一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫化学技术领域。本发明专利技术将稻瘟灵的完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化，通过颈背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。首次免疫(100μg/只)用完全弗氏佐剂进行乳化，多次加强免疫用不完全弗氏佐剂，最后一次用稻瘟灵完全抗原冲刺免疫(腹腔注射)。将高效价和高灵敏度小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，采用选择培养基，筛选出两种细胞融合后的杂交细胞；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞，并进行多次亚克隆，最终得到一株单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对稻瘟灵具有较好的检测灵敏度，可以用于稻瘟灵的残留检测。用于稻瘟灵的残留检测。用于稻瘟灵的残留检测。

【技术实现步骤摘要】
一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用


[0001]本专利技术属于食品安全免疫检测
，尤其是指一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。

技术介绍

[0002]稻瘟灵的英文通用名为：Isoprothiolane，化学名称：1,3
‑
二硫戊烷
‑2‑
叉丙二酸二异丙酯；作用机理：水稻植株吸收后，抑制磷脂N
‑
甲基转移酶，从而使脂肪酸、甘油三醇、磷脂质的形成受阻。主要用途：该品为内吸杀菌剂，对水稻颈瘟有特效，对稻苗瘟与小球菌核病也均有效，大面积使用还可兼治稻飞虱和白背飞虱。主要用于防治水稻稻瘟病，对穗稻瘟病和叶稻瘟病都有效，对穗稻瘟病的效果更好。
[0003]目前，稻瘟灵检测方法主要为仪器检测，常用的有气相色谱法、液相色谱法和气相色谱
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质谱法。尽管这些基于色谱的方法具有很高的灵敏度和特异性，存在一些缺点，例如需要彻底的样品净化，高溶剂消耗，昂贵的设备以及熟练的技术人员。因此，需要一种快速，简便的检测稻瘟灵残留物的方法。
[0004]酶联免疫吸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22339，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.权利要求1所述的分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备稻瘟灵半抗原及稻瘟灵完全抗原，将获得的稻瘟灵完全抗原与完全弗氏佐剂进行乳化得到免疫原1，稻瘟灵完全抗原与不完全弗氏佐剂进行乳化得到免疫原2；(2)将步骤(1)所得免疫原1对小鼠进行首次皮下免疫，并用免疫原2进行加强免疫，用稻瘟灵完全抗原进行冲刺免疫；(3)将步骤(2)中冲刺免疫后的小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合，得到所述杂交瘤细胞株。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述稻瘟灵半抗原分子式：4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述稻瘟灵完全抗原的分...

【专利技术属性】
技术研发人员：胥传来，刘洋，匡华，徐丽广，孙茂忠，吴晓玲，刘丽强，马伟，朱建平，郝昌龙，宋珊珊，胡拥明，吴爱红，郭玲玲，胥欣欣，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：