一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法技术

技术编号:32003161 阅读:34 留言:0更新日期:2022-01-22 18:18
本发明专利技术公开了一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法,包括以下步骤:以免疫MNPs捕获悬浮的k308细胞作为靶标进行正向筛选;选取免疫MNPs捕获的正常脑星形胶质细胞SVGp12细胞作对照细胞,用于靶细胞的反向筛选;利用Cell

【技术实现步骤摘要】
一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法


[0001]本专利技术涉及神经胶质肉瘤标志物筛选
,具体来说,涉及一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法。

技术介绍

[0002]胶质母细胞瘤(Gliosarcoma,GS),是临床中一种较为常见的中枢神经系统恶性肿瘤。最早于1895年由Stroebe首次报道了脑胶质肉瘤病例,而直到 1955年才被Feigin和Gross加以证实,在世界卫生组织(WHO)中枢神经系统肿瘤分类中将其命名。胶质肉瘤在分类上归属于胶质母细胞瘤,作为其中的一个亚型,大约占胶质母细胞瘤总病例数的1.8

2.4%,肿瘤分级为WHO IV 级,其组织学特点为同时包含胶质纤维与肉瘤两种成分。颞叶为脑胶质肉瘤最好发部位,其次为额叶、顶叶和枕叶。除了肿瘤原位复发外,胶质肉瘤相比较胶质母细胞瘤而言具有更易于发生颅外转移的特点。当前对于胶质肉瘤的治疗主要以手术为主,然而即使运用现代先进的术中导航、显微神经外科技术,辅以术后的放、化疗等综合治疗手段,胶质肉瘤的预后仍然很差。据近年的数据统计,胶质肉瘤患者的中位本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:以免疫MNPs捕获悬浮的k308细胞作为靶标进行正向筛选,选取免疫MNPs捕获的正常脑星形胶质细胞SVGp12细胞作对照细胞,用于靶细胞的反向筛选;利用Cell

SELEX技术进行神经胶质肉瘤特异性的核酸适配体的筛选。2.根据权利要求1所述的一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法,其特征在于,具体做法为,步骤S1,以免疫MNPs捕获悬浮的k308细胞为靶标,通过将初始DNA文库加入到盛有肿瘤细胞的容器中进行正向筛选,文库中部分核酸适配体可与肿瘤细胞表面蛋白结合,离心清洗后,洗脱并收集结合的核酸适配体,加入装有对照细胞的试管中进行反向筛选,离心后取上清,利用PCR扩增未与对照细胞结合的核酸适配体序列,即可获得与肿瘤细胞表面蛋白特异结合的核酸适配体,对照细胞为正常脑星形胶质细胞SVGp12细胞;步骤S2,根据需要可重复步骤S1循环5

20次,从而获得高亲和力的核酸适配体文库;步骤S3,利用步骤S2获得的核酸适配体修饰的磁珠,与细胞裂解液孵育;通过磁场分离,实现靶蛋白的捕获和纯化;鉴定捕获的蛋白,利用生物信息学方法检索结果,得到相应的蛋白质信息。3.根据权利要求2所述的一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法,其特征在于,步骤S1中进行PCR扩增时可采用dUTP替换碱基dT的反应体系,采取尿嘧啶糖苷酶法进行PCR扩增,同时使用带滤芯的吸液头进行实验。4.根据权利要求2或3所述的一种基于MNPs的神经胶质肉瘤标志物筛选方法,其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员:张波李星梁建
申请(专利权)人:深圳市人民医院
类型:发明
国别省市:

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