一种脐带间充质干细胞的制备方法技术

本申请公开了一种脐带间充质干细胞的制备方法。本申请的制备方法包括将华通氏胶剪成不大于2mm3的组织块，采用浓度大于或等于1％的胶原酶在37℃～39℃下进行30

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞的制备方法


[0001]本申请涉及脐带间充质干细胞制备
，特别是涉及一种脐带间充质干细胞的制备方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(mesenchymal stromal cells，MSC)目前广泛应用于再生医学的诸多领域。MSC具有自我更新能力，增殖活跃；能分化为成骨细胞、脂肪细胞等多种细胞。此外，MSC还能分泌多种可溶性的生物活性物质，例如细胞因子和生长因子等，发挥抗炎症、促血管新生、抗凋亡和免疫调节等作用。
[0003]获得MSC的来源多样，但与骨髓和脂肪组织等相对成熟的组织相比，出生时的胚胎外组织，例如脐带和胎盘的不同部位等，具有更好的前景。这些胚胎外组织易于采集，且量大，不存在伦理问题。
[0004]脐带间充质干细胞，就是从脐带组织分离培养获得的间充质干细胞。21世纪以来，出现了大批从脐带组织分离培养MSC的方法。一些方法使用胶原酶和/或透明质酸酶、胰酶及中性蛋白酶等处理脐带的不同部位。酶的处理时间各异，有的长达16小时。此外，组织块培养法也广泛应用于脐带MSC的原代培养。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于：包括将获取自脐带的华通氏胶剪成不大于2mm3的组织块，采用浓度大于或等于1％的胶原酶在37℃～39℃下对华通氏胶组织块进行30
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60分钟的消化，分别对消化获得的悬浮液和消化后组织块进行间充质干细胞培养，获得所述脐带间充质干细胞。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述华通氏胶采用以下方法获得，取离体的脐带，在无菌条件下去除静脉和动脉，剥离脐带外膜，即获得所述华通氏胶。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述胶原酶为II型胶原酶或IV型胶原酶。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述胶原酶采用Hanks缓冲液制备。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述分别对消化获得的悬浮液和消化后组织块进行间充质干细胞培养，具体包括，消化完成后，采用缓冲液进行清洗，离心去上清液，再采用缓冲液重悬；采用网筛过滤分离缓冲液重悬的细胞悬...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖扬，李翠红，欧阳苏婷，苏畅，冯莹，
申请(专利权)人：广州知力医学诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：