氯米芬作为冠状病毒广谱抑制剂的新用途制造技术

本发明专利技术公布了氯米芬的新用途，氯米芬作为冠状病毒的广谱抑制剂用于治疗2019新型冠状病毒，严重急性呼吸综合症（SARS），中东呼吸综合症（MERS）肺炎感染以及人冠状病毒OC43(HCoV

【技术实现步骤摘要】
氯米芬作为冠状病毒广谱抑制剂的新用途


[0001]本专利技术属于医药领域，涉及氯米芬的新用途，具体涉及氯米芬在治疗冠状病毒感染的用途。

技术介绍

[0002]高致病性冠状病毒感染成了这十年来广受关注公共卫生问题。严重急性呼吸综合征(SARS，2002-2004)，中东呼吸综合征(MERS，2012-至今)，2019-nCoV(COVID-19)，每一个对人类健康，经济发展都带来了巨大的冲击。
[0003]由于没有针对性的有效药物和疫苗，新型冠状病毒的新药研发意义重大，在这场没有硝烟的战争中，全球多家科研机构和制药公司致力于研发新型冠状病毒疫苗和治疗药物。因此专利技术具有重大的社会学和经济学意义。
[0004]氯米芬，clomifene，为非甾体化合物，用于避孕药引起的闭经及月经紊乱。氯米芬对实验动物有微弱的雌激素活性，而在人体则有抗雌激素活性作用，可刺激排卵。具有较强的抗雌激素作用和较弱的雌激素活性。低剂量能促进垂体前叶分泌促性腺激素，从而诱发排卵；高剂量则明显抑制垂体促性腺激素的释放，临床上主要用于避孕药引起的闭经及月经紊乱。对男性则有促进精子生成的作用，对少精症有效。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供包括2019新型冠状病毒(COVID-19)在内的冠状病毒的有效抑制剂，可以预防及治疗包括2019新型冠状病毒在内的冠状病毒感染。本专利技术提供了一种氯米芬的新用途，作为包括2019新型冠状病毒在内的冠状病毒的有效抑制剂，在制备预防或治疗冠状病毒感染的药物中的应用。<br/>[0006]所述的应用，其中冠状病毒包括2019新型冠状病毒(COVID-19)、严重急性呼吸综合症(SARS)病毒、中东呼吸综合症(MERS)病毒以及普通感冒人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)，还包括人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)、人冠状病毒229E(HCoV-229E)、人冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1)。
[0007]所述的应用，其中冠状病毒为2019新型冠状病毒(COVID-19)。
[0008]所述的应用，其中冠状病毒感染为冠状病毒肺炎或者普通感冒。
[0009]所述的应用，其中冠状病毒感染包括2019新型冠状病毒COVID-19肺炎、严重急性呼吸综合症SARS、中东呼吸综合症MERS、普通感冒、人冠状病毒NL63肺炎、人冠状病毒229E肺炎、人冠状病毒HKU1肺炎。
[0010]所述的应用，其中冠状病毒感染为2019新型冠状病毒肺炎。
[0011]本专利技术人经过大量研究发现氯米芬的新用途，氯米芬可以结合2019新型冠状病毒的刺突蛋白S1，从而阻断病毒进入细胞，氯米芬在细胞水平IC50＝11.88uM。
[0012]2019新型冠状病毒进入细胞靠刺突蛋白spike识别受体ACE2，因此针对spike蛋白为靶点的小分子抑制剂可应用于针对新型冠状病毒的治疗。
[0013]本专利技术人还发现氯米芬对SARS和MERS的S1靶蛋白同样能有效结合。因此，氯米芬可应用于针对各个亚型冠状病毒感染的治疗。
[0014]本专利技术的化合物可以配制成各种适合的药物制剂形式。可以单独使用，或者将其与药用辅料(例如赋形剂、稀释剂等)混合，配制成口服给药的片剂、胶囊剂、颗粒剂或糖浆剂等或注射给药的粉针剂、溶液剂。
[0015]与现有技术相比，本专利技术的技术效果如下：
[0016]氯米芬在细胞水平能够结合刺突蛋白S1，阻止病毒进入细胞，从而达到治疗冠状病毒肺炎感染以及普通感冒,抑制SARS-CoV-2假病毒的IC50＝11.88uM。
附图说明
[0017]图1. 2019CoV S1&amp;氯米芬结合位点
[0018]图1显示AI对接结果：氯米芬和2019CoV S1的结合位点。
