一种空间位阻控制信号放大且简单灵敏的外泌体检测方法技术

本发明专利技术公开了分析化学领域内一种空间位阻控制信号放大且简单灵敏的外泌体检测方法。外泌体是一种新兴的癌症生物标志物，开发简单、方便和灵敏的外泌体检测技术得到了广泛的关注。我们提出利用外泌体的位阻效应阻碍双链DNA的互补配对过程，因而链霉亲和素修饰的DNA单链能够在末端脱氧核苷酸转移酶的作用下延伸出大量G四联体，并与硫黄素T结合产生强烈荧光，从而开发了一种基于空间位阻控制信号放大且简单灵敏的新型外泌体检测方法。该方法能够在一定浓度范围内实现外泌体的定量分析且检测限较低，同时在含有10％人血清的复杂环境中依然能够保持良好的检测效果，显示该方法在临床检测方面具有一定的潜力。床检测方面具有一定的潜力。床检测方面具有一定的潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种空间位阻控制信号放大且简单灵敏的外泌体检测方法


[0001]本专利技术属于分析化学领域，涉及空间位阻控制信号放大的外泌体检测原理，过程，实验条件及应用。

技术介绍

[0002]外泌体可作为新型癌症生物标志物这一发现为癌症的早期筛查和精确诊断提供了更多可能和机会。外泌体是一种具有平均厚度5纳米的磷脂双分子层结构且尺寸在40-160纳米(平均为100纳米)的纳米级别小泡，能够被几乎所有类型的细胞分泌，在血液，尿液等各种人体体液中均有普遍分布，因此能够大大降低临床取样难度。另外，由于磷脂双分子层膜的保护作用，外泌体可以有效地避免被溶酶体或巨噬细胞损伤或清除，从而延长其循环半衰期，提高其生物活性。外泌体携带许多母细胞的信息，如与母细胞相同的膜蛋白、多糖等且外泌体内部也包含着大量与母细胞相关的核酸如miRNA，DNA等及其他生物分子。相比检测单一癌症标志物来判断患癌风险，检测癌细胞衍生的外泌体能够有效提高检测结果的准确性和说服力，因而具有更高的实际临床应用价值。
[0003]外泌体虽然是一种新兴的疾病标志物，但是目前已经有大量关于癌症外泌体检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.本发明设计原理思想：探针1(P1)与链霉亲和素修饰的探针2(SA-P2)之间的有效碱基互补配对受到外泌体巨大空间位阻的阻碍，使得两条链无法成功地互补配对；因此SA-P2链能够始终保持着单链状态，从而能够作为TdT的良好底物催化延伸出大量G四联体...

【专利技术属性】
技术研发人员：李根喜，杨洁，潘艳红，王磊，邓颖，王明慧，彭英，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：