磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术实施例涉及一种磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用，涉及检测领域，包括Anti

【技术实现步骤摘要】
磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及检测领域，特别涉及一种磁微粒化学发光检测试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]胃泌素释放肽(GRP)最早是1978年从猪胃细胞分离出来的一种胃肠激素，它由27个氨基酸组成，具有促胃泌素分泌作用，ProGRP是GRP的前体结构，普遍存在于非胃窦组织、神经纤维、脑和肺的神经内分泌细胞中。ProGRP因部分氨基酸残基的不同分为3种分子亚型(ProGRP31
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125、ProGRP31
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118、ProGRP31
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115)，但它们C
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末端均有共同片段ProGRP31
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98。研究发现，SCLC患者的肿瘤细胞能合成和释放GRP，并通过自分泌或细胞间的相互作用参与肿瘤的生长、转移过程。目前本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括Anti
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FITC羊多抗包被的磁珠、ALP标记的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体、FITC标记的第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体、含有ProGRP重组抗原的标准品；其中，所述第一、第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体为识别ProGRP抗原分子不同表位的单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，ALP标记的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体中，ALP通过SMCC桥联到第一胃泌素释放肽前体抗体上；可选地，每1重量份的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体用0.9重量份的ALP标记；可选地，所述第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体先进行活化再加入ALP和SMCC桥连；可选地，所述第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体采用Traut
’
s Reagent溶液和甘氨酸溶液活化；可选地，还含有稀释液，ALP标记的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体通过稀释液稀释后的浓度为0.1μg/mL。3.根据权利要求2所述的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体的活化方法为：取第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体至离心浓缩管中加入缓冲液，离心浓缩至2.5～3.5mg/mL，取至EP管中，加入活化剂Traut
’
s Reagent溶液，室温静置反应，加入的甘氨酸溶液，室温静置反应；除去未反应的活化剂，收集活化后的抗体，浓度调整为3mg/mL；可选地，通过PD10柱纯化去除未反应的活化剂；可选地，Traut
’
s Reagent溶液的浓度为5mg/mL；可选地，甘氨酸溶液的浓度为0.1moL/L；可选地，每1mg第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体对应的所述Traut
’
s Reagent溶液的加入量为18～25μL；可选地，每1mg第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体对应的所述甘氨酸溶液的加入量为45～60μL；可选地，加入活化剂后室温静置反应的时间为20min；可选地，加入甘氨酸溶液后室温静置反应的时间为5min；可选地，缓冲液为pH9.0的0.2M NaHCO3。4.根据权利要求2或3所述的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，桥连方法为：将ALP溶液与SMCC溶液室温静置反应，去除多余的SMCC，收集活化后的ALP，与活化后的第一胃泌素释放肽前体单克隆抗体在2
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8℃条件下静置反应获得偶联物，浓缩再稀释，作为试剂2号试剂；可选地，室温静置反应时间为25～35min，可选地为30min，可选地，2
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8℃条件下静置反应时间为18～22h，可选地为20h，可选地，SMCC溶液的浓度为10mg/mL；可选地，稀释液为校准品稀释液；可选地，试剂2号试剂的浓度为0.1～0.8μg/mL，可选地为0.1μg/mL；可选地，偶联物溶液通过Supperdex200凝胶纯化。5.根据权利要求1至4任一所述的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，FITC标记的第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体中，每1重量份的第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体用0.075重量份的FITC标记；可选地，FITC标记第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体的方法为：将FITC、第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体分别加入缓冲液制得溶液，将两种溶液混合反应，浓缩再稀释，作为试剂1号试剂；可选地缓冲液采用pH9.0的0.2M NaHCO3；可选地，FITC溶液浓度为0.5mg/mL，可选地，第二胃泌素释放肽前体单克隆抗体溶液的浓度为3mg/mL；可选地，稀释液为校准品稀
释液；可选地，通过PD10柱纯化去除未反应的FITC；试剂1号试剂的浓度为0.1～1.0μg/mL，可选地为0.5μg/mL。6.根据权利要求1至5任一所述的磁微粒化学发光检测试剂盒，其特征在于，Anti
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FITC羊多抗包被的磁珠中，每100重量份的裸磁珠用1重量份Anti
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FI...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱明月，张追峰，张称意，陈志琼，朱撮丝，
申请(专利权)人：北京贝尔医疗设备有限公司，
类型：发明
国别省市：