一种脐带间充质干细胞原代培养方法技术

本发明专利技术公开了一种脐带间充质干细胞原代培养方法，其特征在于：在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到85％，吸掉原有培养基，加入PBS溶液清洗一次，加入Xeno

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞原代培养方法


[0001]本专利技术涉及干细胞
，具体为一种脐带间充质干细胞原代培养方法。

技术介绍

[0002]简单来讲，干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞、能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞，多年来对干细胞的定义不断进行修正，并从不同的层面上来进行定义，目前大多数生物学家和医学家认为干细胞是来自于胚胎、胎儿或成人体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞，同时还能分化为祖细胞。目前在干细胞培养后置于培养液中后，常常需要进行运输转移到不同的研究所进行观察并记录实验研究结果报告，但是目前在对其进行长途转运运输中，细胞原代培养的时间较长，并且由于部分干细胞培养液需要置于一定的低温环境下保存，导致在运输中，外界较热的天气逐渐影响保存箱内的温度，从而导致其内部培养无法正常进行，破坏了其原有的研究价值。

技术实现思路

[0003]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞原代培养方法，其特征在于：在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到85％，吸掉原有培养基，加入PBS溶液清洗一次，加入Xeno
‑
Free细胞消化液使之完全覆盖瓶底，室温孵育5
‑
6分钟或37.3℃孵育3
‑
4分钟，加入消化液1.8倍体积的脐带间充质充质干细胞培养基，用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散，加入脐带间充质干细胞培养基：氨甲环酸：9600mg/L；G
‑
CSF：22ng/L；EGF：18ng/mL；DMEM/F12培养基：补充足；或者，脐带间充质干细胞培养基：氨甲环酸：9700mg/L；H
‑
CSF：24ng/L；EGF：12ng/mL；DMEM/F12培养基：补充足；接着剥离脐带外膜、静脉和动脉，获取华通氏胶，并将华通氏胶充分剪碎，剪碎华通氏胶至1.3～2.6mm3，置于37.3℃，5％CO2的箱体(2)中进行恒温培养，将箱体(2)装入运输车中进行运输到指定地点，并在运输中持续培养。2.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞原代培养方法，其特征在于：所述箱体(2)两侧螺纹连接有顶盖(1)，所述箱体(2)内部设置有温度自动恒定机构(3)；所述温度自动恒定机构(3)包括导热块(301)、连通孔A(302)、连通孔B(303)、滑板(304)、空槽(305)，所述箱体(2)内壁底部开设有凹槽，所述导热块(301)外壁与凹槽内壁固定连接，所述连通孔A(302)内部与凹槽内部连通，所述连通孔A(302)内部与连通孔B(303)内部连通，所述连通孔B(303)开设在箱体(2)内部，所述箱体(2)内部开设有滑槽，所述滑板(304)外壁与滑槽内壁滑动连接，所述空槽(305)开设在箱体(2)内部，所述箱体(2)内部设置有开合抖落机构(4)与警报机构(5)。3.根据权利要求2所述的一种脐带间充质干细胞原代培养方法，其特征在于：所述开合抖落机构(4)包括弧形板(401)、重块(402)、推板(403)、弹性板(404)、小气槽(405)、喷气槽(406)、小弹性板(407)、升降块(408)、开合板(409)，所述箱体(2)内部开设有弧形槽，所述弧形板(401)外壁与弧形槽内壁滑动连接，所述弧形板(401)底部与重块(402)顶部固定连接，所述推板(403)外壁与弧形槽内壁滑动连接，所述推板(403)外...

【专利技术属性】
技术研发人员：余鹏程，刘洋，刘世勇，黎北泽，皇甫改奎，
申请(专利权)人：云南和泽西南生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：