一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，属于医药化学分析技术领域。本发明专利技术公开了一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法，且以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和水作为流动相，进行等度洗脱。本发明专利技术提供了一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，操作简单，成本低，能够快速、准确地定量检测出维生素D类软胶囊样品中生育酚的含量。生素D类软胶囊样品中生育酚的含量。生素D类软胶囊样品中生育酚的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法


[0001]本专利技术涉及医药分析化学
，更具体的说是涉及一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法。

技术介绍

[0002]维生素D类软胶囊为固醇类衍生物，主要生理功能是调节体内钙、磷代谢，维持血浆钙、磷水平，从而维持骨骼的正常生产和发育。
[0003]其中，维生素D类软胶囊中艾地骨化醇软胶囊是由中外制药株式会社开发的一种维生素D3衍生物，主要抑制骨转换并改善骨密度和骨强度。艾地骨化醇分子式为C30H50O5，分子量为490.72，英文名为(1R,2R,3R,5Z,7E)
‑2‑
(3
‑
Hydroxypropyloxy)
‑
9,10
‑
secocholesta
‑
5,7,10(19)
‑
triene
‑
1,3,25
‑
triol，其化学结构如下所示：
[0004][0005]艾地骨化醇软胶囊在制剂生产过程中会添加辅料抗氧化剂，如生育酚及其同系物，更具体地，如DL
‑
α生育酚，其分子结构式如下：
[0006][0007]来防止艾地骨化醇软胶囊中的原料药及中链甘油三酸酯被氧化。其他维生素D类软胶囊也常添加生育酚类抗氧化剂。因此，为确认维生素D类软胶囊中抗氧化剂是否仍有效，需准确地检测出维生素D类软胶囊中的生育酚的含量。
[0008]目前，各国药典上均未有维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，也没有相关的任何文献或者标准报道。按照现有生育酚的检测手段较为复杂，且检测水平不高，精确度不够。
[0009]因此，针对现有技术中存在的缺陷，提供一种准确测定维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0010]有鉴于此，本专利技术提供了一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，操作简单，成本低，能够快速、准确地定量检测出维生素D类软胶囊样品中生育酚的含量。
[0011]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0012]一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法，且以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和水为流动相，进行等度洗脱。
[0013]优选地，所述乙腈和水的体积比为(97
‑
99):(1
‑
3)。进一步地,所述乙腈和水的体积比为98:2。
[0014]采用上述技术方案的技术效果：以乙腈和水为流动相，采用等度进行洗脱，能够保证生育酚与相邻杂质的分离效果。此外，采用上述不含缓冲盐的流动相，能够延长色谱柱寿命。
[0015]优选地，维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法具体包括以下步骤：
[0016]S1、流动相配制：按体积比量取乙腈和水，并混合均匀；
[0017]S2、溶液配制：
[0018]S21、稀释剂配制：称取2,6
‑
二叔丁基
‑4‑
甲基苯酚，并用乙腈稀释，配制成浓度为0.05mg/mL的稀释剂空白溶液即稀释剂；
[0019]S22、供试品溶液配制：取维生素D类软胶囊，收集内容物于离心管中，涡旋混合均匀后，称取内容物，并用步骤S21中配制的稀释剂配制成浓度为2
‑
20μg/mL的供试品溶液；
[0020]进一步地,配制成浓度为5μg/mL的供试品溶液；
[0021]S23、对照品溶液配制：称取生育酚对照品，并用步骤S21中配制的稀释剂溶解和稀释，配制成浓度为800μg/mL的对照储备液；再精密所述对照储备液，采用步骤S21中配制的稀释剂通过两步稀释，配制成浓度为2
‑
20μg/mL的对照品溶液；
[0022]进一步地，配制成浓度为4.8μg/mL的对照品溶液；
