检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条及其制备和应用制造技术

本发明专利技术属于食品技术领域，具体涉及一种检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。该胶体金免疫层析试纸条，包括底板、检测垫、金标垫、样品垫和吸水垫；所述检测垫上设有T线和C线，所述T线喷涂小清蛋白，所述C线喷涂羊抗鼠多克隆抗体；所述金标垫上喷涂有胶体金标记的小清蛋白单克隆抗体。本发明专利技术使用小清蛋白反映鱼肉新鲜度客观、准确；胶体金免疫层析试纸检测取样量少，对检测样品破坏小；灵敏度高，操作简便；检测时间短、检测结果直观；目标分析物明确，蛋白可与抗体特异性结合，可实现特异性检测；试纸条稳定性好，实验结果可长期保存；检测过程无有害物质参与，是一种绿色环保的检测手段。种绿色环保的检测手段。种绿色环保的检测手段。

【技术实现步骤摘要】
检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条及其制备和应用


[0001]本专利技术属于食品
，具体涉及一种检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]鱼类营养丰富、含水量高、肌肉组织中蛋白酶活性较高，容易腐败变质，因此对于鱼肉的新鲜度评价和分级非常必要。
[0003]目前评价鱼肉新鲜度的方法有很多，主要有感官评价、微生物、理化变化。例如专利CN112285237A一种基于生物胺含量的鱿鱼新鲜度评价方法采用生物胺判定鱿鱼的新鲜度；CN111523542A采用菌落总数作为判定鱼肉新鲜度的依据；CN103424374A使用带鱼体内TVB
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N(挥发性盐基氮)含量建立检测模型，根据TVB
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N含量来评价带鱼的新鲜度等级。然而鱼肉的劣变是一个综合变化的过程，以单一指标作为鲜度等级的划分依据具有片面性，因此用不同指标从多方面反映鱼肉新鲜度会带来更加客观和全面的结果。
[0004]蛋白质是鱼肉的基本组成部分之一，也是品质变化的主要因素，其降解或变性程度与鱼肉品质具有密切联系本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，包括底板、检测垫、金标垫、样品垫和吸水垫；所述检测垫设置于所述底板的中部，检测垫上设有T线和C线，所述T线喷涂小清蛋白，所述C线喷涂羊抗鼠多克隆抗体；所述样品垫设置于底板上靠近所述检测垫T线的一侧，所述金标垫交叠设置于样品垫与检测垫之间，金标垫上喷涂有胶体金标记的小清蛋白单克隆抗体；所述吸水垫设置于底板上靠近所述检测垫C线的一侧并部分交叠于检测垫上。2.一种检测鱼肉新鲜度的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，S1：提取纯化鱼肉小清蛋白；S2：将所述小清蛋白和羊抗鼠多克隆抗体喷涂在检测垫基材上分别形成T线和C线，烘干得到检测垫；S3：将样品垫、吸水垫和所述检测垫组装到底板上，切割，得到宽度为3
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4mm的试纸条；S4：采用胶体金标记小清蛋白单克隆抗体，得到金标抗体，将所述金标抗体喷涂在活化金标垫上，得到金标垫；将所述金标垫组装到所述试纸条中，得到所述胶体金免疫层析试纸条。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1的具体步骤如下，S1.1：将鱼肉充分搅碎后加入缓冲液I，均质后离心，得到上清液A；S1.2：对所述上清液A进行加热处理后离心，得到上清液B；S1.3：将所述上清液B经盐析后分离，得到沉淀物；S1.4：取所述沉淀物溶于缓冲液II中，4℃透析过夜；S1.5：将透析好的液体经微孔滤膜过滤，上样于离子交换柱，用洗脱液进行梯度洗脱，流速为1mL/min，收集各组分并测定其在220nm、280nm出的紫外吸收值并进行SDS
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PAGE检测，确定鱼肉小清蛋白所在组分，完成鱼肉小清蛋白的提取纯化。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，将所述小清蛋白经PB溶解至浓度为0.5
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【专利技术属性】
技术研发人员：杨方，陈红，吴仪，王淑芬，姜启兴，许艳顺，于沛沛，夏文水，余达威，高沛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：