一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用技术

本发明专利技术公开了一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用，获卵后体外受精前培养方法包括：获取的卵丘细胞

【技术实现步骤摘要】
一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用


[0001]本专利技术实施例涉及细胞内分泌
，特别涉及一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用。

技术介绍

[0002]卵泡颗粒细胞(Granulosa Cells,GCs)是卵泡内的体细胞，在卵泡的生长发育过程中起着至关重要的作用。随着卵泡的发育至窦卵泡期，颗粒细胞分化为在空间和功能上不同的两个种群：围绕在卵母细胞周围的卵丘细胞(Cumulus Cells,CCs)和排列在卵泡壁上的壁颗粒细胞(Mural Granulosa Cells，MGCs)。一般认为，卵丘细胞与壁颗粒细胞是起源一致、位置不同的的同一种细胞。因为根据不同促排方案和个体卵巢反应不一，所有卵泡的大小也不均一，所以可以认为根据不同卵泡的大小获取的卵子成熟度也会具有一定的差异。辅助生殖技术体外受精要求，在注射HCG后36小时取卵和40
‑
41小时进行体外受精比较合适，也就是说获取卵子后是在体外培养4
‑
6小时左右再进行加精(或媒精)。目前，大多数胚胎室都是把获取的卵子立刻转移到“受精培养液”里进行培养后再加精。
[0003]然而，上述现有技术的方法存在：获卵后授精前，卵子在“受精培养液”中，虽然只有短短数小时，但是这一受精培养液并不是卵子的最佳环境。为此，可能会影响卵子质量、继之的正常受精率和优质胚胎发育率、囊胚形成率和优质囊胚率。
[0004]因此，如何成功开发一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液，应用这些系列培养液以提高卵子质量、正常受精率和优质卵裂期胚胎发育率、囊胚形成率和优质囊胚率，成为亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术实施例目的是提供一种人类卵母细胞体外受精前培养方法和系列培养液与应用，采用本专利技术的卵子体外成熟培养液于取卵后受精前对卵丘细胞
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卵子
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复合体进行短时培养，促进卵子细胞核和细胞质的同步成熟，进而提高卵子质量；继而采用本专利技术的受精培养液授精提高正常受精率；相应地采用本专利技术的胚胎发育培养液培养受精卵提高优质卵裂期胚胎发育率和提高囊胚形成率和优质囊胚率；由此可能提高胚胎移植后的临床妊娠率和胚胎着床率。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]在本专利技术的第一方面，提供了一种卵子体外成熟培养液，所述卵子体外成熟培养液的组成成分包括：
[0008]A液：包括5.5～8.5g/L氯化钠、0.25～0.7g/L氯化钾、0.02～0.06g/L七水硫酸镁、0.03～0.08g/L磷酸二氢钠、2.1～5g/L碳酸氢钠、1～3g/LD
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(+)
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葡萄糖、0.15～0.5g/L丙酮酸钠、0.15～0.5g/L二水氯化钙、1.5～3g/L的DL
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乳酸钠、0.1～0.3g/L丙氨酰谷氨酰胺、0.01～0.04g/L的L
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天门冬酰胺、0.01～0.03g/L的L
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天门冬氨酸、0.006～0.02g/L甘氨酸、0.01～0.04g/L的L
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脯氨酸、0.01～0.05g/L的L
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丝氨酸、0.1～0.4g/L的L
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盐酸精氨酸、
0.02～0.05g/L的L
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盐酸胱氨酸、0.02～0.05g/L的L
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组氨酸盐酸盐一水合物、0.05～0.2g/L的L
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异亮氨酸、0.05～0.2g/L的L
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亮氨酸、0.07～0.3g/L赖氨酸盐酸盐、0.01～0.05g/L的L
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蛋氨酸、0.03～0.09g/L的L
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苯丙氨酸、0.04～0.09g/L苏氨酸、0.01～0.03g/L的L
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色氨酸、0.02～0.05g/L的L
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酪氨酸、0.02～0.05g/L的L
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缬氨酸、0.001～0.003g/L的D
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泛酸钙、0.001～0.004g/L氯化胆碱、0.001～0.002g/L叶酸、0.002～0.005g/L肌醇、0.001～0.003g/L烟酰胺、0.001～0.004g/L盐酸吡哆醇、0.0001～0.0005g/L核黄素、0.001～0.005g/L盐酸硫胺素、0.01～0.05g/L庆大霉素和1～5g/L人血清白蛋白；
