康宁木霉菌及其发酵产物、含有其的组合物及应用制造技术

本发明专利技术提供一种康宁木霉菌及其发酵产物、含有其的组合物及应用。所述康宁木霉菌的ITS序列与SEQ ID NO：1所示的DNA序列具有至少99％的同源性，且能够耐受铜离子。本发明专利技术的发明专利技术人经过创造性劳动，通过大量的筛选、鉴定、评估试验，筛选出一株耐受铜离子的康宁木霉菌菌株(Trichoderma koningiopsis)Ty10，该菌株对铜例子的耐受能力高达到5.6mM。铜例子的耐受能力高达到5.6mM。铜例子的耐受能力高达到5.6mM。

【技术实现步骤摘要】
康宁木霉菌及其发酵产物、含有其的组合物及应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，特别是涉及一株康宁木霉菌及其发酵产物、 含有其的组合物及应用。

技术介绍

[0002]重金属是指比重大于5.0g/cm3的金属元素，由于自然或人为的因素在土壤中 过量沉积而造成污染。与有机污染物不同，绝大部分重金属在土壤中不能被降 解，同时会通过食物链在生物体内累积，甚至转化为更具毒性的化合物从而影 响人类的身体健康。这些重金属通过农作物的富集作用进入人体，当超过人体 的生理负荷时就会引起生理功能改变，主要有慢性中毒、致癌作用、致畸作用、 变态反应和对免疫功能的影响等。铜作为一种土壤中的重金属污染物，在所有 的生命系统中，细胞内的铜离子平衡机制是受到严格调控的，一旦受到干扰就 会导致威尔逊疾病和门克斯疾病等。铜超标在重金属突然污染中广泛存在。长 期处于重金属污染的土壤微生物种群和多样性会明显减少，不利于农作物生长。
[0003]目前，很多微生物用于农业领域，发挥着促进作物生长、防治病害、增加 产量、提升农作物品质等作用，然而这些传统的微生物菌株，对铜的耐受能力 普遍较弱，当将其应用于铜超标的环境中时，菌株难以存活，生长受到抑制， 无法将其应用到在铜超标土壤中进行农业生产的活动中去，在铜超标土壤根本 没办法发挥优势。
[0004]因此，筛选一株高耐受铜离子的菌株，应用价值重大。

