样品制备装置制造方法及图纸

一种人工致动的层析装置，其包括：用于接收液体样品的腔室、具有计量阀的泵以及层析元件，其中所述泵将预定体积的液体从所述样品腔室移动到所述层析元件。室移动到所述层析元件。室移动到所述层析元件。

【技术实现步骤摘要】
样品制备装置
专利

[0001]本专利技术涉及用于恒温核酸扩增的样品的制备。具体地，本专利技术涉及人工操作的层析装置、其中可用的组合物、用于制备用于恒温核酸扩增的样品的装置、用于执行恒温核酸扩增的试剂盒、以及用于执行恒温核酸扩增的方法。本专利技术还提供其中可用的泵和计量阀。
[0002]专利技术背景
[0003]涉及生物反应的许多诊断测试必须由熟练技术人员和/或复杂设备在实验室中执行。这些实验室可能是政府监管的对象。遵守这些规定的成本可增加患者和医疗保健支付者的诊断测试的成本，并将这些测试排除在定点照护设施之外。
[0004]WO2013/041713公开了用于执行恒温核酸扩增的定点照护系统。
[0005]然而，已经发现，在某些情况下，为了测试某些流体(诸如尿液、血液、血浆、血清、唾液、脑脊髓液、泪液和汗液，或来自阴道、鼻腔、喉咙、阴茎、肛门或皮肤拭子的洗脱物)，在于已知核酸扩增测定中进行测试之前，原始样品可能需要经历多个制备步骤。
[0006]因此，对于实现用于恒温核酸扩增和其他测试的样品的定点照护制备的装置、方法和试剂盒存在未满足的需求。这些装置需要是使用起来简单且生产成本低廉的。
[0007]本专利技术解决了关于现有技术的这些和其他问题。
[0008]专利技术概述
[0009]因此，在第一方面，本专利技术提供一种层析装置。所述装置优选地是人工致动的。所述装置包括用于接收液体样品的腔室、具有计量阀的泵以及层析元件。优选地，所述装置是尺寸排阻层析装置并且所述层析元件是尺寸排阻层析元件，凝胶过滤层析元件是特别优选的。在使用中，所述泵使预定体积的液体从所述样品腔室移动到所述层析元件。通常，所述泵使预定体积的液体从所述样品腔室移动穿过所述层析元件。优选地，所述泵使预定体积的液体从所述样品腔室移动穿过所述层析元件以到达样品收集容器。优选地，所述装置是单次使用的。
[0010]替代性固定相层析元件也可以用于本专利技术的装置。合适的替代性固定相层析元件包括但不限于：离子交换层析元件，包括阳离子和阴离子交换层析元件；反相层析元件；以及亲和力层析元件。因此，本专利技术的装置可用于离子交换层析、反相层析和亲和层析。
[0011]优选地，所述装置可通过单次移动(通常是单次推动或旋转)来致动。
[0012]通常，在使用中，所述泵和/或泵送是气动的。这是有利的，因为这意味着所述装置的分离性能基本上与致动所述装置的力和速度无关。实质上，所述液体样品穿过所述层析元件的速率基本上与用户施加的力无关。
[0013]优选地，所述液体样品的处理在以下预定时间段内完成：至少约30秒、至少约1分钟、至少约2分钟、至少约3分钟、至少约4分钟、至少约5分钟、至少约6分钟、至少约7分钟、至少约8分钟、至少约9分钟、至少约10分钟。优选地，小于约10分钟、优选小于约8分钟、优选小于约7分钟、优选小于约6分钟、优选小于约5分钟、优选小于约4分钟。优选地，所述液体样品的处理在约1分钟至约5分钟的预定时间段内完成，约1分钟至约3分钟的预定时间段是特别优选的。
[0014]在实施方案中，所述预定体积的流体为约0.1ml至约100ml，优选约0.25ml至约10ml，更优选约0.5ml至约1ml。优选地，所述预定体积的流体是至少约100μL、至少约200μL、至少约300μL、至少约400μL、至少约500μL、至少约600μL、至少约700μL、至少约800μL、至少约900μL、至少约1mL、至少约2mL、至少约3mL、至少约4mL、至少约5mL。
[0015]在本专利技术的所有方面中，将要测试的样品(即，液体或原始样品)通常将是生物流体，诸如尿液、血液、血浆、血清、唾液、脑脊髓液、泪液，或来自阴道、鼻腔、喉咙、阴茎、肛门或皮肤拭子的洗脱物。
[0016]已经发现，某些流体、诸如上面所指出的那些的原始样品可能包含在某些情况下对测定的性能有负面影响的剂，并且具体地包含对恒温核酸扩增测定的性能有负面干扰的剂。负面干扰可以采取抑制核酸扩增本身和/或发荧光以使得不能可靠地检测扩增的剂的形式。已经发现，这些测定干扰剂倾向于具有比靶核酸更低的分子量，并且因此可通过尺寸排阻层析来移除。本专利技术使得能够在定点照护环境中以简单的一步过程来执行尺寸排阻层析。由此，使得能够更快速地执行测试并且更快速地实现所需的任何治疗，从而为患者和医疗保健专业人员等提供益处。已经认识到，不是移除所有的测定/核酸干扰剂；然而，将移除足够的量以使得能够执行和测量核酸扩增。通常，移除基本上所有的核酸扩增干扰剂。通常，核酸扩增干扰试剂将是液体样品中所存在的盐和低分子量分子诸如蛋白质或脂质，其分子量通常小于约5000kDa。通常，所述尺寸排阻层析元件移除分子量小于约5000kDa的分子。技术人员将理解的是，可以通过选择不同的层析树脂来增加或减少分子量截留。
