【技术实现步骤摘要】
一种多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法及其应用
[0001]本专利技术涉及医药,特别是一种多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法及其应用。
技术介绍
[0002]恶性肿瘤已经成为当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。根据世界卫生组织的统计数据(2019年3月),2018年,全球范围内,有1810万癌症新发病例和960万癌症死亡病例。在我国,2015年恶性肿瘤发病约392.9万人,死亡约233.8万人。与历史数据相比,癌症负担呈持续上升态势,每年恶性肿瘤所致的医疗花费超过2200亿。近10多年来,恶性肿瘤发病率每年保持约3.9%的增幅,死亡率每年保持2.5%的增幅。癌症带来的经济负担和对社会发展的不良影响日益突显。目前临床上广泛使用的合成的抗癌药物普遍存在着毒副作用如脱发、贫血和胃肠不适等现象。因此加强抗癌治疗的研究,延长患者的生存期,改善患者的生活质量是药学工作者的当务之急。中草药在抗肿瘤方面的应用历史悠久,从中草药中寻找高效低毒的抗肿瘤活性物质,研制选择性强、毒副作用低的新型抗肿瘤药物是药学科研工作者迫切解决的首要问题。
[0003]亚乎奴为防己科植物锡生藤属植物锡生藤(Cissampelos pareira L.var.hirsuta)的干燥全株,是傣族习用药材。主要分布在热带及亚热带地区、中南美洲、非洲东部、印度、东南亚地区,我国广西、贵州、云南等地也有分布。现代研究表明亚乎奴中的化学成分主要有生物碱类、黄酮类、有机酸类、萜类、甾醇类、鞣质和少量糖类等,具有解热、镇痛、抗炎、抗癌症、抗氧
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法,其特征在于,所述的亚乎奴甾G是从亚乎奴药材中制备得到,分子结构式为:亚乎奴甾G(cissasteroidG);制备方法是:以亚乎奴莲药材30.5~50.7kg为原料,以2~5倍原料重量体积、体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,重量体积是指固体以kg计,液体L计,提取温度为92~95℃,每次提取时间为1~1.5小时,减压回收乙醇,得浸膏状的乙醇提取物,乙醇提取物混悬于4.8~9L的蒸馏水中,依次以石油醚、二氯甲烷、正丁醇萃取3次,每次4.8~9L,时间为3~5小时,回收溶剂,得到石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位;将二氯甲烷萃取部位经硅胶柱色谱分离,依次用体积比为100︰0、100︰1、100︰3、100︰5、100︰10、100︰30、100︰50、1︰1、1︰2的石油醚
‑
丙酮混合溶剂进行梯度洗脱,每一梯度用6.7~9.3L洗脱液,流速为10~15mL/min,每670~930mL体积为一流份,收集90个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,分别以体积比1︰1的石油醚
‑
丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份1~30、流份31~50、流份51~60、流份61~70、流份71~90,得到组份Fr.1~Fr.5;组份Fr.4经MCI柱色谱,经体积比甲醇
‑
水溶液10︰90、30︰70、40︰60、70︰30、80︰20梯度洗脱,每一梯度用300~500mL洗脱液,流速为20~35mL/h,每一洗脱梯度为一流份,收集5个亚组份Fr.4
‑
1、Fr.4
‑
2、Fr.4
‑
3、Fr.4
‑
4、Fr.4
‑
5;亚组份Fr.4
‑
4经硅胶柱色谱分离,依次用体积比为10︰1、8︰1、5︰1、3︰1、2︰1、1︰1、1︰2的石油醚
‑
乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱,每一梯度用24mL~40mL洗脱液,流速为2~5mL/min,每24~40mL体积为一流份,收集7个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,分别以体积比1︰1的石油醚
‑
丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份1~2、流份3、流份4、流份5~7,得到组份Fr.4
‑4‑
1~Fr.4
‑4‑
4;将组份Fr.4
‑4‑
4经Sephadex LH
‑
20凝胶柱色谱,甲醇洗脱,流速为10~15mL/h,每10~17mL为一流份、收集20个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,以体积比7︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份3~5、流份6~17、流份18~20,得到3个亚组份Fr.4
‑4‑4‑
1、Fr.4
‑4‑4‑
2、Fr.4
‑4‑4‑
3;将亚组份Fr.4
‑4‑4‑
2经制备型高效液相色谱纯化,以体积比为60︰40的乙腈
‑
水混合溶剂洗脱,色谱柱为YMC
‑
Pack ODS
‑
