一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴制造技术

本发明专利技术提出了一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，包括长形胶布和圆形纱布，所述圆形纱布设置在所述长形胶布上，其中，所述圆形纱布为水解海绵贴，所述水解海绵贴上含有脐带干细胞的外泌体以及水解海绵的混合物。本发明专利技术是利用脐带间充质干细胞体外培养中，在培养上清液分泌出大量细胞因子蛋白，可以有效的缓解局部炎症反应等功能制备的细胞培养上清液，同时利用水解海绵的特性，帮助刺破外表皮层，促使培养上清液中细胞因子通过角质层顺利进入到真皮层中的一种全新的方法。进入到真皮层中的一种全新的方法。进入到真皮层中的一种全新的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴


[0001]本专利技术涉及干细胞治疗
，特别涉及一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴。

技术介绍

[0002]脐带间充质干细胞(MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，具有极强的分化潜能，可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程学方面具有广阔的临床应用价值。
[0003]经研究表明，脐带间充质干细胞具有自分泌和旁分泌功能，能够在局部分泌多种蛋白，引导细胞的迁移、分化，改善局部供血功能、消除局部炎症反应。脐带间充质干细胞分泌的活性蛋白主要涉及促细胞迁移类、受体类、促细胞分化类、调节类和血管生成等几类。这些不同种类的活性蛋白在改善修复靶器官组织功能、抗炎、抗凋亡、免疫调节等方面发挥了重要的作用，是其重要的治疗机制之一。因此采用体外无动物源，无血清培养基进行培养基扩增，可实现干细胞自身的体外生长及扩增，同时通过大量的分泌，使得干细胞培养液中含有大量的活性蛋白，可以通过浓缩回收的方法进行制备，用于缓解类似于关节炎等免疫失调症。
[0004]但是目前该技术尚未有用于传统的海绵贴上。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的旨在至少解决所述技术缺陷之一。
[0006]为此，本专利技术的一个目的在于提出一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，以解决
技术介绍
中所提到的问题，克服现有技术中存在的不足。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术一方面的实施例提供一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，包括长形胶布和圆形纱布，所述圆形纱布设置在所述长形胶布上，其特征在于，所述圆形纱布为水解海绵贴，所述水解海绵贴上含有脐带干细胞的外泌体以及水解海绵的混合物。
[0008]由上述任一方案优选的是，所述水解海绵贴的制备过程为：
[0009](1)将脐带干细胞体外培养的培养上清液液体放入到分子截留量为1K透析袋中；
[0010](2)将装有上清液的透析袋放入到盛有生理盐水的大玻璃烧杯中，4℃下进行透析操作；
[0011](3)使用磁力搅拌仪，搅拌玻璃烧杯中生理盐水，转速为300转/min，每个8小时更换一次透析液生理盐水，持续透析24小时，将杂质滤除；
[0012](4)将透析好的外泌体产物进行蛋白总量检测，达到含量为90
‑
110ug/ml，为标准产物；
[0013](5)取出100ml的总蛋白含量达到10ug/ml左右的透析好的外泌体，将50mg的水解海绵针混入到其中，充分混匀；
[0014](6)将药用纱裁制成两层，裁切成直径1CM的圆形，然后浸入到含有水解海绵针的已经透析好的干细胞培养上清液中，反复浸湿，然后取出；
[0015](7)浸湿后的纱布，37℃烘干2小时即得水解海绵贴。
[0016]由上述任一方案优选的是，所述脐带干细胞培养过程为：
[0017](1)完全培养基：采用的无动物源血清，加双抗的基础干细胞培养基；
[0018](2)制备：使用生理盐水充分洗涤脐带，并剪成小段，去除动脉和静脉，撕取华通胶至少8ml，充分剪碎后平分至4瓶已加25ml完全培养基的175cm2培养瓶中，静置培养7天，第8天根据生长情况，进行换液、传代；
[0019](3)换液：根据细胞生长情况与培养基颜色决定全量换液或半量换液。用去头移液管吸弃半量或全量旧培养基，更换移液管，于培养瓶的非细胞培养面缓慢加入等量新培养基；
