使用等温扩增的数字生物分子检测和/或定量制造技术

本发明专利技术涉及一种基于等温扩增的用于检测和/或定量样本中至少一种靶标生物分子的数字方法，所述生物分子选自DNA、RNA和蛋白质。本发明专利技术还涉及所述数字方法的不同应用和试剂盒。明还涉及所述数字方法的不同应用和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用等温扩增的数字生物分子检测和/或定量


[0001]本专利技术涉及一种检测和/或定量样本中的生物分子(例如，DNA、RNA和蛋白质)的数字方法，其基于具有特定分子设计的等温扩增。本专利技术还涉及一种用于疾病诊断的方法和农业诊断方法，所述疾病选自癌症、神经元疾病、心血管疾病、炎性疾病、自身免疫性疾病、由病毒或细菌感染引起的疾病、皮肤病、骨骼肌疾病、牙病和产前疾病。其还涉及在食品农业食品领域和环境中检测生物标记物(生物分子)的方法。所有这些诊断和检测方法都包括使用本专利技术的数字方法。本专利技术还涉及一种用于检测和/或定量至少一种靶标生物分子的试剂盒，所述试剂盒包含酶、寡核苷酸和分割剂。

技术介绍

[0002]若干种生物分子如DNA、RNA或蛋白质用作有吸引力的诊断、预后或预测生物标记物。这些分子，特别是核酸已经积累其与各种疾病(癌症、神经元或心血管疾病、糖尿病等)密切相关的临床证据。此外，它们存在于体液中，因此可以通过微创液体活检(血清、血浆、尿液)获得。循环中的生物标记物可以被反复评估，从而能够对治疗和复发进行定期随访、能够进行大规模人群筛查本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于检测和/或定量样本中至少一种靶标生物分子的数字方法，其包括以下步骤：a)将所述样本与包含缓冲液、酶、作为扩增寡核苷酸的第一寡核苷酸、作为泄露吸收寡核苷酸的第二寡核苷酸和作为靶标特异性转换寡核苷酸的第三寡核苷酸的混合物进行混合；b)将步骤a)中获得的混合物分割成若干区室，使得部分区室不包含靶标生物分子；c)将靶标生物分子转换为信号，所述信号优选为DNA单链；d)扩增信号，以及e)检测和/或测量每个区室中的所述信号。2.根据权利要求1所述的数字方法，其中所述靶标生物分子是核酸或蛋白质，所述蛋白质优选是酶。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述靶标生物分子是核酸，优选选自DNA、cDNA、RNA、mRNA和micro RNA，更优选地，所述核酸是micro RNA。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤a)中使用的所述酶选自聚合酶、切口酶或限制酶和外切酶。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第一寡核苷酸包括含有切口酶识别位点的部分重复结构，以及所述第二寡核苷酸能够沿着所述第一寡核苷酸结合、延伸、失活并缓慢释放聚合产物，从而诱导阈值效应。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，还包括加入作为报告探针的第四寡核苷酸，优选所述报告探针是荧光探针。7.根据权利要求1至6中任一项所述方法，还包括加入作为交叉抑制寡核苷酸的第五寡核苷酸，用于检测和/或定量两个或多个生物分子。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中将步骤a)中获得的混合物在步骤b)中分割为液滴，优选分割为油包水乳液液滴。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述液滴的尺寸为0.001至100...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y，
申请(专利权)人：国家健康科学研究所巴黎城市物理化工高等学院巴黎科学与文学联大巴黎大学，
类型：发明
国别省市：