石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用。该石斛来源外泌体样囊泡具有抗衰老、美白功效，且其效果远优于石斛提取物。本发明专利技术制备的石斛来源外泌体样囊泡可广泛应用于化妆品领域。其作为美白护肤品可降低β

【技术实现步骤摘要】
石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用


[0001]本专利技术属于精细化工领域，涉及一种石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用，石斛来源外泌体样囊泡的制备及其在抗皮肤衰老、美白方面的应用。

技术介绍

[0002]外泌体1983发现于体外培养的绵羊红细胞上清液中，是细胞主动分泌的大小较为均一，直径为40
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100纳米，密度1.10
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1.18g/ml的囊泡样小体。1987年正式被定名为exosome，最早被认为是细胞的废弃物。2013年，Song等人通过差速离心和蔗糖梯度离心相结合的方法首次从葡萄中分离、纯化出了大量50nm～300nm的囊泡状结构，并将这种由植物细胞分泌至胞外的类似于动物外泌体的囊泡称为外泌体样纳米颗粒(exosome
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like nanoparticles，ELNs)，其与外泌体结构类似，ELNs里面包含了特异性蛋白、DNA和RNA等成分。
[0003]皮肤衰老是人体自发性衰老与外界影响的共同结果。皮肤衰老的特征是皱纹增多，皮肤弹性降低，具体原因是胶原蛋白减少与弹性蛋白减少。而胶原蛋白和弹性蛋白受胶原蛋白酶和弹性蛋白酶调控，胶原蛋白酶和弹性蛋白酶可降解皮肤内胶原蛋白和弹性蛋白，从而导致胶原蛋白与弹性蛋白减少，造成皮肤弹力降低、产生皱纹。
[0004]色素沉着往往伴随着皮肤衰老同时发生，酪氨酸酶活性对黑色素的生成起到主要作用。
[0005]科学家目前已经从生姜、葡萄柚、梨、柠檬等数十种果蔬中分离得到外泌体样囊泡，但对外泌体样囊泡用途知之甚少。
[0006]植物外泌体样囊泡与植物提取物存在明显差异，植物外泌体样囊泡是直径为20
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500nm的具有一定刚性的微囊结构；此外，提取物只要包含某一单一类别成分，如石斛提取物主要成分为石斛多糖；外泌体样囊泡主要包含脂质、蛋白质和核酸等化学成分，其中脂质主要为磷脂酸(Phosphatidic acid，PA)、磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine，PE)、磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol，PI)、二半乳糖基二酰基甘油(Digalactosyl diacylglycerol，DGDG)和单半乳糖基二酰基甘油(Monogalactosyl diacylglycerol，MGDG)等。其中，PA是重要的脂质信号分子，能够通过不同的作用模式调节细胞进程，DGDG和MGDG是重要的糖脂，可以在冻融冻干过程中稳定囊泡结构。蛋白类成分主要为有调节糖脂代谢的蛋白质(包括肌动蛋白和各类酶在内的胞质蛋白)、GTPases(Guanosine triphosphatases，Rab蛋白质家族)、与膜和囊泡相关的蛋白质(Endosomal sorting complex required for transport，ESCRT)相关蛋白CHMP1(CHromatin Modifying Protein)、VAMP711(membrane protein 711)等。植物外泌体样囊泡中也含有大量的RNA，主要为miRNAs。囊泡中的miRNAs可以进入细胞或细菌内，靶向并调控动物细胞或细菌的基因表达，如大豆ELNs中的MIR
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5781可以直接靶向在炎症反应中有重要作用的IL
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17A。
[0007]对于石斛，尽管已经有报道石斛提取物具有抗衰老、美白功效，但并未有报道石斛来源外泌体样囊泡具有抗衰、美白功效。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种石斛来源外泌体样囊泡的制备方法，并且其具有抗衰、美白效果，适用于化妆品领域，另外，其活性成分是石斛来源外泌体样囊泡，并不是石斛提取物。
[0009]为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用。
[0010]本专利技术一方面提供了一种石斛来源外泌体样囊泡，通过以下方式制备得到：
[0011]1)将新鲜石斛清水洗净，切段，置于粉碎器具中，加入同等质量磷酸盐缓冲液，粉碎榨汁，过滤，收集滤汁；将滤汁在4℃，800
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1600g条件下离心15
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30min，收集第一上清液；
[0012]2)将步骤1中第一上清液在4℃，2500
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4000g条件下离心15
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30min，收集第二上清液。
[0013]3)将步骤2中第二上清液在4℃，8000
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12000g条件下离心45
