。

技术介绍

[0002]视网膜色素变性(retinitis pigmentosa，RP)是由于视网膜光感受器细胞及视网膜色素上皮细胞进行性、选择性丧失为主要特征的遗传性致盲眼病，是儿童和工作年龄人群不可逆双眼盲的主要病因之一，目前无有效疗法。
[0003]RP通常是由基因突变引起的，基于基因的治疗有基因替代治疗和基因编辑治疗。但由于引起RP的突变基因位置的特殊性和外源基因的表达难以调控，亟需更加安全有效的治疗方法。

技术实现思路

[0004]本申请提供了一种特异性靶向视网膜色素变性GTP酶调节剂的基因(RPGR基因)的gRNA，其特异性结合所述RPGR基因的第14号内含子，所述gRNA对所述RPGR基因的第14号内含子具有好的切割效率。本申请提供了核酸分子，其包含密码子优化的人RPGR ORF15核苷酸序列。与野生型RPGR ORF15相比，所述密码子优化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.特异性靶向编码视网膜色素变性GTP酶调节剂的基因(RPGR基因)的gRNA，其特异性结合所述RPGR基因的第14号内含子。2.根据权利要求1所述的gRNA，其特异性结合SEQ ID NO:102所示的核苷酸序列，或特异性结合与SEQ ID NO:102所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述gRNA，其中所述gRNA包含SEQ ID NO.105
‑
126中任一项所示的核苷酸序列。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述gRNA，其中所述gRNA包含5
’‑
(X)n
‑
SEQ ID NO:105
‑
126中任一项所示的核苷酸序列
‑
骨架序列
‑3’
，其中X为选自A、U、C和G中任一个的碱基，且n为0
‑
15中的任一整数。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述gRNA，其中所述gRNA为单链向导RNA(sgRNA)。6.一种或多种分离的核酸分子，其编码权利要求1
‑
5中任一项所述的特异性靶向RPGR基因的gRNA。7.质粒，其包含权利要求6所述的分离的核酸分子。8.根据权利要求7所述的质粒，其为病毒载体。9.根据权利要求7
‑
8中任一项所述的质粒，其包括编码DNA核酸内切酶的核酸分子。10.根据权利要求9所述的质粒，其中所述DNA核酸内切酶包括Cas核酸酶。11.根据权利要求9
‑
10中任一项所述的质粒，其中所述DNA核酸内切酶包括Cas9核酸酶、其同源物、其天然存在分子的重组体、其密码子优化版本，和/或其经修饰版本。12.核酸分子，其包含密码子优化的人RPGR ORF15核苷酸序列。13.根据权利要求12所述的核酸分子，其包含SEQ ID NO:44所示的核苷酸序列。14.靶向载体，其包含权利要求12
‑
13中任一项所述的核酸分子。15.根据权利要求14所述的靶向载体，其包含1)5
’
上游靶区域；2)权利要求12
‑
13中任一项所述的核酸分子；以及3)3
’
下游靶区域；其中所述5
’
上游靶区域和/或所述3
’
下游靶区域能够被权利要求1
‑
4中任一项所述gRNA所识别和/或切割。16.根据权利要求15所述的靶向载体，其中所述5
’
上游靶区域和/或所述3
’
下游靶区域包含核苷酸突变，所述突变提高了权利要求12
‑
13中任一项所述的核酸分子被导入受试者的基因组的准确率。17.根据权利要求15
‑
16中任一项所述的靶向载体，其中所述5
...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜娟，杨丽萍，张宏权，乔静，张天赋，张凡，和赛超，曾露颖，裴红杰，
申请(专利权)人：北京中因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：