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一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用制造技术

技术编号:32033500 阅读:38 留言:0更新日期:2022-01-27 13:17
本发明专利技术公开了一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用,本发明专利技术获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103431碱基处上下游100bp范围内碱基,即第103331

【技术实现步骤摘要】
一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用


[0001]本专利技术涉及一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用,属于基因


技术介绍

[0002]中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞是1957年在Dr.Theodore T.Puck的实验室中建立的,是一种永生化的非分泌型细胞,很少分泌内源蛋白;同时因其具有与人类天然蛋白更接近的翻译后修饰、不易受人类病毒感染、能在化学成分明确的无血清培养基中大规模培养等优点,被广泛应用于生物制药领域,生产了超过70%的蛋白类药物。然而CHO细胞作为哺乳动物细胞,培养周期长,培养成本高,而同时单克隆抗体等重组产品的需求不断增加,持续增长的需求意味着比生产率仍需要优化。虽然通过增加基因的拷贝数、发展新的强启动子、寻找合适的增强子等方式可以提高表达量,但多数CHO细胞在长期培养过程中的表达水平不稳定,直接影响到监管部门对产品的审批与上市问题。因此构建稳定且高表达目的基因的CHO表达株对于蛋白类药物的研发与上本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点,其特征在于,所述的稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103331

103531碱基内。2.根据权利要求1所述的CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点,其特征在于,所述的CHO细胞基因NW_003614889.1的第103331

103531碱基的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点,其特征在于,所述的稳定表达蛋白质的位点可被CRISPR/Cas9技术以5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG 3'作为靶序列识别。4.根据权利要求1所述的CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点,其特征在于,所述的蛋白质为分子量小于160KDa的蛋白质或多肽。5.权利要求1~4任一项所述的CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点在CHO细胞稳定表达外源蛋白质或多肽中的应用。6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的应用具体是将外源蛋白质或多肽的编码基因构建在所述的CHO细胞基因NW_...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈蕴金坚瞿丽丽丁学峰李华钟蔡燕飞朱景宇杨兆琪鲁晨戴云峰
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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