一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，采用硅胶键合的填料进行分离，较传统分离材料具有非常大的创新性，该分离周期在1h内即可实现分离，再生比较容易。分离采用的溶剂基本是纯水，成本低，环保压力小；分离选择性好，最高纯度可以达到99.9％。填料价格接近常规反相分离材料,使用次数初步估计在数百次，该分离工艺具有非常好的实用性，非常适合工业生产。工业生产。工业生产。

【技术实现步骤摘要】
一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法


[0001]本专利技术属于核酸分离提纯领域，具体涉及一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法。

技术介绍

[0002]核酸的分离目前分离主要有离子交换和凝胶分离，离子交换分离价格实惠，适合工业生产，但分离周期一般在48
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100小时，分离周期长效率低，溶剂用量大，馏分浓度低，后处理比较麻烦；凝胶色谱分离，分离周期短，但填料填料一般价格昂贵，一次投入非常大，填料货期长且不受控。

技术实现思路

[0003]为解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，按照先后顺序包括以下步骤：
[0004](1)将硅胶键合的填料填装在不锈钢柱或聚四氟乙烯塑料材质的分离装置内；
[0005](2)对核酸样品进行色谱分离或层析分离，再进行检测即可。
[0006]优选的是，所述硅胶键合的填料为含有极性基团的烃类化合物修饰的球形硅胶材料。
[0007]在上述任一方案中优选的是，硅胶键合的填料的极性基团可以但不局限于氨基，酯基，羰基，酰胺基，羧基，碳酸酯基，氨基碳酸脂。
[0008]在上述任一方案中优选的是，硅胶键合的填料的烃类可以是但不局限于辛烷基，十二烷基，十八烷基。
[0009]在上述任一方案中优选的是，步骤(1)中，选用的分离装置为色谱分离装置或一个简单的柱形容器，柱子上下端分别有孔径小于填料粒径的筛板。
[0010]在上述任一方案中优选的是，步骤(2)中，分离采用以水为主的溶液进行洗脱。
[0011]在上述任一方案中优选的是，步骤(2)中，该分离的流动相或淋洗剂、色谱柱或层析柱等部分需要进行温度控制，温度范围为1℃至30℃。
[0012]在上述任一方案中优选的是，步骤(2)中，核酸样品为含有1、2或3个脱氧核苷结合2个或3个磷酸的化合物。
[0013]在上述任一方案中优选的是，硅胶键合的填料粒径为5微米至50微米的球形或不定形材料，硅胶键合的填料孔径为60埃至200埃。
[0014]在上述任一方案中优选的是，步骤(2)中，使用的洗脱液为纯水或含有少量水溶性的酸、碱、盐，或可以溶于水的有机溶剂。
[0015]本专利技术采用硅胶键合的填料进行分离，较传统分离材料具有非常大的创新性，该分离周期在1h内即可实现分离，再生比较容易，分离采用的溶剂基本是纯水，成本低，环保压力小，分离选择性好，最高纯度可以达到99.9％。填料价格接近常规反相分离材料,使用次数初步估计在数百次，该分离工艺具有非常好的实用性，非常适合工业生产。
附图说明
[0016]图1为分离核酸制备谱图；
[0017]图2为图1组分的分析图谱。
具体实施方式
[0018]为了更进一步了解本专利技术的
技术实现思路
，下面将结合具体实施例详细阐述本专利技术。
[0019]实施例一
[0020]本专利技术提供一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，按照先后顺序包括以下步骤：
[0021](1)将硅胶键合的填料填装在不锈钢柱内；
[0022](2)对核酸样品进行色谱分离或层析分离，再进行检测即可。
[0023]其中，所述硅胶键合的填料为含有极性基团的烃类化合物修饰的球形硅胶材料，硅胶键合的填料的极性基团为氨基，硅胶键合的填料的烃类为辛烷基，步骤(1)中，选用的分离装置为色谱分离装置或一个简单的柱形容器，柱子上下端分别有孔径小于填料粒径的筛板，步骤(2)中，分离采用以水为主的溶液进行洗脱，步骤(2)中，该分离的流动相或淋洗剂、色谱柱或层析柱等部分需要进行温度控制，温度为1℃，步骤(2)中，核酸样品为含有1个脱氧核苷结合2个磷酸的化合物，硅胶键合的填料粒径为5微米至的球形或不定形材料，硅胶键合的填料孔径为60埃，步骤(2)中，使用的洗脱液为纯水。
