一种液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法技术

本发明专利技术公开了一种液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，利用液滴微流控方法高通量制备多细胞微液滴，通过调整细胞浓度调控细胞团的大小。于细胞培养箱中静置，依靠重力沉降形成细胞堆积体，培养后细胞间黏连成细胞团。初步形成细胞团的时间仅需12小时。该凝胶生物相容性好，在凝胶—溶胶转变温度以下形成物理凝胶、升温至凝胶—溶胶转变温度处于液体状态。在凝胶—溶胶转变温度以下进行细胞团培养，在凝胶—溶胶转变温度以上进行细胞团的回收。本发明专利技术构筑细胞团的优势在于通量高、耗时短、一致性好、回收简便、同时封闭的芯片环境下减少与空气接触所带来的污染。本发明专利技术的细胞团模型构筑方法可真正应用于药物活性和物质毒性筛选等领域。质毒性筛选等领域。质毒性筛选等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法


[0001]本专利技术涉及生物模型构建方法，特别是能够适应高通量药物和物质安全测试使用的通量化微型细胞团的构建方法。

技术介绍

[0002]生物模型是物质毒性、药物有效性测试必须的基本模型。传统使用的生物模型主要是动物模型和人工培养的细胞模型。动物模型与人类存在显著的生物差异，因此动物模型的测试结果难以直接适用人类，甚至会得出完全不同的实验效果，难以替代人体实验。人工培养的细胞模型相比动物而言更加接近人体，但是人工培养通常是在二维状态下开展的，而人体中的细胞很多是在三维立体和动态环境下生长的，其细胞外基质、传质过程、代谢周期与人工培养的细胞存在显著差异，因此二维细胞模型与人体也存在较大差异，其测试结果与实际存在显著差距。因此开发新型的细胞培养系统，模拟细胞外基质和环境，模仿生理传质过程，构建具有一定人类组织功能的新型细胞模型具有重要价值。
[0003]细胞团是一类由很多细胞结合在一起形成的具有一定生物学功能的生物模型。细胞团中的细胞在三维条件下有机结合，能够更好地模仿了人体细胞团的功能，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，其特征在于，包括如下步骤：a.微流控制备细胞微液滴：搭建恒温微流控装置，配制凝胶与细胞的混合溶液作为水相，配制含表面活性剂的油作为油相，使微流控芯片产生均匀的多细胞微液滴；b.同步细胞重力沉降：收集多细胞微液滴，使细胞依靠重力沉降堆积黏连构建细胞聚集团；c.细胞团培养：细胞聚集团放置于在凝胶—溶胶转变温度下的环境中，在维持细胞活性的凝胶中，进行细胞聚集团的培养；d.成型细胞团模型回收升温到凝胶—溶胶转变温度以上，破坏包含细胞聚集团的凝胶体系，释放细胞团，从而回收细胞团模型。2.根据权利要求1所述液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，其特征在于：在所述步骤a中，所述微流控芯片由水相入口、油相入口和出口组成，利用油相作为夹流来形成高通量、尺寸均一的液滴，液滴尺寸为50
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500微米。3.根据权利要求1所述液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，其特征在于：在所述步骤a中，采用恒温微流控装置，对进入微流控芯片的水相溶液以及形成液滴的芯片温度进行控制，维持凝胶前驱体处于可流动状态。4.根据权利要求1所述液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，其特征在于：在所述步骤a中，使微流控芯片恒温在25
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45℃条件下，形成稳定均匀的多细胞微液滴。5.根据权利要求1所述液滴微流控重力定位构建高通量细胞团模型的方法，其特征在于：在所述步骤a中，凝胶采用天然凝胶、合成凝胶和复合凝胶中的至少一种；或者凝胶采用在生理溶液中具有可逆温敏相变行为并在凝胶—溶胶转变温度以下形成物理凝胶、在凝胶—溶胶转变温...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐碧漪，刘畅，唐涛，李文，张阿方，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：