一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒制造技术

本发明专利技术提出了一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，包括包被内参通用抗体A的酶标板、酶标板稳定液、细胞裂解液、生物素标记的物种特异性抗体B、HRP

【技术实现步骤摘要】
一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒


[0001]本专利技术涉及细胞种属鉴定领域，尤其涉及一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒。

技术介绍

[0002]目前进行细胞种属鉴定主要使用PCR方法，利用物种特异性引物进行鉴定，基于PCR方法又主要分为常规PCR与荧光定量PCR，二者均需要设计多对引物进行PCR，实验操作较为复杂；其中常规法需要使用具有致癌性的EB进行产物染色，荧光定量PCR需要用到荧光引物及荧光定量PCR仪，其成本较高，因此急需一种方法简单，成本较低的细胞种属鉴定试剂盒。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术提出了一种方法简单，成本较低的细胞种属鉴定的双抗夹心ELISA检测试剂盒。
[0004]本专利技术的技术方案是这样实现的：本专利技术提供了一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，包括包被内参通用抗体A的酶标板、酶标板稳定液、细胞裂解液、生物素标记的物种特异性抗体B、HRP
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链霉亲和素、PBS缓冲液、稀释液和TMB显色液。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：包括包被内参通用抗体A的酶标板、酶标板稳定液、细胞裂解液、生物素标记的物种特异性抗体B、HRP
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链霉亲和素、PBS缓冲液、稀释液和TMB显色液。2.如权利要求1所述的一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：所述内参通用抗体A制备方法：选择内参蛋白beta
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Actin或GAPDH不同物种的通用片段合成相应多肽，并偶联BSA或KLH后免疫小鼠，然后制备小鼠抗体得到内参通用抗体A，用稀释液稀释备用。3.如权利要求1所述的一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：所述酶标板的包被包括如下步骤：S1，包被，将2
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5μg/mL的内参通用抗体A溶液按照100μL/孔包被96孔酶标板，4℃过夜；S2，洗板，步骤S1包被的酶标板按照200μL/孔加入洗液，震荡洗涤5min，重复4次，吸干洗液；S3，封闭，步骤S2甩干的酶标板按照200μL/孔加入封闭液封闭，37℃孵育1h，震荡洗涤5min，重复4次，吸干洗液；S4，稳定，封闭处理后的酶标板按照200μL/孔加入酶标板稳定液，37℃孵育1h，震荡洗涤5min，重复4次，吸干洗液。4.如权利要求1所述的一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：所述生物素标记的特异性抗体B制备方法为：选择内参蛋白beta
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Actin或GAPDH不同物种的特异性片段合成相应多肽，并偶联BSA或KLH后免疫小鼠，然后制备小鼠抗体，并用生物素标记得到生物素标记的特异性抗体B，用稀释液稀释至2
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20μg/mL备用。5.如权利要求1所述的一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：所述酶标板稳定液由如下质量分数的各组分组成：0.2
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2％的海藻糖，0.01
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0.1％的聚山梨酯，0.8％氯化钠，0.1
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1％冰乙酸和0.01
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0.1％叠氮化钠，溶剂为去离子水。6.如权利要求1所述的一种基于ELISA双抗体夹心法对细胞种属鉴定的试剂盒，其特征在于：所述细胞裂解液由质量分数为0.2
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【专利技术属性】
技术研发人员：邓福林，戴琦，包春平，
申请(专利权)人：武汉尚恩生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：