鼠抗MCR-1蛋白杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用制造技术

本发明专利技术提供鼠抗MCR

【技术实现步骤摘要】
鼠抗MCR
‑
1蛋白杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用


[0001]本专利技术属于抗体制备
，尤其是涉及一种鼠抗MCR
‑
1蛋白杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用。

技术介绍

[0002]多黏菌素是一种阳离子多肽类抗生素，作用于革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖，破坏细菌细胞结构，是治疗碳青霉烯类耐药革兰氏阴性菌最有效的抗生素。近年来由于多黏菌素的临床使用增加，耐药菌株数量也逐年增加。在多种药机制中，mcr
‑
1属于磷酸乙醇胺转移酶家族，MCR
‑
1蛋白可修饰脂质A，导致多黏菌素对细菌脂多糖亲和力下降，从而介导细菌对多黏菌素耐药。同时mcr
‑
1基因通过质粒在不同细菌中水平传播，甚至可以与其他耐药基因共同存在于同一质粒，表达后产生多种耐药机制。因此建立一种快速、准确的mcr
‑
1耐药菌株检测方法显得尤为重要。
[0003]目前，检测mcr
‑
1耐药菌株主要通过分子生物学手段，但由于其对检测设备、环境要求较高，不便于普及。免疫学分析方法具备灵敏度高、特异性强、周期短、操作简单、成本低等优点，其中酶联免疫吸附法最为常用。针对以上情况，本专利技术提取MCR
‑
1蛋白作为抗原，获得高纯度的抗原后，在小鼠体内激起良好的免疫反应，进而采用杂交瘤技术，筛选高亲和力和特异性的单克隆抗体，在此基础上建立双抗夹心ELISA方法，实现对mcr
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1耐药菌株的快速检测。
专利技术内容
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种鼠抗MCR
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1蛋白杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用。
[0005]本专利技术采用的技术方案是：鼠抗MCR
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1蛋白杂交瘤细胞株，命名为1HD4，保藏编号为CGMCC No.23031；或者命名为1JA9，保藏编号为CGMCC No.23033。
[0006]鼠抗MCR
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1蛋白抗体，抗体1HD4，包括轻链可变区和重链可变区，轻链可变区包括如SEQ ID NO:1所示的CDRL1、SEQ ID NO:2所示的CDRL2和SEQ ID NO:3所示的CDRL3，重链可变区包括如SEQ ID NO:4所示的CDRH1、SEQ ID NO:5所示的CDRH2和SEQ ID NO:6所示的CDRH3；SEQ ID NO:1 RASQDISNYLN （CDRL1）SEQ ID NO:2 YTSRLHS（CDRL2）SEQ ID NO:3 QQGNTFPYT（CDRL3）SEQ ID NO:4 GYIFTCCKMY（CDRH1）SEQ ID NO:5 YFDPYNGDTSSNQKFKG（CDRH2）SEQ ID NO:6 WLQNYYAMDY（CDRH3）或者，抗体1JA9，轻链可变区包括如SEQ ID NO:11所示的CDRL1、SEQ ID NO:12所示的
CDRL2和SEQ ID NO:13所示的CDRL3，重链可变区包括如SEQ ID NO:14所示的CDRH1、SEQ ID NO:15所示的CDRH2和SEQ ID NO:16所示的CDRH3；SEQ ID NO:11 RSSQNIVHSYGNPSLE（CDRL1）SEQ ID NO:12 KVSNRFS（CDRL2）SEQ ID NO:13 FQASHVPWT（CDRL3）SEQ ID NO:14 GYTFTSYIMH（CDRH1）SEQ ID NO:15 YFNPYTDGSKYNEMFNG（CDRH2）SEQ ID NO:16 GPYGNYAMDY（CDRH3）优选地，抗体1HD4轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:7所示，重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:9所示；SEQ ID NO:7DVQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGADYSLTISNLEEEDIATYFCQQGNTFPYTFGGGTKLEIKSEQ ID NO:9VKLQESGPELVKPGASVKVSCKASGYIFTCCKMYWVKQSHGKSLEWIGYFDPYNGDTSSNQKFKGKVTLTVDKSSSTAYMFLNSLTSEDSAVYYCASWLQNYYAMDYWGQGTSVTVSS抗体1JA9轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:17所示，重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:19所示；SEQ ID NO:17EILLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQNIVHSYGNPSLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQASHVPWTFGGGTKLEIKRADSEQ ID NO:19VKLQESGPELVKPGASVKMSCRTSGYTFTSYIMHWVKQKPGQGLEWIGYFNPYTDGSKYNEMFNGKATLSSDKSSGTAYMEFSSLTSEDSAVYYCARGPYGNYAMDYWGQGTSVTVSAAKT优选地，抗体1HD4由保藏编号为CGMCC No.23031的鼠抗MCR
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1蛋白杂交瘤细胞株产生；抗体1JA9由保藏编号为CGMCC No.23033的鼠抗MCR
‑
1蛋白杂交瘤细胞株产生。
[0007]一种核酸分子，包含编码鼠抗MCR
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1蛋白抗体的核苷酸。
[0008]优选地，所述核酸分子编码抗体1HD4的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示，所述核酸分子编码抗体1HD4的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示；SEQ ID NO:8GATGTCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGTAATTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAGCAGATTATTCTCTCACCATCAGTAACCTGGAGGAGGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACATTTCCGTACACATTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATCAAASEQ ID NO:10GTGAAGCTGCAGGAATCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCTTCTGGTTATATATTCACTTGCTGCAAAATGTACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGATA
TTTTGATCCTTACAATGGTGATACTAGTTCCAACCAGAAGTTCAAGG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鼠抗MCR
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1蛋白杂交瘤细胞株，其特征在于：命名为1HD4，保藏编号为CGMCC No.23031；或者命名为1JA9，保藏编号为CGMCC No.23033。2.鼠抗MCR
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1蛋白抗体，其特征在于：抗体1HD4，包括轻链可变区和重链可变区，轻链可变区包括如SEQ ID NO:1所示的CDRL1、SEQ ID NO:2所示的CDRL2和SEQ ID NO:3所示的CDRL3，重链可变区包括如SEQ ID NO:4所示的CDRH1、SEQ ID NO:5所示的CDRH2和SEQ ID NO:6所示的CDRH3；或者，抗体1JA9，轻链可变区包括如SEQ ID NO:11所示的CDRL1、SEQ ID NO:12所示的CDRL2和SEQ ID NO:13所示的CDRL3，重链可变区包括如SEQ ID NO:14所示的CDRH1、SEQ ID NO:15所示的CDRH2和SEQ ID NO:16所示的CDRH3。3.根据权利要求2所述的鼠抗MCR
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1蛋白抗体，其特征在于：抗体1HD4轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:7所示，重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:9所示；或者，抗体1JA9轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:17所示，重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:19所示。4.根据权利要求2或3所述的鼠抗MCR
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1蛋白抗体，其特征在于：抗体1HD4由保藏编号为CGMCC No.23031的鼠抗MCR
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1蛋白杂交瘤细胞株产生；抗体1JA9由...

【专利技术属性】
技术研发人员：李曦，李可可，陈晓玲，王亚苗，孔迪，王思怡，王芮，王兴，臧丹戎，
申请(专利权)人：北京金山川科技发展有限公司天津喜诺生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：