一种适应猪流行性腹泻病毒的ST悬浮细胞株ST-J及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种适应猪流行性腹泻病毒的ST悬浮细胞株ST

【技术实现步骤摘要】
一种适应猪流行性腹泻病毒的ST悬浮细胞株ST
‑
J及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种适应猪流行性腹泻病毒的ST悬浮细胞株(命名为ST
‑
J)及其应用，尤其涉及在培养猪流行性腹泻病毒以及生产猪流行性腹泻病毒灭活疫苗中的应用。

技术介绍

[0002]猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病，并且各年龄段的猪对PEDV均易感，对养猪业造成严重的经济损失。
[0003]目前猪流行性腹泻病一般采取疫苗接种进行预防，国内多用Vero
‑
E6细胞(非洲绿猴肾细胞)或ST细胞(猪睾丸细胞)贴壁或悬浮培养增殖猪流行性腹泻病毒，以生产预防猪流行性腹泻疾病的灭活疫苗。例如专利文献CN107412763A(以下称文献1)公开一种猪流行性腹泻病毒灭活疫苗及其制备方法，其中采用ST细胞对PEDV进行增殖培养，但其采用的是传统贴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种ST悬浮细胞株，命名为ST
‑
J悬浮株，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C202150，保藏日期为2021年1月29日。2.根据权利要求1所述的ST
‑
J悬浮株CCTCC NO：C202150，在用其培养猪流行性腹泻病毒收获的病毒培养液中，病毒的滴度为6.00TCID
50
/0.1ml以上，可选为6.50TCID
50
/0.1ml以上，且ST
‑
J细胞的活率为28％以上，可选为28.12％
‑
71.70％。3.利用权利要求1或2所述的ST
‑
J悬浮株CCTCC NO：C202150培养猪流行性腹泻病毒的方法，其包括以下步骤：S1：将ST
‑
J悬浮株在营养液中扩大培养，获得细胞悬液；S2：向步骤S1的细胞悬液中加入等体积的病毒维持液，随后加入EDTA
‑
胰酶，并接种猪流行性腹泻病毒种毒，培养；S3：收获病毒培养液。4.根据权利要求3所述的方法，其中步骤S1中使用摇瓶进行扩所述大培养，扩大培养的条件为：35.0℃
‑
37.0℃，5.0％CO2，100rpm/min
‑
130rpm/min摇床培养48
‑
72h；和/或步骤S2中使用摇瓶进行所述培养，培养的条件为：35.0℃
‑
37.0℃，5.0％CO2，100rpm/min
‑
130rpm/min摇床培养48
‑
96h。5.根据权利要求3所述的方法，其中步骤S1中使用生物反应器进行所述扩大培养，扩大培养的条件为：35.0℃
‑
37.0℃，溶氧浓度40％
‑
60％，搅拌转速为：45rpm/min
‑
65rpm/min，pH 7.0
‑
7.4条件下培养48
‑
72h；和/或步骤S2中使用生物反应器进行所述培养，培养的条件为：35.0℃
‑
37.0℃，溶氧浓度40％
‑
60％，搅拌转速为：45rpm/min
‑
65rpm/min，pH 7.0
‑
7.4条件下培养24
‑
96h。6.根据权利要求3

【专利技术属性】
技术研发人员：李静，刘建奇，俎红利，宋庆庆，
申请(专利权)人：金宇保灵生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：