癫痫动物模型的制备及其应用制造技术

本发明专利技术提供了难治性癫痫动物模型的制备及其应用。具体地，本发明专利技术提供了一种非人哺乳动物的难治性癫痫动物模型的制备方法，其中所述制备方法包括以下步骤：(1)提供一非人哺乳动物A和同一物种的神经元细胞特异性Cre重组酶表达的非人哺乳动物B；其中所述的非人哺乳动物A的基因组具有：(E1)内源的Cdkl5基因，和(E2)与Cdkl5基因操作性连接的并用于条件敲除Cdkl5基因的条件敲除元件，其中，所述的条件敲除元件在所述的Cre重组酶存在下，条件敲除神经元细胞的基因组的Cdkl5基因，从而使得Cdkl5基因失活；(2)将所述的动物A与动物B交配繁育，获得Cdkl5基因在神经元细胞特异性敲除的子代非人哺乳动物C；(3)培养所述的子代非人哺乳动物C，从而得到所述的难治性癫痫动物模型，本发明专利技术还可根据动物的自发癫痫表型的变化，初步评价抗癫痫药物的疗效。价抗癫痫药物的疗效。

【技术实现步骤摘要】
癫痫动物模型的制备及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，更具体地涉及癫痫动物模型的制备及其应用。

技术介绍

[0002]癫痫是由神经元同步异常放电引起的，会导致短暂的大脑功能障碍。
[0003]为了更好地理解CDKL5综合症相关的癫痫发病机制，研究人员建立了多个转基因小鼠模型，这些模型鼠表现出了许多行为学异常，包括后肢抱团、活动量改变、眼球追踪异常、学习记忆受损以及自闭症样社交障碍等表型。但遗憾的是，这些模型小鼠均无自发性癫痫的发生。并且因此目前缺乏模拟CDKL5综合症患者难治性癫痫的动物模型。
[0004]并且目前临床上还没有治疗癫痫的有效药物，尤其是对该病的婴幼儿早发性癫痫症状，传统抗癫痫药疗效较差。并且在该领域由于缺乏可靠的动物模型进行体内药物筛选，因此大大降低了治疗该疾病药物开发的效率。
[0005]因此本领域迫切需要开发可大大提高药物研发效率和准确性，降低临床研究失败的风险的筛药动物模型。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种大大提高药物研发效率和准确性，降低临床研本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非人哺乳动物的难治性癫痫动物模型的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提供一非人哺乳动物A和同一物种的神经元细胞特异性Cre重组酶表达的非人哺乳动物B；其中所述的非人哺乳动物A的基因组具有：(E1)内源的Cdkl5基因，和(E2)与Cdkl5基因操作性连接的并用于条件敲除Cdkl5基因的条件敲除元件，其中，所述的条件敲除元件在所述的Cre重组酶存在下，条件敲除神经元细胞的基因组的Cdkl5基因，从而使得Cdkl5基因失活；(2)将所述的动物A与动物B交配繁育，获得CDKL5基因在神经元细胞特异性敲除的子代非人哺乳动物C；(3)培养所述的子代的非人哺乳动物C，从而得到所述的难治性癫痫动物模型。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的难治性癫痫动物模型具有如下特征：特征性的难治性癫痫脑电波。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的难治性癫痫动物模型具有如下一种或多种特征：单次癫痫发作的持续时间在30-90秒；每天的发作次数在0-35次，随着癫痫的进展，发作次数逐渐增加；本发明的动物模型相较于以往癫痫模型具有的特征是自发的，而且是高频的。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述难治性癫痫包括自发的难治性癫痫、婴幼儿早发性癫痫、CDKL5综合症癫痫。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的神经元细胞包括：兴奋性神经元细胞。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，与同窝对照...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊志奇，王红涛，程学文，朱姊艾，
申请(专利权)人：中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心，
类型：发明
国别省市：