细胞结构体及其制造方法技术

本发明专利技术涉及一种细胞结构体，其具备结缔组织结构体和配置于该结缔组织结构体上的上皮结构体，其中，结缔组织结构体包含经片段化的细胞外基质成分和包含间充质细胞的第一细胞，经片段化的细胞外基质成分的至少一部分配置于第一细胞间，上皮结构体包含上皮细胞。上皮结构体包含上皮细胞。上皮结构体包含上皮细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞结构体及其制造方法


[0001]本专利技术涉及细胞结构体及其制造方法。本专利技术还涉及含有细菌的组织模型及其制造方法以及对细胞结构体和/或细菌的行为进行评价的方法。

技术介绍

[0002]作为人工地制作模拟生物体组织的结构体的方法，例如已知有一种制造三维组织体的方法(专利文献1)，其包含三维地配置由含有胶原的被膜覆盖的细胞而形成三维组织体的工序；一种立体性细胞组织的制造方法(专利文献2)，其包含将细胞与阳离子性物质和细胞外基质成分混合而得到混合物，从得到的混合物收集细胞，在基材上形成细胞集合体的工序；等。另外，本专利技术者们还提出了下述方法(专利文献3)：通过使细胞与经片段化的外源性胶原接触，从而以较少的细胞数制造厚度为1mm以上的尺寸大的三维组织体的方法。这些三维组织体期待作为实验动物的替代品、移植材料等的用途。
[0003]现有技术文献
[0004]专利文献
[0005]专利文献1：国际公开第2015/072164号
[0006]专利文献2：国际公开第2017/146124号
[0007]专利文献3：国际公开第2018/143286号

