多肽芯片或试剂盒及其在诊断非小细胞肺癌中的应用制造技术

本发明专利技术提出了多肽芯片或试剂盒及其在鉴定非小细胞肺癌中的应用，所述芯片包括：基体，探针，所述探针设置在所述基体上，所述探针选自多肽，所述多肽的活性片段具有如SEQ ID NO：1~9任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。利用本发明专利技术的芯片能够准确诊断肺癌（尤其是非小细胞肺癌），应用前景好。应用前景好。

【技术实现步骤摘要】
多肽芯片或试剂盒及其在诊断非小细胞肺癌中的应用


[0001]本专利技术涉及医药领域。具体地，本专利技术涉及多肽芯片或试剂盒及其在鉴定非小细胞肺癌中的应用。

技术介绍

[0002]肺癌是威胁人类生命健康的重大疾病，其发病率和死亡率位居各类恶性肿瘤之首。无论在中国还是美国，肺癌都呈现出“早诊难、预后差”的状态，大大影响患者的五年生存率。肺癌患者预后较差的主要原因是术后发生复发和转移。据统计非小细胞肺癌（non
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small cell lung cancer, NSCLC）约占所有肺癌患者的85%，其中约75%的患者在确诊时已属晚期，伴随局部或远端转移，5年生存率通常低于15%。如能对肺癌患者进行早诊，对术后肺癌患者进行预后评估和监测，及早提示复发和转移的潜在威胁，将能够大大提高肺癌患者的生存率。
[0003]目前，对肺癌的诊断和评估主要依赖影像学、内镜及病理学检查，但以上方法对于肿瘤早期的检测效果有限，难以满足肺癌筛查与早期诊断的实际需要，部分检测方法不仅价格昂贵，且给患者带来较大痛苦。因此，在肿瘤早期阶段开展快速、有效的检测十分必要，不仅可以达到早发现、早治疗的目的，还可以改善患者就医体验。肿瘤标志物检测具有操作便捷、非侵入性、标本易得、价格低廉、便于动态监测等优点，因而对肿瘤筛查、早期诊断与鉴别诊断、辅助分型、预后判断及疗效监测等具有重要意义。
[0004]现有单个肺癌标志物的诊断敏感性与特异性不能满足临床需要，临检常用的化学发光或酶联免疫检测试剂盒难以实现多个标志物同步检测。因此，目前的肺癌的诊断方式仍有待研究。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题。
[0006]本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：前期，专利技术人利用重组表达cDNA血清分析（SEREX）技术筛选NSCLC患者血清得到的阳性克隆序列合成含有595条多肽的肽库，按照“多肽长度设为12个氨基酸，同一克隆内相邻多肽之间重叠9个氨基酸”的方式逐一合成到纤维素膜上，形成检测矩阵芯片。利用四组非小细胞肺癌混合血清对包含595个候选位点的纤维素膜多肽阵列进行检测，筛选出高频位点（如阳性频率≥2）对应的高频多肽27条。进一步地，利用含有这27条高频多肽的芯片分别对健康者、肺部良性疾病患者和非小细胞肺癌患者的血清进行免疫印迹反应，血清中的抗体可与多肽特异性结合，在多肽芯片上形成特异性的识别模式，通过图像模式识别分析绘制血清免疫图谱，基于该血清免疫图谱筛选出了9个多肽可以区分肺癌样本与健康样本，其中的6个多肽可以区分肺癌样本与肺部良性疾病样本，从而能够辅助诊断肺癌（尤其是非小细胞肺癌）。
[0007]在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种芯片。根据本专利技术的实施例，所述芯片包
括：基体，探针，所述探针设置在所述基体上，所述探针选自多肽，所述多肽的活性片段具有如SEQ ID NO：1~6任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。专利技术人通过血清学研究，建立了基于上述6条多肽建立的鉴别诊断模型，其在肺癌（尤其是非小细胞肺癌）与肺部良性疾病组间具有较好区分效果，诊断准确性好。
[0008]在本专利技术的另一方面，本专利技术提出了一种试剂盒。根据本专利技术的实施例，所述试剂盒包括前面所述芯片。利用根据本专利技术实施例的试剂盒可以准确诊断肺癌（尤其是非小细胞肺癌）。
[0009]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了多肽在制备芯片或试剂盒中的用途。根据本专利技术的实施例，所述芯片或试剂盒用于诊断肺癌，所述多肽的活性片段具有如SEQ ID NO：1~6任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。利用前述多肽可以准确诊断肺癌（尤其是非小细胞肺癌），应用前景好。