技术实现思路

[0005]基于此，本专利技术的主要目的是提供一株康宁木霉菌及其发酵产物、含有其 的组合物及应用。该株康宁木霉菌能够耐受铜离子。
[0006]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0007]一株康宁木霉菌，所述康宁木霉菌的ITS序列与SEQ ID NO：1所示的DNA 序列具有至少99％的同源性，且所述康宁木霉菌能够耐受铜离子。
[0008]在其中一个实施例中，所述康宁木霉菌对弯孢霉稻瘟病菌CX3具有抑制作 用。
[0009]在其中一个实施例中，所述康宁木霉菌对镰刀菌具有抑制作用。
[0010]在其中一个实施例中，所述康宁木霉菌的保藏号为：CCTCC M 2017146。
[0011]如上所述的康宁木霉菌的发酵产物。
[0012]一种组合物，包含有如上所述的康宁木霉菌，和/或，如上所述的发酵产物， 所述组合物还包含有以下a)、b)组分中的至少一种：
[0013]a)作为菌剂成分的助剂和/或载体；
[0014]b)农业有效量的选自以下的化合物或者组合物中的至少一种：营养素、肥 料、杀螨剂、杀细菌剂、杀真菌剂、杀昆虫剂、杀微生物剂、杀线虫剂以及杀 虫剂；
[0015]其中b)组分中不含有所述康宁木霉菌且不含有所述发酵产物。
[0016]一种培养如上所述的康宁木霉菌的方法。
[0017]在其中一个实施例中，培养所使用的培养基的碳源是葡萄糖。
[0018]在其中一个实施例中，培养所使用培养基的氮源为酪蛋白。
[0019]在其中一个实施例中，培养所使用的培养基的pH为6.3～6.7。
[0020]在其中一个实施例中，培养所使用的培养温度为27.5℃～28.5℃。
[0021]一种在铜含量超标的土壤中种植作物的方法，所述方法包括如下步骤：
[0022]土壤前处理：将有效剂量的如上所述的康宁木霉菌，或如上所述的发酵产 物，或如上所述的组合物施用于铜含量超标的土壤；
[0023]作物种植：将作物种植于经所述前处理的土壤中。
[0024]本专利技术的专利技术人经过创造性劳动，通过大量的筛选、鉴定、评估试验，筛 选出一株耐受铜离子的康宁木霉菌菌株Ty10(Trichoderma konigii Ty10)，该菌 株对铜例子的耐受能力高达到5.6mM。
[0025]本专利技术耐受铜离子的康宁木霉菌Ty10(Trichoderma konigii Ty10)，已于2017 年3月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址武汉市武昌珞珈山，武汉大学， 邮编：430072，保藏号为CCTCC NO:M 2017146。
附图说明
[0026]图1为耐铜离子菌株的平板复筛结果图；
[0027]图2为菌株Ty10
‑
2在不同铜离子浓度平板中的生长情况；
[0028]图3为菌株Ty10
‑
2的致死铜离子浓度的线性回归，其中：横坐标“copper concentration”表示“铜浓度”；纵坐标“colony diameter”表示“菌落直径”；
[0029]图4为A为菌株Ty10
‑
2在平板上的生长状况；B为菌株Ty10
‑
2菌丝图；C 为菌株Ty10
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2分生孢子梗；D为菌株Ty10
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2孢子(注：图中标尺均为10μm)；
[0030]图5为A为菌株DNA的电泳图；B为菌株PCR的电泳图；
[0031]图6为耐铜菌株Ty10
‑
2的系统发育树。
[0032]图7为Ty10发酵液对植物病原菌的抑制效果；A为对照；B为对弯孢霉CX3的抑制；C为对照；D为对镰刀菌的抑制。
具体实施方式
[0033]以下结合具体实施例对本专利技术的康宁木霉菌株及其应用作进一步详细的说 明。
[0034]本专利技术实施例一株康宁木霉菌，所述康宁木霉菌的ITS序列与SEQ ID NO： 1所示的DNA序列具有至少99％的同源性，且所述康宁木霉菌能够耐受铜离子。
[0035]在一个具体示例中，所述康宁木霉菌对弯孢霉稻瘟病菌CX3具有抑制作用。
[0036]在一个具体示例中，所述康宁木霉菌对镰刀菌具有抑制作用。
[0037]在一个具体示例中，所述康宁木霉菌的保藏号为：CCTCC M 2017146。
[0038]如上所述的康宁木霉菌的发酵产物。该发酵产物包括菌丝、孢子等，该发 酵产物能够耐受铜离子，并且对弯孢霉稻瘟病菌CX3、镰刀菌具有抑制作用。
[0039]一种组合物，包含有如上所述的康宁木霉菌，和/或如上所述的发酵产物， 所述组合物还包含有以下a)、b)组分中的至少一种：
[0040]a)作为菌剂成分的助剂和/或载体；
[0041]b)农业有效量的选自以下的化合物或者组合物中的至少一种：营养素、肥 料、杀螨剂、杀细菌剂、杀真菌剂、杀昆虫剂、杀微生物剂、杀线虫剂以及杀 虫剂；
[0042]其中b)组分中不含有所述康宁木霉菌以及所述发酵产物。
[0043]一种培养如上所述的康宁木霉菌的方法。
[0044]在一个具体示例中，培养所使用的培养基的碳源是葡萄糖。
[0045]在一个具体示例中，培养所使用培养基的氮源为酪蛋白。
[0046]在一个具体示例中，培养所使用的培养基的pH为6.3～6.7。
[0047]在一个具体示例中，培养所使用的培养温度为27.5℃～28.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株康宁木霉菌，其特征在于，所述康宁木霉菌的ITS序列与SEQ ID NO：1所示的DNA序列具有至少99％的同源性，且所述康宁木霉菌能够耐受铜离子。2.根据权利要求1所述的康宁木霉菌，其特征在于，所述康宁木霉菌对弯孢霉稻瘟病菌CX3具有抑制作用。3.根据权利要求1所述的康宁木霉菌，其特征在于，所述康宁木霉菌对镰刀菌具有抑制作用。4.根据权利要求1至3任一项所述的康宁木霉菌，其特征在于，所述康宁木霉菌的保藏号为：CCTCC M 2017146。5.权利要求1至4任一项所述的康宁木霉菌的发酵产物。6.一种组合物，其特征在于，包含有权利要求1至4任一项所述的康宁木霉菌和/或权利要求5所述的发酵产物，所述组合物还包含有以下a)、b)组分中的至少一种：a)作为菌剂成分的助剂和/或载体；b)农业有效量的选自以下的化合物或者组合物中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书一二页序列表一页附图五页，
申请(专利权)人：南昌师范学院，
类型：发明
国别省市：