技术实现思路

[0008]专利技术所要解决的课题
[0009]本专利技术的目的在于提供一种更接近生物体组织的细胞结构体及其制造方法。
[0010]用于解决课题的手段
[0011]即，本专利技术涉及例如以下的各专利技术。
[0012][1]一种细胞结构体，其具备结缔组织结构体和配置于该结缔组织结构体上的上皮结构体，其中，结缔组织结构体包含经片段化的细胞外基质成分和包含间充质细胞的第一细胞，经片段化的细胞外基质成分的至少一部分配置于第一细胞间，上皮结构体包含上皮细胞。
[0013][2]根据[1]所述的细胞结构体，其中，间充质细胞包含成纤维细胞。
[0014][3]根据[1]或[2]所述的细胞结构体，其中，经片段化的细胞外基质成分包含经片段化的胶原成分。
[0015][4]根据[1]～[3]中任一项所述的细胞结构体，其中，第一细胞还包含血管内皮细胞，结缔组织结构体在细胞间具有血管网。
[0016][5]根据[4]所述的细胞结构体，其中，结缔组织结构体在间充质细胞间具有血管网。
[0017][6]一种含有细菌的组织模型，其具备[1]～[5]中任一项所述的细胞结构体、和配置在细胞结构体的内部或以与细胞结构体的上皮结构体接触的方式配置的细菌。
[0018][7]根据[6]所述的含有细菌的组织模型，其中，细菌为牙周病菌。
[0019][8]一种细胞结构体的制造方法，其具备：
[0020]第一工序，通过进行使经片段化的细胞外基质成分与包含间充质细胞的第一细胞接触的工序、以及培养第一细胞的工序，形成结缔组织结构体；和
[0021]第二工序，通过进行使包含上皮细胞的第二细胞与结缔组织结构体接触的工序、以及培养结缔组织结构体和第二细胞的工序，在结缔组织结构体上形成上皮结构体，得到细胞结构体。
[0022][9]根据[8]所述的细胞结构体的制造方法，其中，第一细胞包含血管内皮细胞。
[0023][10]根据[8]或[9]所述的细胞结构体的制造方法，其中，与第一细胞接触时的经片段化的细胞外基质成分的量相对于1.0
×
106cells的细胞为0.1～100mg。
[0024][11]一种含有细菌的组织模型的制造方法，其具备使细菌与通过[8]～[10]中任一项所述的制造方法得到的细胞结构体的上皮结构体接触的工序。
[0025][12]根据[11]所述的含有细菌的组织模型的制造方法，其中，在使细菌接触的工序之后，具备培养细胞结构体和细菌、使细菌移动到细胞结构体的内部的工序。
[0026][13]一种对细胞结构体和/或细菌的行为进行评价的方法，其包含在使细菌与[1]～[5]中任一项所述的细胞结构体的上皮结构体接触后、对细胞结构体和/或细菌的行为进行评价的工序。
[0027]专利技术效果
[0028]根据本专利技术，能够提供更接近生物体组织的细胞结构体及其制造方法。
附图说明
[0029]图1是表示苏木精
‑
伊红(HE)染色后的细胞结构体的显微镜观察结果的照片。
[0030]图2是表示细胞结构体中的结缔组织中的血管网的形成的照片。
[0031]图3是表示牙周病菌的植入及浸润的确认结果(Image Analysis，图像分析)的照片。
[0032]图4是表示牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)对具有血管网的细胞结构体的植入及浸润的确认结果的照片。
[0033]图5是表示与血管网一起局部存在的牙龈卟啉单胞菌的定量评价结果的图表。
[0034]图6是表示浸润到牙龈组织模型内部的牙龈卟啉单胞菌的数量的定量评价结果的图表。
[0035]图7是表示牙龈卟啉单胞菌感染后的IL
‑
6分泌量的评价结果的图表。
[0036]图8是表示牙龈卟啉单胞菌透过上皮结构体的行为的评价方法的图。
[0037]图9是表示牙龈卟啉单胞菌透过上皮结构体的行为的评价结果的图表。
具体实施方式
[0038]以下，对用于实施本专利技术的方式详细地进行说明。但是，本专利技术并不限定于以下的实施方式。
[0039]<细胞结构体>
[0040]本实施方式的细胞结构体具备结缔组织结构体和配置在该结缔组织结构体上的
上皮结构体。在本实施方式的细胞结构体中，结缔组织结构体包含经片段化的细胞外基质成分和包含间充质细胞的第一细胞，经片段化的细胞外基质成分的至少一部分配置于第一细胞间。在本实施方式的细胞结构体中，上皮结构体包含上皮细胞。
[0041]细胞结构体例如可以用作生物体组织模型。作为生物体组织模型的具体例，例如可举出牙龈模型、口腔粘膜模型、皮肤模型、角膜模型等。
[0042]在本说明书中，“细胞结构体”是指细胞经由细胞外基质成分三维地配置的细胞的集合体，是指通过细胞培养而人工制作的集合体。对细胞结构体的形状没有特别限制，例如可举出片状、球体状、椭圆体状、长方体状等。在此，生物体组织包含汗腺、淋巴管、脂腺等，构成比细胞构造体更复杂。因此，能够容易地区分细胞结构体和生物体组织。
[0043](细胞)
[0044]在本说明书中，“细胞”没有特别限定，例如可以是人、猴、狗、猫、兔、猪、牛、小鼠、大鼠等哺乳类动物来源的细胞。细胞的来源部位也没有特别限定，可以是骨、肌肉、内脏、神经、脑、骨、皮肤、血液等来源的体细胞，也可以是生殖细胞。此外，细胞可以是干细胞，另外也可以是原代培养细胞、传代培养细胞及细胞株细胞等培养细胞。
[0045]在本说明书中，“干细胞”是指具有自我复制能力及多分化能力的细胞。干细胞中包括具有分化为任意的细胞种的能力的多能性干细胞、和具有分化为特定的细胞种的能力的组织干细胞(也本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种细胞结构体，其具备结缔组织结构体和配置于该结缔组织结构体上的上皮结构体，其中，所述结缔组织结构体包含经片段化的细胞外基质成分和包含间充质细胞的第一细胞，所述经片段化的细胞外基质成分的至少一部分配置于所述第一细胞间，所述上皮结构体包含上皮细胞。2.根据权利要求1所述的细胞结构体，其中，所述间充质细胞包含成纤维细胞。3.根据权利要求1或2所述的细胞结构体，其中，所述经片段化的细胞外基质成分包含经片段化的胶原成分。4.根据权利要求1～3中任一项所述的细胞结构体，其中，所述第一细胞还包含血管内皮细胞，所述结缔组织结构体在所述第一细胞间具有血管网。5.根据权利要求4所述的细胞结构体，其中，所述结缔组织结构体在所述间充质细胞间具有血管网。6.一种含有细菌的组织模型，其具备权利要求1～5中任一项所述的细胞结构体、和配置在所述细胞结构体的内部或以与所述细胞结构体的所述上皮结构体接触的方式配置的细菌。7.根据权利要求6所述的含有细菌的组织模型，其中，所述细菌为牙周病菌。8.一种细胞结构体的制造方法，其具备：第一工序，通过进行使经片段化的细胞外基质成分与包含间充质细胞的第一细胞接触的工序、以及...

【专利技术属性】
技术研发人员：北野史朗，入江新司，松崎典弥，佐佐木尚子，天野敦雄，竹内洋辉，
申请(专利权)人：国立大学法人大阪大学，
类型：发明
国别省市：