一种基于MALDI-TOFMS的ζ-珠蛋白的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于MALDI

【技术实现步骤摘要】
一种基于MALDI
‑
TOF MS的
ζ
‑
珠蛋白的检测方法


[0001]本专利技术涉及ζ
‑
珠蛋白检测
更具体地，涉及一种基于MALDI
‑
TOF MS的ζ
‑
珠蛋白的检测方法。

技术介绍

[0002]ζ
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珠蛋白是人类胚胎期血液中特有的血红蛋白成分，正常人在出生3个月后不再被检出。但SEA缺失型α地中海贫血的基因携带者的血红蛋白中仍可检出微量的ζ
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珠蛋白，所以检测成年人的ζ
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珠蛋白，对筛查发现SEA型α地中海贫血基因携带者有积极的意义。对ζ
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珠蛋白的检测，现有较为通用的方法主要为ELISA法和基于基因分析的方法等。其中，ELISA法要求在目前地中海贫血筛查的一般环境中增加新的仪器设备，并且存在检测时间较长，效率较低，成本较高以及敏感度和特异性难以达到要求等缺点；而基于基因分析的方法，则因效率低、成本高而难以普及使用。
[0003]MALDI
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于MALDI
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TOF MS的ζ
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珠蛋白的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：制备抗体偶联磁珠：ζ
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珠蛋白抗体与磁珠分别用碱性缓冲液进行一次清洗，清洗后的ζ
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珠蛋白抗体和磁珠偶联，然后用牛血清白蛋白溶液进行二次清洗，获得抗体偶联磁珠；富集检测样本：将含有ζ
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珠蛋白的全血样本进行前处理，然后与所述抗体偶联磁珠混匀，孵育1h，得到富集到ζ
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珠蛋白的抗体偶联磁珠；清洗
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洗脱：将所述富集到ζ
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珠蛋白的抗体偶联磁珠依次用包含0.1％的吐温
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20的碱性缓冲液和水进行清洗，然后用醋酸洗脱液进行洗脱，得到包含ζ
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珠蛋白的洗脱液；点样检测：将所述包含ζ
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珠蛋白的洗脱液与SA基质混合后点在疏水靶板上，干燥结晶，在MALDI
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TOF MS上进行检测。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述磁珠为亲和素磁珠或羧基磁珠。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述牛血清白蛋白溶液中牛血清白蛋白的质量浓度为0.1％。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙朋卫，孙德慧，李晨，周晓光，李运涛，
申请(专利权)人：融智生物科技青岛有限公司，
类型：发明
国别省市：