[0024]本专利技术采用硅胶键合的填料进行分离，较传统分离材料具有非常大的创新性，该分离周期在1h内即可实现分离，再生比较容易，分离采用的溶剂基本是纯水，成本低，环保压力小，分离选择性好，最高纯度可以达到99.9％。填料价格接近常规反相分离材料,使用次数初步估计在数百次，该分离工艺具有非常好的实用性，非常适合工业生产。
[0025]实施例二
[0026]本专利技术提供一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，按照先后顺序包括以下步骤：
[0027](1)将硅胶键合的填料填装在不锈钢柱内；
[0028](2)对核酸样品进行色谱分离或层析分离，再进行检测即可。
[0029]其中，所述硅胶键合的填料为含有极性基团的烃类化合物修饰的球形硅胶材料，硅胶键合的填料的极性基团为酯基，硅胶键合的填料的烃类为十二烷基，步骤(1)中，选用的分离装置为色谱分离装置或一个简单的柱形容器，柱子上下端分别有孔径小于填料粒径的筛板，步骤(2)中，分离采用以水为主的溶液进行洗脱，步骤(2)中，该分离的流动相或淋洗剂、色谱柱或层析柱等部分需要进行温度控制，温度为5℃，步骤(2)中，核酸样品为含有2脱氧核苷结合2个磷酸的化合物，硅胶键合的填料粒径为10微米的球形或不定形材料，硅胶键合的填料孔径为80埃，步骤(2)中，使用的洗脱液为纯水。
[0030]本专利技术采用硅胶键合的填料进行分离，较传统分离材料具有非常大的创新性，该分离周期在1h内即可实现分离，再生比较容易，分离采用的溶剂基本是纯水，成本低，环保压力小，分离选择性好，最高纯度可以达到99.9％。填料价格接近常规反相分离材料,使用次数初步估计在数百次，该分离工艺具有非常好的实用性，非常适合工业生产。
[0031]实施例三
[0032]本专利技术提供一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，按照先后顺序包括以下步骤：
[0033](1)将硅胶键合的填料填装在不锈钢柱内；
[0034](2)对核酸样品进行色谱分离或层析分离，再进行检测即可。
[0035]其中，所述硅胶键合的填料为含有极性基团的烃类化合物修饰的球形硅胶材料，硅胶键合的填料的极性基团为羧基，硅胶键合的填料的烃类为十八烷基，步骤(1)中，选用的分离装置为色谱分离装置或一个简单的柱形容器，柱子上下端分别有孔径小于填料粒径的筛板，步骤(2)中，分离采用以水为主的溶液进行洗脱，步骤(2)中，该分离的流动相或淋洗剂、色谱柱或层析柱等部分需要进行温度控制，温度为10℃，步骤(2)中，核酸样品为含有3个脱氧核苷结合2个磷酸的化合物，硅胶键合的填料粒径为10微米的球形或不定形材料，硅胶键合的填料孔径为100埃，步骤(2)中，使用的洗脱液为纯水。
[0036]本专利技术采用硅胶键合的填料进行分离，较传统分离材料具有非常大的创新性，该分离周期在1h内即可实现分离，再生比较容易，分离采用的溶剂基本是纯水，成本低，环保压力小，分离选择性好，最高纯度可以达到99.9％。填料价格接近常规反相分离材料,使用次数初步估计在数百次，该分离工艺具有非常好的实用性，非常适合工业生产。
[0037]实施例四
[0038]本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，按照先后顺序包括以下步骤：(1)将硅胶键合的填料填装在不锈钢柱或聚四氟乙烯塑料材质的分离装置内；(2)对核酸样品进行色谱分离或层析分离，再进行检测即可。2.根据权利要求1所述的一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，其特征在于，所述硅胶键合的填料为含有极性基团的烃类化合物修饰的球形硅胶材料。3.根据权利要求2所述的一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，其特征在于，硅胶键合的填料的极性基团可以但不局限于氨基，酯基，羰基，酰胺基，羧基，碳酸酯基，氨基碳酸脂。4.根据权利要求2所述的一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，其特征在于，硅胶键合的填料的烃类可以是但不局限于辛烷基，十二烷基，十八烷基。5.根据权利要求1所述的一种采用硅胶键合基质分离核酸的方法，其特征在于，步骤(1)中，选用的分离装置为色谱分离装置或一个简单的柱形容器，柱子上下端分别有孔径小于填...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪宇，张慧君，汪群杰，
申请(专利权)人：天津中科博蕴生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：