GH11家族木聚糖酶基因及其克隆表达及苎麻脱胶应用制造技术

本发明专利技术涉及GH11家族木聚糖酶基因及其克隆表达及苎麻脱胶应用，属于基因工程领域。本发明专利技术公开了一种土曲霉来源的两个GH11家族木聚糖酶基因的克隆、表达及应用。本发明专利技术首次从土曲霉的基因组挖掘到了两个GH11家族木聚糖酶基因，并进行异源表达和进行理化性质分析。本发明专利技术中的木聚糖酶催化效率高，pH耐受性较好，能够适应的酸碱范围较广，热稳定性较好，并且对金属离子适应性较强、无明显抑制作用的离子，对大部分溶剂耐受性较好。利用苎麻切片进行催化实验验证，发现其能有效降解苎麻木聚糖组分。综上，这两个酶对苎麻木聚糖组分降解效果较好，且对pH、温度、金属离子及溶剂的耐受性均符合苎麻脱胶需求，能较好的应用于工业生产。产。产。

【技术实现步骤摘要】
GH11家族木聚糖酶基因及其克隆表达及苎麻脱胶应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，更具体地，涉及GH11家族木聚糖酶基因及其克隆表达及苎麻脱胶应用，尤其涉及两个木聚糖酶基因的克隆表达、纯化及苎麻脱胶应用。

技术介绍

[0002]半纤维素几乎占地球上所有可再生有机物的三分之一，是仅次于纤维素的最丰富的生物聚合物群，木聚糖是一种广泛存在于植物细胞壁中的半纤维素，约占比20
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30％，是由β
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1,4
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糖苷键连接而成的木糖聚合物，其侧链可被乙酰基、半乳糖醛酸、阿拉伯糖等侧基取代。
[0003]木聚糖酶可将木聚糖分子水解为木糖或木寡糖等低聚木糖，大部分木聚糖酶家族归于GH10和GH11家族，GH10家族木聚糖三维结构显示为(a/β)8桶状折叠，在中心部位是由8个平行且相邻的β折叠并排排列组成的圆柱体，它们表现出多用途底物特异性，因为它们通常能够水解低分子量纤维素底物。GH11家族三维结构成“右手半握型”的形状，主要由β
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折叠组成，对纤维素没有水解活性。目前真菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种GH11家族木聚糖酶基因，其特征在于，所述基因的碱基序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。2.一种GH11家族木聚糖酶，其特征在于，所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。3.一种重组载体，其特征在于，将权利要求1所述的木聚糖酶基因插入到表达载体的限制性酶切位点中，使所述木聚糖酶基因的核苷酸序列与表达载体的表达调控序列相连接，得到重组载体。4.一种重组菌株，其特征在于，将权利要求3所述的重组载体转化进宿主细胞，获得重组菌株。5.如权利要求1所述木聚糖酶基因的克隆方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)从土曲霉菌丝体中提取RNA，然后进行逆转录，得到土曲霉cDNA；(2)合成引物xyl
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1F、xyl
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1R、xyl
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2F和xyl
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2R，所述引物xyl
‑
1F、xyl
‑
1R、xyl
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2F和xyl
‑
2R的碱基序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；以步骤(1)得到的土曲霉cDNA为模板，以引物xyl<...

【专利技术属性】
技术研发人员：余龙江，吴亚，舒潼，李攀登，王慧慧，向梦雄，李雁蓉，侯梓淇，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：