[0009]B液：7～8IU/mLHMG。
[0010]在本专利技术的第二方面，提供了一种受精培养液，所述受精培养液的组成成分包括：
[0011]5.5～8.5g/L氯化钠、0.2～0.5g/L氯化钾、0.02～0.06g/L七水硫酸镁、0.03～0.07g/L磷酸二氢钠、2.1～5.2g/L碳酸氢钠、0.5～2g/LD
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(+)
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葡萄糖、0.02～0.05g/L丙酮酸钠、0.2～0.5g/L二水氯化钙、2～4g/L的DL
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乳酸钠，0.01～0.05g/L庆大霉素和1～5g/L人血清白蛋白。
[0012]在本专利技术的第三方面，提供了一种胚胎发育培养液，所述胚胎发育培养液的组成成分包括：
[0013]5～8g/L氯化钠、0.2～0.5g/L氯化钾、0.01～0.05g/L六水氯化镁、0.04～0.09g/L磷酸二氢钠、2.1～6.2g/L碳酸氢钠、0.04～0.5g/L的D
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(+)
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葡萄糖、0.05～0.15g/L丙酮酸钠、0.2～0.5g/L二水氯化钙、1.5～5g/L的DL
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乳酸钠、0.003～0.008g/L的EDTA四钠盐二水合物、0.004～0.09g/L丙氨酰谷氨酰胺、0.003～0.007g/L的L
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天门冬酰胺、0.005～0.02g/L的L
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天门冬氨酸、0.004～0.009g/L甘氨酸、0.004～0.009g/L的L
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脯氨酸、0.003～0.008g/L的L
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丝氨酸、0.003～0.007g/L的L
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盐酸精氨酸、0.005～0.02g/L的L
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盐酸胱氨酸、0.01～0.03g/L的L
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半胱氨酸、0.005～0.02g/L的L
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组氨酸盐酸盐一水合物、0.02～0.05g/L的L
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异亮氨酸、0.02～0.06g/L的L
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亮氨酸、0.03～0.09g/L的赖氨酸盐酸盐、0.005～0.02g/L的L
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蛋氨酸、0.01～0.03g/L的L
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苯丙氨酸、0.015～0.04g/L的苏氨酸、0.025～0.07g/L的L
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色氨酸、0.005～0.02g/L得到L
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种卵子体外成熟培养液，其特征在于，所述卵子体外成熟培养液的组成成分包括：A液：包括5.5～8.5g/L氯化钠、0.25～0.7g/L氯化钾、0.02～0.06g/L七水硫酸镁、0.03～0.08g/L磷酸二氢钠、2.1～5g/L碳酸氢钠、1～3g/LD
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葡萄糖、0.15～0.5g/L丙酮酸钠、0.15～0.5g/L二水氯化钙、1.5～3g/L的DL
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乳酸钠、0.1～0.3g/L丙氨酰谷氨酰胺、0.01～0.04g/L的L
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天门冬酰胺、0.01～0.03g/L的L
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天门冬氨酸、0.006～0.02g/L甘氨酸、0.01～0.04g/L的L
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葡萄糖、0.02～0.05g/L丙酮酸钠、0.2～0.5g/L二水氯化钙、2～4g/L的DL
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乳酸钠，0.01～0.05g/L庆大霉素和1～5g/L人血清白蛋白。3.一种胚胎发育培养液，其特征在于，所述胚胎发育培养液的组成成分包括：5～8g/L氯化钠、0.2～0.5g/L氯化钾、0.01～0.05g/L六水氯化镁、0.04～0.09g/L磷酸二氢钠、2.1～6.2g/L碳酸氢钠、0.04～0.5g/L的D
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【专利技术属性】
技术研发人员：千日成，
申请(专利权)人：艾尔斯浙江医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：