一种同时检测TSWV、TZSV、PCSV、INSV四种病毒的多重RT-PCR方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种同时检测TSWV、TZSV、PCSV、INSV四种病毒的多重RT

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测TSWV、TZSV、PCSV、INSV四种病毒的多重RT
‑
PCR方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉分子植物病毒学病毒检测
，具体涉及一种同时检测烟草中四种番茄斑萎病毒属病毒的RT
‑
PCR引物组及其检测方法。

技术介绍

[0002]由蓟马传播的番茄斑萎病毒属病毒(Tospoviruses)引起的烟草斑萎病，是近年来出现的烟草新病害。2007年以前，该病害在云南省零星发生，之后逐年加重，至2010前后开始在云南昆明、红河、文山烟区暴发流行，发病率通常在10
‑
30％，严重的烟区发病率在90％以上，给当地烟叶生产造成巨大损失，部分重病烟田绝收。近年来，随着西花蓟马在全国范围内的扩散和气候变暖等因素，烟草斑萎病逐渐在其他烟区发生和流行，目前除云南外，还在四川、广西、甘肃、山东、黑龙江等烟叶产区发生。
[0003]根据近年的调查结果，团棵期以前的烤烟最易感染烟草斑萎病，显症高峰期主要集中在团课末期和旺长初期，在采烤期也能观察到斑萎病，但发病率低。烟草生长早期被感染后，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测TSWV、TZSV、PCSV、INSV四种病毒的多重RT
‑
PCR方法，其特征在于，所述的方法包括以下四组引物：PCSV
‑
muF：5'
‑
GTTCGTTTTCTGCGGTAAGCAAA
‑
3'；PCSV
‑
muR：5
‑
AGCAACATCATAATTGGGAGG
‑
3'；INSV
‑
muF：5
‑
GAACATGACTACTGCATCTTG
‑
3'；INSV
‑
muR：5
‑
TAGACATGTCAATTCCAAGC
‑
3'；TSWV
‑
muF：5
‑
GATGAGTGTTATTTCATGTCTGAC
‑
3'；TSWV
‑
muR：5
‑
CAAGCTATCAAGCCTTCTGAAG
‑
3'；TZSV
‑
muF：5
‑
CAAGAACTATTGGCTGGAG
‑
3'；TZSV
‑
muR：5
‑
GCTGCTCTTCTTCTTTGGTGCCTG
‑
3'。2.根据权利要求1所述的多重RT
‑
PCR方法，其特征在于，所述的方法中PCR反应体系共30ul，其中2xPCRmix 15ul，cDNA模板1.5ul，TSWV
‑
muF/TSWV
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜宁，盖晓彤，卢灿华，夏振远，马俊红，雷丽萍，莫笑晗，郑洋，段南翔，余彦，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：