一种PLGF单克隆抗体、试剂盒、其制备方法和应用技术

你本发明专利技术适用于生物技术领域，提供了一种PLGF单克隆抗体、试剂盒、其制备方法和应用。PLGF单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；PLGF单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列。本发明专利技术的PLGF单克隆抗体，具有较高的亲和力，特异性强；本发明专利技术的检测试剂盒可作为胎盘功能不全的独立评估因子，还可以子痫前期进行预测、鉴别和治疗监测。鉴别和治疗监测。鉴别和治疗监测。

【技术实现步骤摘要】
ID NO.4所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、 SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列经替换、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基形成的具有同等功能的氨基酸序列。
[0011]作为本专利技术实施例的另一种优选方案，PLGF单克隆抗体的轻链高变区 CDR
‑
L1、轻链高变区CDR
‑
L2、轻链高变区CDR
‑
L3氨基酸序列分别为SEQ ID NO.6、 SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQID NO.8所示的氨基酸序列经替换、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基形成的具有同等功能的氨基酸序列。
[0012]本专利技术实施例的另一目的在于提供一种如所述的PLGF单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：
[0013]一、PLGF蛋白抗原的制备；
[0014]二、PLGF多克隆抗体的制备；
[0015]三、PLGF单克隆抗体的制备；
[0016]四、单克隆抗体筛选：建立剂量反应曲线，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PLGF单克隆抗体，其特征在于，PLGF单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；PLGF单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的PLGF单克隆抗体，其特征在于，PLGF单克隆抗体的重链高变区CDR
‑
H1、重链高变区CDR
‑
H2、重链高变区CDR
‑
H3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的PLGF单克隆抗体，其特征在于，PLGF单克隆抗体的轻链高变区CDR
‑
L1、轻链高变区CDR
‑
L2、轻链高变区CDR
‑
L3氨基酸序列分别为SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。4.一种如权利要求1～3任一所述的PLGF单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：一、PLGF蛋白抗原的制备；二、PLGF多克隆抗体的制备；三、PLGF单克隆抗体的制备；四、单克隆抗体筛选：建立剂量反应曲线，筛选最优单克隆抗体；五、杂交瘤中单克隆抗体基因的调取：提取杂交瘤细胞的总RNA；以OligodT为引物，逆转录合成得到cDNA；以合成cDNA为模板，进行PCR扩增；获取编码重链可变区基因序列和编码轻链可变区基因序列；重链可变区基因序列和编码轻链可变区基因序列和抗体的恒定区进行密码子优化并合成，分别获得完整抗体基因的重链和轻链；将获得的重链和轻链基因分别克隆到pMD18
‑
T表达载体中；将获得的质粒转染感受态细胞中；收集细胞上清液，纯化、浓缩...

【专利技术属性】
技术研发人员：张陆明，
申请(专利权)人：江苏普若维生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：