一种蛋白吸附膜材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种蛋白吸附膜材料及其制备方法和应用。所述蛋白吸附膜材料的制备原料包括改性硅藻土膜和蛋白质；其中所述改性硅藻土膜为羧基化硅藻土膜；所述蛋白质为ProteinA和/或ProteinG。本发明专利技术的蛋白吸附膜材料将蛋白质连接至改性的硅藻土膜上，使得到的Protein A免疫吸附膜材具有较高的流速、较好的吸附容量和稳定性。的吸附容量和稳定性。的吸附容量和稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白吸附膜材料及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医学材料
，具体涉及一种蛋白吸附膜材料及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]免疫吸附疗法是利用免疫吸附剂对血液中有毒、有害物质的特异性吸附作用以达到去除血液中的致病物质、净化血液目的的治疗方法，是治疗某些疑难病症、抢救急危病人的有效手段。对免疫吸附治疗疗效起决定性作用的是免疫吸附剂。免疫吸附剂的研究至今已有近30年的历史，其原理与传统的亲合分离原理相近。商业化的免疫吸附柱已有15年以上的历史，所用的基质是传统的分离基质
‑‑
硅胶和琼脂糖凝胶。免疫吸附治疗要求免疫吸附柱具有良好的血液相容性、较高的吸附性及可靠的安全性。免疫吸附治疗中起决定作用的成分是免疫吸附柱中的免疫吸附剂。
[0003]现有的以硅胶和琼脂糖凝胶为基质的免疫吸附剂能够满足医学治疗的需要，但同时也有一定的缺点：1)硅胶的强度较好，但可耐受pH范围较窄；2)琼脂糖凝胶的血液相容性好，但强度较差；3)两种填料的形状都为均匀的珠状微粒。这种形状的填料能使柱子在装填过程中保持均匀，但也使柱压增大，使得在免疫吸附治疗中很难达到高的流速。
[0004]另外，膜材料因其良好的通透性、较高的强度及良好的传质性能而深受研究者的青睐。目前，对一些新的膜材料已进行了初步的研究，但较低的吸附容量使其很难投入到实际应用中。
[0005]因此，亟待提供一种高选择性、高吸附容量的免疫吸附材料。

技术实现思路

[0006]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种蛋白吸附膜材料，具有高选择性、高吸附容量等特点。
[0007]本专利技术提供了一种蛋白吸附膜材料，所述蛋白吸附膜材料的制备原料包括改性硅藻土膜和蛋白质；其中所述改性硅藻土膜为羧基化硅藻土膜；所述蛋白质为ProteinA和/或ProteinG。
[0008]可选的，在一些实施例中，所述羧基化硅藻土膜与所述蛋白质的质量比为100：0.1～0.16。
[0009]本专利技术还提供一种蛋白吸附膜材料的制备方法，包括：
[0010]制备氨基化硅藻土膜的步骤；
[0011]利用所述氨基化硅藻土膜制备羧基化硅藻土膜的步骤；
[0012]利用蛋白质和所述羧基化硅藻土膜制备蛋白吸附膜材料的步骤。
[0013]可选的，在一些实施例中，所述制备氨基化硅藻土膜的步骤包括：
[0014]将硅藻土膜、无水甲苯，以及3
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氨基丙基三乙氧基硅烷或二乙烯三胺混合，加入促进剂，在105～115℃的温度下反应4～6h；反应结束后，冷却，冲洗以除去甲苯，得到氨基化
硅藻土膜。
[0015]可选的，在一些实施例中，所述硅藻土膜与所述3
‑
氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)的质量体积比(g/mL)为1～2.5：1。
[0016]可选的，在一些实施例中，所述促进剂为三乙胺。
[0017]可选的，在一些实施例中，所述制备羧基化硅藻土膜的步骤包括：
[0018]将所述氨基化硅藻土膜置于乙醇溶液中浸泡，加入戊二酸酐或柠檬酸，混合，于35～39℃恒温条件下反应，过滤，冲洗以除去未反应的戊二酸酐或柠檬酸，得到羧基化硅藻土膜。
[0019]可选的，在一些实施例中，所述硅藻土膜与所述戊二酸酐的质量比为1：0.8～1。
[0020]可选的，在一些实施例中，所述制备蛋白吸附膜材料的步骤包括：
[0021]将1
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(3
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二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和所述羧基化的硅藻土膜加入至pH为6.5～7.5的缓冲液中，混合，得到混悬液；向所述混悬液中加入蛋白质，在3～5℃恒温条件下反应2～4h，过滤，冲洗，干燥，得到蛋白吸附膜材料；密封置于3～5℃保存，备用；所述蛋白质为ProteinA和/或ProteinG。
[0022]可选的，在一些实施例中，所述羧基化的硅藻土膜、所述1