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75min，收集第三上清液。
[0014]4)将步骤3中第三上清液在4℃，14000
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16000g条件下离心60
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120min，弃上清液，加入磷酸盐缓冲液即得所述石斛来源外泌体样囊泡溶液。
[0015]作为优选，所述新鲜石斛为新鲜石斛茎部。
[0016]作为优选，步骤4中所述磷酸盐缓冲液的加入量为残留物质量的9倍。
[0017]作为优选，所述石斛为以下石斛属植物：铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛、小粉花石斛、鼓槌石斛、马鞭石斛、黄草石斛、环草石斛、蝴蝶石斛。
[0018]作为优选，所述石斛为以下石斛属植物：铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛。
[0019]本专利技术还提供了一种石斛来源外泌体囊泡的制备方法，包括以下步骤：
[0020]1)将新鲜石斛清水洗净，切段，置于粉碎器具中，加入同等质量磷酸盐缓冲液，粉碎榨汁，过滤，收集滤汁；将滤汁在4℃，800
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1600g条件下离心15
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30min，收集第一上清液；
[0021]2)将步骤1中第一上清液在4℃，2500
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4000g条件下离心15
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30min，收集第二上清液。
[0022]3)将步骤2中第二上清液在4℃，8000
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12000g条件下离心45
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75min，收集第三上清液。
[0023]4)将步骤3中第三上清液在4℃，14000
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16000g条件下离心60
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120min，弃上清液，加入磷酸盐缓冲液即得所述石斛来源外泌体样囊泡溶液。
[0024]作为优选，所述新鲜石斛为新鲜石斛茎部；所述石斛为以下石斛属植物：铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛。
[0025]作为优选，步骤4中所述磷酸盐缓冲液的加入量为残留物质量的9倍。
[0026]本专利技术还提供了一种石斛来源外泌体样囊泡在抗皮肤衰老、美白方面的应用。
[0027]作为优选，所述的应用是指应用于日化化妆品领域。
[0028]本专利技术的有益效果在于：
[0029]一方面，本专利技术公开了一种石斛来源外泌体样囊泡的制备方法，另一方面，本专利技术公开了按照该方法制备的石斛来源外泌体样囊泡在化妆品领域的有益效果。其作为美白护本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种石斛来源外泌体样囊泡，其特征在于，通过以下方式制备得到：1)将新鲜石斛清水洗净，切段，置于粉碎器具中，加入同等质量磷酸盐缓冲液，粉碎榨汁，过滤，收集滤汁；将滤汁在4℃，800
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1600g条件下离心15
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30min，收集第一上清液；2)将步骤1中第一上清液在4℃，2500
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4000g条件下离心15
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30min，收集第二上清液；3)将步骤2中第二上清液在4℃，8000
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12000g条件下离心45
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75min，收集第三上清液；4)将步骤3中第三上清液在4℃，14000
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16000g条件下离心60
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120min，弃上清液，加入磷酸盐缓冲液即得所述石斛来源外泌体样囊泡溶液。2.根据权利要求1所述的石斛来源外泌体样囊泡，其特征在于，所述新鲜石斛为新鲜石斛茎部。3.根据权利要求2所述的石斛来源外泌体样囊泡，其特征在于，步骤4中所述磷酸盐缓冲液的加入量为残留物质量的9倍。4.根据权利要求3所述的石斛来源外泌体样囊泡，其特征在于，所述石斛为以下石斛属植物：铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛、小粉花石斛、鼓槌石斛、马鞭石斛、黄草石斛、环草石斛、蝴蝶石斛。5.根据权利要求4所述的石斛来源外泌体样囊泡，其特征在于，所述石斛为以下石斛属植物：...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱云，周秋娜，金炫延，金荣熙，尹锺赫，金延埈，
申请(专利权)人：科丝美诗中国化妆品有限公司，
类型：发明
国别省市：