柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用技术

本发明专利技术提供了柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用，属于农药技术领域。本发明专利技术提供了式I结构所示的柠檬苦素类化合物；本发明专利技术的柠檬苦素类化合物具有良好的预防作用，且其抗TMV活性与减少烟草花叶病毒外壳蛋白(TMV

【技术实现步骤摘要】
柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用


[0001]本专利技术涉及农药
，尤其涉及柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用。

技术介绍

[0002]复叶地黄连Munronia henryi Harms又名矮陀陀，小地黄连，属楝科(Meliaceae)地黄连属(Munronia)植物，约6种，产中南部、西南部及海南岛。生于海拔1000～1400米的林下湿润处，在贵州、广西、云南等地均有分布。复叶地黄连全株均可入药，用于跌打损伤，风湿性关节炎，胃痛，气胀腹痛，感冒发热，疟疾。但是，迄今为止，现有技术中未见有从复叶地黄连中提取柠檬苦素类化合物的报道。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用。本专利技术提供的柠檬苦素类化合物的抗烟草花叶病毒活性好，对，烟草花叶病毒具有良好的预防作用。
[0004]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0005]本专利技术提供了一种柠檬苦素类化合物，具有式I所示的结构：
[0006][0007]所述R1和R2独立地为
‑
OH或
‑
OAc。
[0008]优选地，所述R1为
‑
OH，R2为
‑
OAc。
[0009]优选地，所述R1为
‑
OAc，R2为
‑
OH。
[0010]本专利技术还提供了上述技术方案所述柠檬苦素类化合物的制备方法，包括以下步骤：
[0011]将乙醇水溶液和复叶地黄连全株进行回流提取，收集提取液；
[0012]对所述提取液进行浓缩，得到浸膏；
[0013]将所述浸膏重悬于水中，得到粗提液；
[0014]采用乙酸乙酯对所述粗提液进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物；
[0015]对所述乙酸乙酯萃取物通过第一梯度洗脱进行正相硅胶柱色谱分离，所述第一梯度洗脱的程序为：依次使用90vol％石油醚
‑
10vol％乙酸乙酯、70vol％石油醚
‑
30vol％乙酸乙酯、50vol％石油醚
‑
50vol％乙酸乙酯、30vol％石油醚
‑
70vol％乙酸乙酯、70vol％二氯甲烷
‑
30vol％甲醇、50vol％二氯甲烷
‑
50vol％甲醇、30vol％二氯甲烷
‑
70vol％甲醇进行洗脱，获得7个部分的洗脱液，依次命名为Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6和Fr7；
[0016]对所述Fr6通过第二梯度洗脱进行小孔树脂色谱分离，所述第二梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为30％的甲醇水溶液、体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为90％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得6个部分的洗脱液，依次命名为Fr6A、Fr6B、Fr6C、Fr6D、Fr6E和Fr6F；
[0017]对所述Fr6C通过第三梯度洗脱进行C18反相硅胶柱色谱分离，所述第三梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为60％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为80％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得5个部分的洗脱液，依次命名为Fr6C
‑
1、Fr6C
‑
2、Fr6C
‑
3、Fr6C
‑
4和Fr6C
‑
5；
[0018]采用Sephadex LH
‑
20甲醇凝胶柱层析对所述Fr6C
‑
3进行分离浓缩；每5mL收集一份层析液，合并第30～35份层析液，得到第一合并层析液；所述Sephadex LH
‑
20甲醇凝胶柱层析的条件包括：
[0019]凝胶柱尺寸：18mm
×
180mm；
[0020]洗脱液的流速为0.5mL/min；
[0021]洗脱液为无水甲醇；
[0022]洗脱液用量为：1L；
[0023]将所述第一合并层析液进行第一半制备高效液相色谱分离，采用体积分数为60％的甲醇水溶液进行洗脱，收集25.1～26.1min之间的洗脱液，所述洗脱液中含有所述R1为
‑
OAc，R2为
‑
OH的柠檬苦素类化合物；
[0024]采用Sephadex LH
‑
20甲醇凝胶柱层析对所述Fr6C
‑
