维生素B6及其有关物质的检测方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种维生素B6及其有关物质的检测方法和应用，涉及检测技术领域。本发明专利技术提供的维生素B6及其有关物质的检测方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，能够快速准确地实现样品中维生素B6及其有关物质的检测。与其他检测方法相比，本发明专利技术提供的检测方法能够在同一液相条件下有效分离维生素B6及九种已知杂质，从而实现样品中维生素B6及其有关物质的准确测定，达到精确监控产品质量的目的。达到精确监控产品质量的目的。达到精确监控产品质量的目的。

【技术实现步骤摘要】
维生素B6及其有关物质的检测方法和应用


[0001]本专利技术涉及检测
，尤其是涉及一种维生素B6及其有关物质的检测方法和应用。

技术介绍

[0002]维生素B6(Vitamin B6)又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，遇光或碱易破坏，不耐高温。1936年定名为维生素B6。维生素B6为无色晶体，易溶于水及乙醇，在酸液中稳定，在碱液中易破坏，吡哆醇耐热，吡哆醛和吡哆胺不耐高温。维生素B6在酵母菌、肝脏、谷粒、肉、鱼、蛋、豆类及花生中含量较多。维生素B6为人体内某些辅酶的组成成分，参与多种代谢反应，尤其是和氨基酸代谢有密切关系。临床上应用维生素B6制剂防治妊娠呕吐和放射病呕吐。
[0003]维生素B6主要作用在人体的血液、肌肉、神经、皮肤等。功能有抗体的合成、消化系统中胃酸的制造、脂肪与蛋白质利用(尤其在减肥时应补充)、维持钠/钾平衡(稳定神经系统)。缺乏维生素B6的通症，一般缺乏时会有食欲不振、食物利用率低、失重、呕吐、下痢等毛病。严重缺乏会有粉刺、贫血、关节炎、小孩痉挛、忧郁、头痛、掉发、易发炎、学习障碍、衰弱等。
[0004]维生素B6，英文名称为pyridoxine，化学名为4
‑
[5
‑
(吡啶
‑4‑
基)
‑
1H
‑
1,2,4
‑
三氮唑
‑3‑
基]吡啶
‑2‑
腈，分子式为C8H11NO3
>·
HCl分子量为284.24，CAS号为577778
‑
58
‑
6，化学结构式如图1所示。
[0005]维生素B6会发生降解，维生素B6类产品需要严格控制药品质量，保证药品的安全性和有效性，然而目前还缺少一种有效检测维生素B6及其降解产物的方法。
[0006]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0007]本专利技术的第一目的在于提供一种维生素B6及其有关物质的检测方法，以解决上述问题中的至少一种。
[0008]本专利技术的第二目的在于提供一种维生素B6及其有关物质的检测方法在维生素B6产品质量监控中的应用。
[0009]第一方面，本专利技术提供了一种维生素B6及其有关物质的检测方法，采用高效液相色谱对样品进行检测，所述高效液相色谱的条件包括：
[0010]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0011]流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为庚烷磺酸钠溶液，所述流动相B为甲醇；
[0012]洗脱程序为：0
‑
5min 85％流动相A，15％流动相B；5
‑
10min流动相A逐渐升至90％，流动相B逐渐降至10％；10
‑
22min流动相A逐渐降至87％，流动相B逐渐升至13％；22
‑
48min流动相A逐渐降至60％，流动相B逐渐升至40％；48
‑
48.1min流动相A迅速升高至85％，流动
相B迅速降至15％；48.1
‑
60min 85％流动相A，15％流动相B；
[0013]检测波长为220nm。
[0014]作为进一步技术方案，维生素B6有关物质包括RRT0.45、N
‑
氧化吡哆醇、吡哆醛、RRT0.92、杂质K、杂质A、杂质G、杂质B或RRT2.21中的至少一种。
[0015]作为进一步技术方案，所述样品含有RRT0.45、N
‑
氧化吡哆醇、吡哆醛、RRT0.92、杂质K、维生素B6、杂质A、杂质G、杂质B或RRT2.21中的至少一种。
[0016]作为进一步技术方案，所述样品包括维生素B6注射液。
[0017]作为进一步技术方案，所述色谱柱的规格包括GL Sciences Inertsil ODS
‑
3，250mm