‑
(3
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二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐与所述蛋白质的质量比为100：0.8～1.5：0.1～0.16。优选地，所述羧基化的硅藻土膜、所述1
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(3
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二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐与所述蛋白质的质量比为50：0.5：0.06。
[0023]此外，本专利技术还提供所述蛋白吸附膜材料在免疫吸附剂中的应用。
[0024]本专利技术的有益效果在于：
[0025]本专利技术的蛋白吸附膜材料将ProteinA和/或ProteinG连接至改性的硅藻土膜上，使得到的免疫吸附膜材具有较高的流速、较好的吸附容量和稳定性。本专利技术的蛋白吸附膜材料是一种新的蛋白吸附膜材料，可以作为IgG吸附的商业化应用。
[0026]本专利技术的蛋白吸附膜材料作为免疫吸附剂使用具有如下的优点：较高的选择性，即非特异吸附要小；良好的血液相容性，即无毒、不溶解、不激活补体和凝血系统、不致敏；稳定性好，便于储存和消毒；成本不高。因而本专利技术的材料可广泛应用于体外免疫吸附。
附图说明
[0027]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0028]图1是本专利技术实施例提供的氨基化硅藻土膜的结构示意图；
[0029]图2是本专利技术实施例提供的羧基化硅藻土膜的结构示意图；
[0030]图3是本专利技术实施例提供的蛋白吸附膜材料的结构示意图。
具体实施方式
[0031]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于
本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0032]本专利技术实施例提供一种蛋白吸附膜材料及其制备方法和应用。以下分别进行详细说明。需说明的是，以下实施例的描述顺序不作为对实施例优选顺序的限定。另外，在本专利技术的描述中，术语“包括”是指“包括但不限于”。本专利技术的各种实施例可以以一个范围的型式存在；应当理解，以一范围型式的描述仅仅是因为方便及简洁，不应理解为对本专利技术范围的硬性限制；因此，应当认为所述的范围描述已经具体公开所有可能的子范围以及该范围内的单一数值。例如，应当认为从1到6的范围描述已经具体公开子范围，例如从1到3，从1到4，从1到5，从2到4，从2到6，从3到6等，以及所数范围内的单一数字，例如1、2、3、4、5及6，此不管范围为何皆适用。另外，每当在本文中指出数值范围，是指包括所指范围内的任何引用的数字(分数或整数)。
[0033]已知体外免疫吸附治疗是血液净化疗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白吸附膜材料，其特征在于，所述蛋白吸附膜材料的制备原料包括改性硅藻土膜和蛋白质；其中所述改性硅藻土膜为羧基化硅藻土膜；所述蛋白质为ProteinA和/或ProteinG。2.根据权利要求1所述的蛋白吸附膜材料，其特征在于，所述羧基化硅藻土膜与所述蛋白质的质量比为100：0.1～0.16。3.一种蛋白吸附膜材料的制备方法，其特征在于，包括：制备氨基化硅藻土膜的步骤；利用所述氨基化硅藻土膜制备羧基化硅藻土膜的步骤；利用蛋白质和所述羧基化硅藻土膜制备蛋白吸附膜材料的步骤。4.根据权利要求3所述的蛋白吸附膜材料的制备方法，其特征在于，所述制备氨基化硅藻土膜的步骤包括：将硅藻土膜、无水甲苯，以及3
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氨基丙基三乙氧基硅烷或二乙烯三胺混合，加入促进剂，在105～115℃的温度下反应4～6h；反应结束后，冷却，冲洗以除去甲苯，得到氨基化硅藻土膜。5.根据权利要求4所述的蛋白吸附膜材料的制备方法，其特征在于，所述硅藻土膜与所述3
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氨基丙基三乙氧基硅烷的质量体积比(g/mL)为1～2.5：1；和/或，所述促进剂为三乙胺。6.根据权利要求4所述的蛋白吸附膜材料的制备方法，其特征在于，所述制备羧基化硅藻土膜的步骤包括：将所述氨基化硅藻土膜置于乙醇溶液中浸泡，加入戊二酸酐或柠檬酸，混合，于35～39℃恒温条件下反应，过滤，冲洗以除去未反应的戊二酸酐或柠檬酸，得到羧基化硅藻土...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤耀辉，陈会生，董强，曾华玲，李雪玲，
申请(专利权)人：上海江夏血液技术有限公司，
类型：发明
国别省市：