[0019]氯米芬结合2019CoV S1(pdb:6vw1)
[0020]氯米芬对接在2019CoV S1蛋白上,虚线表示氢键
[0021]图2. 2019CoV S1&amp;氯米芬传感图
[0022]图2显示氯米芬和2019新型冠状病毒S1蛋白的亲和力。
[0023]图3. SARS S1&amp;氯米芬传感图
[0024]图3显示氯米芬和SARS病毒S1蛋白的亲和力。
[0025]图4. MERS S1+S2 ECD&amp;氯米芬传感图
[0026]图4显示氯米芬和MERS病毒S1+S2 ECD蛋白的亲和力。
[0027]图5. OC43 S1+S2 ECD&amp;氯米芬传感图
[0028]图5显示氯米芬和OC43病毒S1+S2 ECD蛋白的亲和力。
[0029]图6. NL63 S1+S2 ECD&amp;氯米芬传感图
[0030]图6显示氯米芬和NL63病毒S1+S2 ECD蛋白的亲和力。
[0031]图7. HKU-1S1+S2 ECD&amp;氯米芬传感图
[0032]图7显示氯米芬和HKU-1病毒S1+S2 ECD蛋白的亲和力。
[0033]图8. 氯米芬抑制SARS-CoV-2假病毒的荧光成像
[0034]图8显示氯米芬抑制SARS-CoV-2假病毒的荧光成像。
[0035]图9. 氯米芬抑制SARS-CoV-2假病毒的IC
50
[0036]图9显示新型冠状病毒(SARS-CoV-2)外膜的VSV-dG-fLuc的复制缺陷型假病毒比特拉韦IC50的测定。
具体实施例
[0037]下面结合具体实验操作及数据，进一步说明本方面的技术方案。
[0038]以下通过试验说明氯米芬对各个亚型冠状病毒的抑制作用。氯米芬来源：氯米芬粉末购买于毕得医药公司,货号(BD121958)。
[0039]实施例1 AI预测结合位点
[0040]从PDB(http://www.rcsb.org/)下载了SARS-CoV-2sipke蛋白(pdb：6vw1)。除去所有异质原子和spike配体。Mpro对接网格最大化用于氯米芬对接。在虚拟筛选之前，将PDB文
件转换为PDBQT格式的大分子。网格(配体对接搜索空间)的位置如上所述。然后，用Autodock Vina 1.1.2用于后续的分子对接。使用1.7.4.5版的Pymol可以观察到蛋白质与配体的相互作用。ACE2蛋白质接近命中配体的氨基酸残基被突出显示为参与蛋白质-配体相互作用的潜在相互作用残基。结果见图1。
[0041]实验结果：
[0042]1.氯米芬与spike蛋白的结合位点是氨基酸PHE338,GLY339,PHE342,ASP364,VAL367,LEU368,SER373,PHE374和TRP436。
[0043]实施例2 冠状病毒S蛋白SPR实验
[0044]实验材料与仪器
[0045]biacore T200(GE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.氯米芬在制备预防和治疗冠状病毒感染的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒包括2019新型冠状病毒COVID-19、严重急性呼吸综合症SARS病毒、中东呼吸综合症MERS病毒、人冠状病毒 HCoV-OC43、人冠状病毒NL63、人冠状病毒229E、人冠状病毒HKU1。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒包括2019新型冠状病毒COVID-19、严重急性呼吸综合症SARS病毒、中东呼吸综合症MERS病毒。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒为2019新型冠状病毒COVID-19。5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒感染为冠状病毒肺炎或者普通感冒。6.根据权利要求1-2任一所述的应用，其特征在于：所述冠状病毒感染包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐欢，严欢，周美玲，葛琳，苏国庆，王鑫，翟丽丽，刘艳玲，伊福涛，魏敬双，朱秀良，高健，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：