2进行分离浓缩；每5mL收集一份层析液，合并第28～32份层析液，得到第二合并层析液；所述Sephadex LH
‑
20甲醇凝胶柱层析的条件包括：
[0025]凝胶柱尺寸：18mm
×
180mm；
[0026]洗脱液的流速为0.5mL/min；
[0027]洗脱液为无水甲醇；
[0028]洗脱液用量为：1L；
[0029]将所述第二合并层析液进行第二半制备高效液相色谱分离，采用体积分数为62％的甲醇水溶液进行洗脱，收集23.0～24.3min之间的洗脱液，所述洗脱液中含有所述R1为
‑
OH，R2为
‑
OAc的柠檬苦素类化合物；
[0030]所述第一半制备高效液相色谱分离和第二半制备高效液相色谱分离的条件包括：
[0031]色谱柱：Waters XSelect CSH C
‑
18column；5μm，10
×
250mm；
[0032]所述流动相的流速为2.5mL
·
min
‑1；
[0033]柱温为25℃；
[0034]进样量为每次50μL。
[0035]优选地，所述乙醇水溶液的体积分数为90％～95％。
[0036]优选地，所述乙醇水溶液与复叶地黄连全株的用量比为5L:3kg。
[0037]优选地，所述回流提取的温度为50～70℃。
[0038]本专利技术还提供了上述技术方案所述的柠檬苦素类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
[0039]本专利技术还提供了一种抗烟草花叶病毒的药物，包括有效活性组分和辅料，所述有效活性组分包括上述技术方案所述的柠檬苦素类化合物、具有式II所示结构的化合物或其药学上可接受的盐、酯或立体异构体，
[0040][0041]优选地，所述药物中有效活性组分的质量分数为0.1％～99％。
[0042]本专利技术提供了一种柠檬苦素类化合物，具有式I所示的结构：
[0043][0044]所述R1和R2独立地为
‑
OH或
‑
OAc。
[0045]本专利技术提供了式I结构所示的柠檬苦素类化合物；本专利技术的柠檬苦素类化合物具有良好的预防作用，且其抗TM本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种柠檬苦素类化合物，具有式I所示的结构：所述R1和R2独立地为
‑
OH或
‑
OAc。2.根据权利要求1所述的柠檬苦素类化合物，其特征在于，所述R1为
‑
OH，R2为
‑
OAc。3.根据权利要求1所述的柠檬苦素类化合物，其特征在于，所述R1为
‑
OAc，R2为
‑
OH。4.权利要求1～3任一项所述柠檬苦素类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将乙醇水溶液和复叶地黄连全株进行回流提取，收集提取液；对所述提取液进行浓缩，得到浸膏；将所述浸膏重悬于水中，得到粗提液；采用乙酸乙酯对所述粗提液进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物；对所述乙酸乙酯萃取物通过第一梯度洗脱进行正相硅胶柱色谱分离，所述第一梯度洗脱的程序为：依次使用90vol％石油醚
‑
10vol％乙酸乙酯、70vol％石油醚
‑
30vol％乙酸乙酯、50vol％石油醚
‑
50vol％乙酸乙酯、30vol％石油醚
‑
70vol％乙酸乙酯、70vol％二氯甲烷
‑
30vol％甲醇、50vol％二氯甲烷
‑
50vol％甲醇、30vol％二氯甲烷
‑
70vol％甲醇进行洗脱，获得7个部分的洗脱液，依次命名为Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6和Fr7；对所述Fr6通过第二梯度洗脱进行小孔树脂色谱分离，所述第二梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为30％的甲醇水溶液、体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为90％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得6个部分的洗脱液，依次命名为Fr6A、Fr6B、Fr6C、Fr6D、Fr6E和Fr6F；对所述Fr6C通过第三梯度洗脱进行C18反相硅胶柱色谱分离，所述第三梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为60％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为80％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得5个部分的洗脱液，依次命名为Fr6C
‑
1、Fr6C
‑
2、Fr6C
‑
3、Fr6C
‑
4和Fr6C
‑
5；采用Sephadex LH
‑
20甲醇凝胶柱层析对所述Fr6C
‑
3...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏英，汤磊，王丹，张雄，彭明友，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：