一种高纯度羟基酪醇的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种高纯度羟基酪醇的制备方法，该制备方法包括制备橄榄苦苷溶液、多孔陶瓷球负载酶、多孔陶瓷球后处理与纯化等步骤。本发明专利技术制备方法的橄榄苦苷转化率达80％以上，羟基酪醇收率达80％以上，制备羟基酪醇的纯度为以重量计93％以上，本发明专利技术高纯度羟基酪醇制备方法是一种绿色环保无污染、高效连续实施方法，具有非常良好的应用前景。具有非常良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度羟基酪醇的制备方法


[0001]本专利技术属于天然产物加工
更具体地，本专利技术涉及一种高纯度羟基酪醇的制备方法。

技术介绍

[0002]羟基酪醇(hydroxytyrosol，HT)化学名为3,4
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二羟基苯乙醇，是一种在油橄榄中的天然功能活性成分。现代研究表明，羟基酪醇具有很强的去自由基和抗氧化能力，它还具有抑菌抗炎以及抗肿瘤等等药理活性，它还可有效预防心脑血管疾病以及糖脂代谢相关疾病。近年来，人们还发现羟基酪醇能够与gp41蛋白结合，阻断人免疫缺陷病毒(HIV)进入宿主细胞，用于艾滋病的防治。
[0003]天然的羟基酪醇是存在于橄榄油中的小分子酚类化合物，含量非常低，其主要以酯化物(橄榄苦苷)的形式存在于油橄榄的各个部位。羟基酪醇和橄榄苦苷的分子结构式如下：
[0004][0005]目前，利用橄榄苦苷降解制备羟基酪醇的主要技术是酸碱水解法，离子交换树脂法，酶法。其中酸水解主要是硫酸、盐酸水解，例如Antonoi等人在WO2008136037、专利技术名称“Chemical
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高纯度羟基酪醇的制备方法，其特征在于该制备方法的步骤如下：A、制备溶液按照以克计橄榄苦苷与以毫升计乙醇水溶液的比20～100：1000，加热搅拌将橄榄苦苷溶于乙醇水溶液中，得到橄榄苦苷乙醇溶液；B、多孔陶瓷球负载酶按照以克计酶粉与以毫升计缓冲液的比1～5：20～50，分别将纤维素酶、半纤维素酶、褶皱假丝酵母脂肪酶与β
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葡萄糖苷酶溶于柠檬酸
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磷酸氢二钠缓冲液中，接着按照以毫升计酶液与以毫升计戊二醛水溶液的比20～50：1～5，添加浓度为以体积计0.8～1.2％戊二醛水溶液，加入清洗干净的多孔陶瓷球，在摇床中在温度10～30℃与转速100～150rpm的条件下处理2～4h，分离得到的多孔陶瓷球在
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20～
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50℃的条件下预冷冻2～4h，接着在冷冻干燥机中冷冻干燥至水含量为以重量计0.5％以下，得到一种负载酶的多孔陶瓷球；C、负载酶多孔陶瓷球后处理按照以克计丙烯酸树脂与以毫升计丙酮之比为1～2：50～100，将热固性丙烯酸树脂溶解在丙酮中，然后加入步骤B得到的负载酶多孔陶瓷球，搅拌25～35min，过滤分离，其多孔陶瓷球置于通风橱中自然风干，然后使用柠檬酸
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磷酸氢二钠缓冲液清洗，洗涤直至清洗液中没有酶，得到一种固定化酶；D、纯化将步骤C得到的固定化酶装载在生物反应器中，让步骤A得到的橄榄苦苷乙醇溶液在该生物反应器中在转速60～100rpm、温度40～55℃与流速5～20升/小时的条件下进行纯化，并且按照回流量与送到分子蒸馏处理量之比4～20：1，把从生物反应器出料口(7)排出的反应液返回到回流口(10)，余下的反应液送到两级分子蒸馏器中进行分子蒸馏，得到纯度为以重量计93％以上的羟基酪醇。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤A中，所述乙醇水溶液的浓度是以体积计20～50％。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤A中，所述橄榄苦苷乙醇溶液的浓度是20～100g/L。4.根据权利要求1中所述的制备方法，其特征在于在步骤B中，将纤维素酶、半纤维素酶、褶皱假丝酵母脂肪酶与β
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葡萄糖苷酶溶解的缓冲液是浓度10毫摩尔、pH4.8...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟永宏，胡永员，党银博，郭建琦，牛永洁，杨璐，
申请(专利权)人：西安海斯夫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：