[0017]可以与本专利技术一起使用的恒温核酸扩增测定包括重组酶聚合酶扩增(RPA)、切口和延伸扩增反应(NEAR)、链置换扩增以及环介导恒温扩增。
[0018]WO2009/012246中详细讨论了切口和延伸扩增反应，所述专利通过引用并入本文。
[0019]WO2003/072805、WO2005/118853、WO2010/141940、WO2008/035205、WO2007/096702、WO2011/038197和WO2012/138989中详细讨论了重组酶聚合酶扩增反应，所述专利的内容通过引用并入本文。
[0020]除了恒温核酸扩增测定之外，本专利技术还可以用于制备用于免疫测定、质量分光光度测定和聚合酶链式反应测定的液体样品。
[0021]在本专利技术的实施方案中，所述装置包括第一部分和可接收在所述第一部分中的优选地分开的第二部分。通常，所述第一部分和所述第二部分可操作地接合以使预定体积的流体从所述样品腔室移动到所述层析元件。所述泵可通过所述装置的所述第二部分可操作地接合所述装置的所述第一部分来致动。类似地，所述计量阀可通过所述装置的所述第二部分可操作地接合所述装置的所述第一部分来致动。
[0022]通常，所述计量阀包括计量腔室，所述计量腔室具有由可移动计量构件分开的上部和下部。因此，所述计量腔室的所述上部和所述下部的体积是可变的。通常，所述计量构件和所述计量腔室将具有匹配的不对称横截面。通常，所述计量腔室的内壁将具有D形横截面。类似地，所述计量构件的外壁通常将具有可接收在所述计量腔室中的D形横截面。通常，所述计量构件将与所述计量腔室的所述内壁形成过盈配合，优选为液密过盈配合。优选地，所述计量构件是杯。
[0023]在实施方案中，所述计量腔室的所述上部和所述下部选择性地流体连通。也就是说，它们可处于其中它们流体连通的构型以及其中它们不流体连通的构型。所述计量阀可
以包括例如用于在所述计量腔室的所述上部与所述下部之间提供流体连通的流体旁路通道或压力释放通道。所述计量构件相对于所述流体旁路通道的移动可允许所述计量腔室的所述上部与所述下部之间的选择性流体连通。如果所述计量构件位本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于执行恒温核酸扩增的方法，其包括：a) 提供用于测试的原始液体样品；b) 处理所述原始液体样品以移除核酸扩增抑制剂和/或荧光剂；c) 对经处理的样品执行恒温核酸扩增；以及d) 针对所扩增的核酸进行监测。2.根据权利要求1所述的方法，其中处理步骤包括尺寸排阻层析。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中处理步骤包括将所述原始液体样品暴露于溶解剂，之后对溶解产物执行尺寸排阻层析。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中处理步骤包括在移除所述核酸扩增抑制剂和/或荧光剂之前、期间或之后缓冲所述原始液体样品，优选地其中处理步骤包括在移除所述核酸扩增抑制剂和/或荧光剂期间缓冲所述原始液体样品。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中所述原始液体样品选自由以下各项组成的组：尿液、血液、血浆、血清、唾液、脑脊髓液、泪液，或来自阴道、鼻腔、喉咙、阴茎、肛门或皮肤拭子的洗脱物。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中处理步骤用人工致动的层析装置来执行，所述人工致动的层析装置包括用于接收液体样品的腔室、具有计量阀的泵以及层析元件，其中所述泵使预定体积的液体从所述腔室移动到所述层析元件。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述人工致动的层析装置包括第一部分和可接收在所述第一部分中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：DN霍沃斯，JP帕尔默费尔盖特，
申请(专利权)人：雅培诊断产品士嘉堡公司，
类型：发明
国别省市：