[0010]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种电子设备。根据本专利技术的实施例，所述电子设备包括：前面所述芯片。由此，利用根据本专利技术实施例的电子设备可以准确诊断肺癌（尤其是非小细胞肺癌）。
[0011]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0012]本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1显示了根据本专利技术一个实施例的INTAVISSPOT斑点合成检测法工作示意图；图2显示了根据本专利技术一个实施例的混合血清筛选非小细胞肺癌高频多肽候选位点示意图；图3显示了根据本专利技术一个实施例的高频多肽阵列检测训练集队列样本示意图；图4显示了根据本专利技术一个实施例的聚类分析非小细胞肺癌高频多肽诊断效能分析示意图；图5显示了根据本专利技术一个实施例的聚类分析非小细胞肺癌高频多肽鉴别诊断效能分析示意图；图6显示了根据本专利技术一个实施例的ROC曲线分析9条多肽联合诊断模型（训练集）分析示意图；图7显示了根据本专利技术一个实施例的ROC曲线分析6条多肽联合鉴别诊断模型（训练集）分析示意图；图8显示了根据本专利技术一个实施例的非小细胞肺癌特征性多肽阵列检测验证集队列样本分析示意图；图9显示了根据本专利技术一个实施例的ROC曲线分析9条多肽联合诊断模型（验证集）分析示意图；图10显示了根据本专利技术一个实施例的ROC曲线分析6条多肽联合鉴别诊断模型（验证集）分析示意图。
具体实施方式
[0013]下面详细描述本专利技术的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0014]本专利技术提出了芯片、试剂盒、多肽在制备芯片或试剂盒中的用途和电子设备，下面将分别对其进行详细描述。
[0015]芯片在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种芯片。根据本专利技术的实施例，所述芯片包括：基体，探针，所述探针设置在所述基体上，所述探针选自多肽，所述多肽的活性片段具有如SEQIDNO：1~6任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。专利技术人通过血清学研究，建立了基于上述6条多肽建立的鉴别诊断模型，其在肺癌（尤其是非小细胞肺癌）与肺部良性疾病组间具有较好区分效果，诊断准确性好。
[0016]表16条多肽鉴别诊断模型序列多肽位点氨基酸序列SEQIDNOB5HFADIVSESVDA1E3LFHPIRELSLPA2A9PWDPPQPLPADC3F1ARGSEFKREIAN4B9VEEFKSIPAKSN5C7EWELDPVKDVLI6根据本专利技术的实施例，所述多肽的活性片段具有如SEQIDNO：1~9任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。专利技术人通过血清学研究，建立了基于上述9条多肽建立的诊断模型，其在肺癌（尤其是非小细胞肺癌）与健康者间具有较好区分效果，诊断准确性好。
[0017]表29条多肽诊断模型序列多肽位点氨基酸序列SEQIDNOB5HFADIVSESVDA1E3LFHPIRELSLPA2A9PWDPPQPLPADC3F1ARGSEFKREIAN4B9VEEFKSIPA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种芯片，其特征在于，包括：基体，探针，所述探针设置在所述基体上，所述探针选自多肽，所述多肽的活性片段具有如SEQ ID NO：1~6任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。2.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于，所述多肽的活性片段具有如SEQ ID NO：1~9任一氨基酸序列或其经氨基酸残基的修饰、取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。3.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于，所述基体为纤维素。4.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1~3任一项所述芯片。5.多肽在制备芯片或试剂盒中的用途，其特征在于，所述芯片或试剂盒用于诊断肺癌，所述多肽的活性片...

【专利技术属性】
技术研发人员：岳文涛，阴赪宏，滕宇，陈琪，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京妇产医院，
类型：发明
国别省市：