[0020](4)传代：每瓶加0.25％胰酶3ml，待细胞变圆后轻拍瓶壁，每瓶加终止液10ml，吸出细胞悬液至2支50ml离心管中，各培养瓶每瓶加10ml生理盐水，吹洗汇入50ml离心管中，1200rpm，离心6min，弃上清，合并沉淀至1管，加40ml生理盐水再次离心洗涤，沉淀用10ml完全培养基重悬，经细胞筛过滤，5ml完全培养基冲洗筛网，计数，根据细胞数量铺瓶，使细胞浓度为1
‑2×
104/ml，置37℃、5％CO2培养箱中培养即得。
[0021]由上述任一方案优选的是，该海绵贴的使用方法为：
[0022](1)将水解海绵贴贴在患处，例如膝盖，手腕等处；
[0023](2)用手指轻轻来回按压外泌体水解海绵液贴，促进干细胞培养上清中的有效成分进入到患处；
[0024](3)持续按压5
‑
10分钟，促使皮肤被水解海绵刺穿，使干细胞培养上清中的有效成分充分进入到皮下组织中；
[0025](4)持续半小时后取下水解海绵贴即可。
[0026]水解海绵，又叫海绵微针，海绵骨针，矽藻骨针、水针、生物微针等，是海绵的硅质针状骨架。肉眼看为粉末状，在显微镜下实为尖杆状晶体骨针或钝状骨针。它非常小，呈粉末或凝胶状，肉眼看不到针，使用显微镜方可看到。在显微镜下密密麻麻如玻璃状的海绵骨针，它是一种相当好的杂质吸附体。不但可以破坏微生物或病毒的蛋白结构，而且本身所带的负离子电荷也可以吸附杂质或沉淀色素。极其微小的针尖扎入皮肤毛孔后，帮助激活皮肤微循环，使肌肤加速吸收水分和营养；同时缓解皮肤毛孔堵塞，加快皮肤新陈代谢，加速老化角质层的自然剥落，达到自然、安全、有效的物理换肤。其次水解海绵对表皮有一定修复作用，其再生性能强,能抗病毒、抗菌。
[0027]间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的成体干细胞,它不仅能促进损伤组织的再生与修复,还拥有良好的免疫调节能力,通过调控免疫细胞的增殖、分化和功能状态,调节炎症因子水平,对于各种炎症相关疾病具有很好的应用前景。其可以有效的释放大量的抗炎因子IL
‑
4，IL
‑
10，IL
‑
13进行相关免疫调控，因此，体外培养过程中，可大量回收培养液中的调控因子，用于治疗关节炎等炎症。
[0028]本专利技术是利用脐带间充质干细胞体外培养中，在培养上清液分泌出大量细胞因子蛋白，可以有效的缓解局部炎症反应等功能制备的细胞培养上清液，同时利用水解海绵(海绵微针)的特性，帮助刺破外表皮层，促使培养上清液中细胞因子通过角质层顺利进入到真
皮层中的一种全新的方法。
[0029]本专利技术附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0030]本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
[0031]图1为本专利技术的结构示意图。
具体实施方式
[0032]下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0033]如图1所示，本专利技术实施例的一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，包括长形胶布1和圆形纱布，所述圆形纱布设置在所述长形胶布本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，包括长形胶布和圆形纱布，所述圆形纱布设置在所述长形胶布上，其特征在于，所述圆形纱布为水解海绵贴，所述水解海绵贴上含有脐带干细胞的外泌体以及水解海绵的混合物。2.如权利要求1所述的一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，其特征在于，所述水解海绵贴的制备过程为：(1)将脐带干细胞体外培养的培养上清液液体放入到分子截留量为1K透析袋中；(2)将装有上清液的透析袋放入到盛有生理盐水的大玻璃烧杯中，4℃下进行透析操作；(3)使用磁力搅拌仪，搅拌玻璃烧杯中生理盐水，转速为300转/min，每个8小时更换一次透析液生理盐水，持续透析24小时，将杂质滤除；(4)将透析好的外泌体产物进行蛋白总量检测，达到含量为90
‑
110ug/ml，为标准产物；(5)取出100ml的总蛋白含量达到10ug/ml左右的透析好的外泌体，将50mg的水解海绵针混入到其中，充分混匀；(6)将药用纱裁制成两层，裁切成直径1CM的圆形，然后浸入到含有水解海绵针的已经透析好的干细胞培养上清液中，反复浸湿，然后取出；(7)浸湿后的纱布，37℃烘干2小时即得水解海绵贴。3.如权利要求2所述的一种新型细胞培养液缓解关节炎疼痛海绵贴，其特征在于，所述脐带干细胞培养过程为：(1)完全培养基：采用的无动物源血清，加双抗的基础干细胞培养基；(2)制备：使用生理盐水充分洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵钢，王明杰，
申请(专利权)人：河南赢闻信息科技有限公司，
类型：发明
国别省市：