一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险评估的方法技术

一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法，所述的方法包括：采集堆肥鲜样和土壤样品，提取堆肥与土壤水溶性有机质，将携带抗性基因质粒与水溶性有机质混合，随后加入感受态E.coliDH5α混匀，培养一段时间后再在含有AMP抗生素的固体培养基与一般固体培养基上稀释涂布，培养后，取平板并计数，根据计数结果计算抗性基因转移频率；再根据堆肥与土壤样品的转移频率计算抗性基因环境风险阈值，用于评估堆肥中抗性基因环境健康风险。本发明专利技术从抗性基因水平转移的全新角度来评估堆肥产品中抗性基因的环境健康风险，相较于传统的直接检测抗性基因丰度，本发明专利技术的评估方法更精准，为堆肥产品风险评估提供了有力支撑。肥产品风险评估提供了有力支撑。肥产品风险评估提供了有力支撑。

【技术实现步骤摘要】
一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险评估的方法


[0001]本专利技术属于生物
和环境保护领域，具体涉及到一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法。

技术介绍

[0002]堆肥是一种固废有机资源再利用的有效手段，减少有机固废污染的同时，回收利用有机废物中可利用的有机质。但有机固废中所含的残留抗生素，重金属，有机污染物和消毒剂等会诱导抗性基因的产生。堆肥技术能够削减抗性基因(Huang et al.,2021，Environmental effects and risk control of antibiotic resistance genes in the organic solid waste aerobic composting system:A review.Frontiers of Environmental Science&Engineering,15(6),127.)，从而控制有机固废的环境健康风险。而抗性基因能够在微生物间发生水平转移，如果耐药菌获取水平转移的抗性基因(Nolivos et al.,201本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种堆肥产品中抗性基因环境健康风险的评估方法，其特征在于，包括如下步骤：取堆肥产品鲜样，提取堆肥有机质；将上述堆肥有机质与携带抗性基因质粒混匀培育得到混合液；向混合液中加入感受态大肠杆菌混匀后，培养得到培养液；分别制备无抗生素的固体培养基和相应抗生素的固体培养基，并将培养液分别在所述的两种类型固体培养基平板上涂布培养；分别对培养后的两种类型的固体培养基平板上的菌落进行计数，得到菌落个数；并按下述公式计算抗性基因水平转移频率P
堆肥产品
：其中N
AMP
表示相应抗生素的固体培养基上菌落个数；其中N
LB
表示无抗生素的固体培养基上菌落个数；对土壤样品同样按上述方法进行处理，得到两种类型的固体培养基平板上的菌落个数，并按同样的公式计算土壤样品抗性基因转移频率P
土壤样品
；根据下述公式计算抗性基因水平转移风险阈值，评估堆肥产品抗性基因环境健康风险：2.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：所述堆肥产品或土壤样品有机质的提取方法如下：按照质量比堆肥产品或土壤样品1g：5
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15ml超纯水，进行震荡20
‑
28h，离心4000
‑
6000rpm，取上清液过滤膜提取。3.根据权利要求2所述的评估方法，其特征在于：其中震荡的时间为24h，离心为5000rpm，取上清液过0.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄彩红，唐朱睿，李伟，席北斗，郭威，朱琳，
申请(专利权)人：中国环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：