A,流速为6mL/min,收集保留时间为48min的色谱峰,回收溶剂,即得亚乎奴甾G。2.根据权利要求1所述的多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法,其特征在于,以亚乎奴莲药材50.7kg为原料,以180L、体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为95℃,每次提取时间为1.5小时,减压回收乙醇,得浸膏状的乙醇提取物,乙醇提取物混悬
于9L的蒸馏水中,依次以石油醚、二氯甲烷、正丁醇萃取3次,每次9L,时间为5小时,回收溶剂,得到石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位;将二氯甲烷萃取部位经硅胶柱色谱分离,依次用体积比为100︰0、100︰1、100︰3、100︰5、100︰10、100︰30、100︰50、1︰1、1︰2的石油醚
‑
丙酮混合溶剂进行梯度洗脱,每一梯度用9.3L洗脱液,流速为15mL/min,每930mL体积为一流份,收集90个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,分别以体积比1︰1的石油醚
‑
丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份1~30、流份31~50、流份51~60、流份61~70、流份71~90,得到组份Fr.1~Fr.5;组份Fr.4经MCI柱色谱,经体积比甲醇
‑
水溶液10︰90、30︰70、40︰60、70︰30、80︰20梯度洗脱,每一梯度用500mL洗脱液,流速为35mL/h,每一洗脱梯度为一流份,收集5个亚组份Fr.4
‑
1、Fr.4
‑
2、Fr.4
‑
3、Fr.4
‑
4、Fr.4
‑
5;亚组份Fr.4
‑
4经硅胶柱色谱分离,依次用体积比为10︰1、8︰1、5︰1、3︰1、2︰1、1︰1、1︰2的石油醚
‑
乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱,每一梯度用40mL洗脱液,流速为5mL/min,每40mL体积为一流份,收集7个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,分别以体积比1︰1的石油醚
‑
丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份1~2、流份3、流份4、流份5~7,得到组份Fr.4
‑4‑
1~Fr.4
‑4‑
4;将组份Fr.4
‑4‑
4经Sephadex LH
‑
20凝胶柱色谱,甲醇洗脱,流速为15mL/h,每17mL为一流份、收集20个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,以体积比7︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份3~5、流份6~17、流份18~20,得到3个亚组份Fr.4
‑4‑4‑
1、Fr.4
‑4‑4‑
2、Fr.4
‑4‑4‑
3;将亚组份Fr.4
‑4‑4‑
2经制备型高效液相色谱纯化,以体积比为60︰40的乙腈
‑
水混合溶剂洗脱,色谱柱为YMC
‑
Pack ODS
‑
A,流速为6mL/min,收集保留时间为48min的色谱峰,回收溶剂,即得亚乎奴甾G。3.根据权利要求1所述的多氧孕甾烷类化合物亚乎奴甾G的制备方法,其特征在于,以亚乎奴莲药材30.5kg为原料,以91L、体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为92℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状的乙醇提取物1.6kg,乙醇提取物混悬于4.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、二氯甲烷、正丁醇萃取3次,每次4.8L,时间为3小时,回收溶剂,得到石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位;将二氯甲烷萃取部位经硅胶柱色谱分离,依次用体积比为100︰0、100︰1、100︰3、100︰5、100︰10、100︰30、100︰50、1︰1、1︰2的石油醚
‑
丙酮混合溶剂进行梯度洗脱,每一梯度用6.7L洗脱液,流速为10mL/min,每670mL体积为一流份,收集90个流份,各个流份经硅胶薄层色谱检测分析,用GF254薄层板,分别以体积比1︰1的石油醚
‑
丙酮和体积比10︰1的二氯甲烷
‑
甲醇作为展开剂,以体积比10︰90的硫酸
‑
乙醇溶液作为显色剂,105℃加热3~5min,根据薄层色谱检测结果,分别合并流份1~30、流份31~50、流份51~60、流份61~70、流份71~90,得到组份Fr.1~Fr.5;组份Fr.4经MCI柱色谱,经体积比甲醇
‑
水溶液10︰90、30︰70、40︰60、70︰30、80︰20梯度洗脱,每一梯度用300mL洗脱液,流速为20mL/h,每一洗脱梯度为一流份,收集5个亚组份Fr.4
‑
1、Fr.4
‑
2、Fr.4
‑
3、Fr.4
‑
4、Fr.4
‑
5;亚组份Fr.4
‑
4经硅...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙彦君,冯卫生,赵璇,王俊敏,李孟,弓建红,关延彬,陈辉,郝志友,张艳丽,
申请(专利权)人:河南中医药大学,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。