×
4.6mm，5μm。
[0018]作为进一步技术方案，所述庚烷磺酸钠溶液的质量浓度为0.04％；
[0019]优选地，所述庚烷磺酸钠溶液的pH为2.6～3.2，优选为3.0；
[0020]优选地，采用磷酸调节庚烷磺酸钠溶液的pH。
[0021]作为进一步技术方案，所述流动相的流速为0.9～1.1mL/min，优选为1.0mL/min。
[0022]作为进一步技术方案，所述洗脱程序为：0
‑
5min 85％流动相A，15％流动相B；5
‑
10min流动相A线性升至90％，流动相B线性降至10％；10
‑
22min流动相A线性降至87％，流动相B线性升至13％；22
‑
48min流动相A线性降至60％，流动相B线性升至40％；48
‑
48.1min流动相A线性升高至85％，流动相B线性降至15％；48.1
‑
60min 85％流动相A，15％流动相B。
[0023]作为进一步技术方案，所述色谱柱的柱温为25～35℃，优选为30℃；
[0024]优选地，样品的进样体积为5～20μL，优选为10μL。
[0025]第二方面，本专利技术提供了一种维生素B6及其有关物质的检测方法在维生素B6产品质量监控中的应用。
[0026]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0027]本专利技术提供的维生素B6及其有关物质的检测方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，能够快速准确地实现样品中维生素B6及其有关物质的检测。与其他检测方法相比，本专利技术能够在同一液相条件下有效分离维生素B6及九种已知杂质，从而实现样品中维生素B6及其有关物质的准确测定，达到精确监控产品质量的目的。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0029]图1为维生素B6的化学结构式；
[0030]图2为检测维生素B6注射液中的杂质A、杂质B、杂质G、杂质K、N
‑
氧化吡哆醇、吡哆醛、RRT0.45、RRT0.92、RRT2.21的系统适用性溶液图；
[0031]图3为实施例1提供的供试品溶液的色谱图；
[0032]图4为实施例1提供的自身对照溶液的色谱图；
[0033]图5为实施例5提供的使用色谱柱1进样的供试品溶液；
[0034]图6为实施例5提供的使用色谱柱1进样的自身对照溶液；
[0035]图7为实施例5提供的使用色谱柱2进样的供试品溶液；
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维生素B6及其有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱对样品进行检测，所述高效液相色谱的条件包括：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为庚烷磺酸钠溶液，所述流动相B为甲醇；洗脱程序为：0
‑
5min 85％流动相A，15％流动相B；5
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10min流动相A逐渐升至90％，流动相B逐渐降至10％；10
‑
22min流动相A逐渐降至87％，流动相B逐渐升至13％；22
‑
48min流动相A逐渐降至60％，流动相B逐渐升至40％；48
‑
48.1min流动相A迅速升高至85％，流动相B迅速降至15％；48.1
‑
60min 85％流动相A，15％流动相B；检测波长为220nm。2.根据权利要求1所述的维生素B6及其有关物质的检测方法，其特征在于，维生素B6有关物质包括RRT0.45、N
‑
氧化吡哆醇、吡哆醛、RRT0.92、杂质K、杂质A、杂质G、杂质B或RRT2.21中的至少一种。3.根据权利要求1所述的维生素B6及其有关物质的检测方法，其特征在于，所述样品含有RRT0.45、N
‑
氧化吡哆醇、吡哆醛、RRT0.92、杂质K、维生素B6、杂质A、杂质G、杂质B或RRT2.21中的至少一种。4.根据权利要求1所述的维生素B6及其有关物质的检测方法，其特征在于，所述样品包括维生素B6注射液。5.根据权利要求1所述的维生素B6及其有关物质的检测方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡纯翼，王菲菲，周芸芸，
申请(专利权)人：中国大冢制药有限公司，
类型：发明
国别省市：