抗体及其制备方法和编码核酸以及工程细胞技术

本公开涉及一种制备抗体的方法、抗体、编码该抗体的核酸和一种工程细胞。本公开提供的抗体能够抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS

【技术实现步骤摘要】
抗体及其制备方法和编码核酸以及工程细胞


[0001]本公开涉及生物
，具体地，涉及一种制备抗体的方法、抗体、编码该抗体的核酸和一种工程细胞。

技术介绍

[0002]中和抗体是当病原微生物侵入机体时会产生相应的抗体。病原微生物入侵细胞时需要依赖病原体自身表达的特定分子与细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。中和抗体是B淋巴细胞产生的某些抗体，能够与病原微生物表面的抗原结合，从而阻止该病原微生物黏附靶细胞受体，防止侵入细胞。
[0003]严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS
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CoV
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2)引起的新冠肺炎COVID
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19已作为严重的疾病在全球传播大流行(Callaway et al.，2020)。目前，尚无针对病毒与靶标相互作用的经过验证的疗法可用于新冠肺炎。而中和抗体由人体免疫系统产生，可以有效阻止病毒感染细胞。但运用康复患者血浆进行治疗虽成效显著，但由于血浆来源有限，不能广泛使用。因此亟需对筛选出有效的中和抗体并实现量产以供大批量治疗需求。/>
技术实现思路
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备抗体的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、获得抗原免疫后的人体或动物体的血液样本，并将所述血液样本分为第一样本和第二样本；S2、对所述第一样本进行B细胞mRNA受体测序，得到第一测序结果；S3、对所述第二样本进行B细胞的单细胞mRNA VDJ测序，得到第二测序结果；S4、将所述第一测序结果和所述第二测序结果进行抗原特异性聚类，得到B细胞受体重链簇；S5、在所述B细胞受体重链簇中根据表达量筛选来源于单细胞VDJ测序的候选中和抗体序列重链；S6、对筛选得到的候选中和抗体序列重链查找其配对的轻链，对于多条轻链根据表达量进行筛选进行配对，得到轻
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重链对；S7、从所述轻
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重链对中根据表达量、种型、CDR1/CDR2突变率、匹配注释得分、拼接质量得分、可产生性、被测序细胞完整性、全长完整度筛选出候选轻
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重链对；S8、提取候选轻
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重链对的可变区域部分的序列，根据参考基因组序列添加V基因头部不变序列部分，并且添加恒定区片段形成完整的中和抗体序列；S9、将所述中和抗体序列进行表达并通过ELISA试验进行筛选，得到目标抗体。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述抗原包括病毒、细菌、小分子化合物半抗原；所述动物体包括哺乳动物、鸟类，优选包括猴、牛、羊、兔、鼠、犬。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述单细胞VDJ测序采用10x Genomics Immune Profiling或Smart
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SEQ/Smart
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SEQ2协议；所述抗原特异性聚类方法采用iSMART方法或Gliph2方法。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述抗原特异性聚类的筛选条件包括：(1)簇内包含来自单细胞VDJ测序的重链序...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋庆华，王平平，罗檬，周文洋，许召春，靳喜云，
申请(专利权)人：王平平步志高赵东明，
类型：发明
国别省市：