[0023]S3、进样检测：分别取步骤S21中所述空白溶液、步骤S23中所述对照品溶液和S22中所述供试品溶液进样，采用高效液相色谱法进行色谱数据的采集和分析，确定生育酚的保留时间，按外标法以峰面积计算供试品溶液中生育酚的含量。
[0024]优选地，所述步骤S3的高效液相色谱法中，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18，5μm 4.6*150mm或等同色谱柱，柱温为42
‑
48℃。进一步地，柱温为45℃。
[0025]采用上述技术方案的技术效果：采用上述色谱柱，提高柱效，进而能够保证生育酚与相邻杂质的分离效果。在该柱温下，能准确、稳定地控制液相色谱柱的稳定性，有利于提高液相色谱柱的灵敏度，提高生育酚的分辨率，加快分离速度，缩短分析时间，保证分析结果的准确度和再现性。
[0026]优选地，所述步骤S3的高效液相色谱法中，流速为0.9
‑
1.1mL/min。进一步地，流速为1.0mL/min。
[0027]优选地，所述步骤S3的高效液相色谱法中，检测波长为290
‑
294nm，进样量为20
‑
100μL。进一步地，检测波长为292nm，进样量为100μL。
[0028]上述技术方案的技术效果：采用该检测波长，能保证检测的灵敏度和响应值最高，一定程度上避免干扰，保证一定的检测限。
[0029]优选地，所述步骤S23中，两步稀释具体操作包括：两步稀释具体操作包括：精密移取对照储备液3mL，置50mL量瓶，用步骤S21中配制的稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到第一次稀释溶液；精密移取上述第一次稀释溶液5mL，置50mL量瓶，用步骤S21中配制的稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到对照品溶液。
[0030]优选地，所述生育酚包括DL
‑
α
‑
生育酚、D
‑
α
‑
生育酚、δ
‑
生育酚、β
‑
生育酚、γ
‑
生育
酚中一种或多种的混合。
[0031]优选地，所述维生素D类软胶囊包括麦角钙化醇软胶囊、胆钙化醇软胶囊、骨化二醇软胶囊、骨化三醇软胶囊、阿法骨化醇软胶囊、帕立骨化醇软胶囊、艾地骨化醇软胶囊和维生素AD软胶囊中一种。
[0032]一种上述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法用于生育酚的定性或定量检测。
[0033]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术的有益效果包括：本专利技术提供了一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，操作简单，成本低，能够快速、准确地定量检测出维生素D类软胶囊样品中生育酚的含量。
附图说明
[0034]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法，且以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和水为流动相，进行等度洗脱。2.根据权利要求1所述的一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述乙腈和水的体积比为(97
‑
99):(1
‑
3)。3.根据权利要求1
‑
2任一项所述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1、流动相配制：按体积比量取乙腈和水，并混合均匀；S2、溶液配制：S21、稀释剂配制：称取2,6
‑
二叔丁基
‑4‑
甲基苯酚，并用乙腈稀释，配制成浓度为0.05mg/mL的稀释剂，空白溶液即稀释剂；S22、供试品溶液配制：取维生素D类软胶囊，收集内容物于离心管中，涡旋混合均匀后，称取内容物，并用步骤S21中配制的稀释剂配制成浓度为2
‑
20μg/mL的供试品溶液；S23、对照品溶液配制：称取生育酚对照品，并用步骤S21中配制的稀释剂溶解和稀释，配制成浓度为800μg/mL的对照储备液；再精密所述对照储备液，采用步骤S21中配制的稀释剂通过两步稀释，配制成浓度为2
‑
20μg/mL的对照品溶液；S3、进样检测：分别取步骤S21中所述空白溶液、步骤S23中所述对照品溶液和S22中所述供试品溶液进样，采用高效液相色谱法进行色谱数据的采集和分析，确定生育酚的保留时间，按外标法以峰面积计算供试品溶液中生育酚的含量。4.根据权利要求3所述的一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述步骤S3的高效液相色谱法中，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志鹏，林娟，朱慧，沈福星，蔡波涛，于晓东，杨励，李琳，赖小云，杨改妮，陈丽琴，王秀荣，程凯，
申请(专利权)人：人福普克药业武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：