【技术实现步骤摘要】
获得肽的方法
[0001]本申请是申请日为2013年05月02日，申请号为201380035027.8，专利技术名称为“获得肽的方法”的申请的分案申请。
[0002]本专利技术涉及从原核细胞和/或真核细胞获得肽以用于其随后分析的方法。
[0003]这些肽的分析的确可以证明在大量应用中，特别是在生物标记物研究或细菌肽分析中有用，所述应用例如在鉴别、分型、抗性标记物和毒性标记物检测的应用框架内，并且此框架在医学、药学以及农产品领域内。
[0004]技术现状
[0005]根据现有技术提取并且纯化肽的方案通常非常冗长。此外，这些方法通常手动实施并且复杂。
[0006]国际申请WO 2006/031063描述了意图水解多肽的组合物，此水解反应通过使用称为“PCA”的溶液以化学方法获得，所述PCA包括酸(比如纯乙酸)、水易混合的有机溶剂(比如乙腈)和还原剂(比如三(2
‑
羧乙基)膦)。此化学消化在99.9℃下进行两小时。然而，可能为了增加蛋白水解的效率，WO 2006/031063任选地预先采取...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种从原核细胞和/或真核细胞获得肽的方法，所述方法包括以下步骤：a)裂解原核细胞和/或真核细胞并且回收由此获得的蛋白质，b)使用至少一种变性剂使所述蛋白质变性，c)使用至少一种烷基化剂使变性的蛋白质烷基化，d)使用至少一种蛋白水解酶将在步骤c)结束时获得的蛋白质酶促蛋白水解，e)回收在酶促蛋白水解步骤d)结束时获得的肽，其中步骤a)中所述原核细胞和/或真核细胞的裂解是在低浓度离液剂下的裂解，其中步骤a)
‑
d)同时进行，其中所述在低浓度离液剂下的裂解是通过借助于超声波探头进行的声处理的裂解，其中：
‑
所述变性剂是选自三(2
‑
羧乙基)膦和二硫苏糖醇的硫醇还原剂，并且
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所述烷基化剂是碘乙酰胺；所述方法在大气压力下进行。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)
‑
d)在相同容器中进行...
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