一种检测降纤酶原料及其制剂的活性的方法及应用技术

本发明专利技术涉及降纤酶原料及其制剂检测技术领域，具体涉及一种利用生色底物法检测降纤酶原料及其制剂的活性的方法及应用。本发明专利技术提供的降纤酶活性的检测方法，是通过建立降纤酶标准品水解发色底物的水解产物的吸光度值与降纤酶标准品的活力值的标准曲线方程以实现对降纤酶样品活性的检测；所述的降纤酶样品包括降纤酶原料或其制剂。本发明专利技术所述的降纤酶活性的检测方法在保持较高准确性、精密度的同时还具有更简便、高效的优点，且对试验仪器要求低，具有普适性，更具有实用价值。此外，本发明专利技术所述的检测方法不受辅料影响，既适用于降纤酶原料及其制剂的活性检测，还可用于降纤酶制剂处方的筛选。的筛选。的筛选。

【技术实现步骤摘要】
一种检测降纤酶原料及其制剂的活性的方法及应用


[0001]本专利技术涉及降纤酶原料及其制剂检测
，具体涉及一种利用生色 底物法检测降纤酶原料及其制剂的活性的方法及应用。

技术介绍

[0002]蛇毒中含有丰富的蛋白质，其中半数以上是具有催化活性的酶类，其作 用分为神经毒类和出血毒类。类凝血酶就是出血毒性的一种，是目前研究最 多并在临床上应用最为成熟的蛇毒类生化药品。
[0003]而降纤酶即为蛇毒类凝血酶的一种，具有去纤、降粘、解聚、溶栓等抗 凝作用，广泛用作临床治疗和预防心脑血管性疾病。
[0004]关于降纤酶原料及制剂的效价和含量测定，现有研究提供了多种方法。
[0005]具体如下：
[0006]传统方法采用的是纤维蛋白凝固法，通过测定降纤酶在体外将纤维蛋白 原转变为纤维蛋白后生成凝块的时间来判定降纤酶的效价。该方法不但受主 观影响大，还受降纤酶辅料右旋糖苷的影响，影响降纤酶制剂的检测准确性。
[0007]胡良才等报道了精氨酸酯酶活性法，通过紫外法测定精氨酸酯酶裂解对 甲基本磺酰胺
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种降纤酶活性的检测方法，其特征在于，通过建立降纤酶标准品水解发色底物的水解产物的吸光度值与降纤酶标准品的活力值的标准曲线方程以实现对降纤酶样品活性的检测；所述降纤酶样品包括降纤酶原料或其制剂。2.根据权利要求1所述的降纤酶活性的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：降纤酶样品水解发色底物，得到含对硝基苯胺的水解产物；利用紫外分光光度仪检测水解产物的吸光度；将所得吸光度值代入标准曲线方程，计算得到降纤酶样品的活力值；所述标准曲线方程为Y＝0.0667X+0.0455，R2＝0.9991；其中X为降纤酶标准品的酶活单位(U/ml)，Y为吸光值。3.根据权利要求2所述的降纤酶活性的检测方法，其特征在于，将所述降纤酶样品配制成溶液，再与所述发色底物的工作液混合进行反应；所得降纤酶样品溶液的浓度控制在2
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12U/ml之间。4.根据权利要求3所述的降纤酶活性的检测方法，其特征在于，所述发色底物为S
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2238；所述发色底物的工作液浓度为0.2
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0.3mg/ml；所述降纤酶样品溶液与所述发色底物的工作液的反应体积比为1:(24
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26)。5.根据权利要求4所述的降纤酶活性的检测方法，其特征在于，所述发色底物的工作液浓度为0.25mg/ml，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵萌，任立新，白淑敏，张涵，
申请(专利权)人：北京赛升药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：