一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于水体环境抑菌剂技术领域，公开了用于增效抑制对虾养殖高盐度水体哈维弧菌的复合提取物。由山石斛提取物40％

【技术实现步骤摘要】
一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及水体环境抑菌剂
，更具体地，涉及一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]哈维弧菌属于革兰氏阴性菌，是高盐度水体水产养殖动物的常见致病性弧菌之一，可通过菌体粘附作用引发对虾和海水养殖鱼类的感染，其在夏秋季高温时期的感染性明显高于其他季节。实践表明，高盐度养殖水体对虾感染哈维弧菌后均可导致出血性肠炎，留给养殖户治疗的有利窗口期非常短，治疗不及时可造成大量养殖对虾急性偷死，造成的经济损失也非常严重。因此，将高盐度养殖水体哈维弧菌繁殖量控制在致病性安全阈值以下，有利于降低对虾哈维弧菌的感染率，也有利于提高对虾养殖成功率。
[0003]降低水体哈维弧菌异常繁殖，定期使用合规消毒剂是常见外用手段，然而高盐度养殖水体盐度高低不同，同一种合规消毒剂对哈维弧菌的抑制作用是有差异的，对于低盐度的虾塘高盐度养殖水体，哈维弧菌繁殖量较低，使用合规消毒剂具有较好的抑制哈维弧菌的效果，而对于高盐度的虾塘高盐度养殖水体，哈维弧菌的繁殖量非常高，使用合规消毒剂对哈维弧菌的抑制效果较弱，有效抑制的持续期较短，容易出现繁殖量短期上升导致感染复发的问题。虽然外用抗生素或内服抗生素能较好的治疗对虾哈维弧菌感染复发的问题，但抗生素残留导致对虾达不到食品安全的市场准入门槛而卖不出的问题更严重。因此，寻求一种更安全有效低成本的增效抑制水体哈维弧菌的复合成分，对降低对虾发生哈维弧菌风险具有更大的经济价值和社会价值。

技术实现思路

[0004]本专利技术为了克服现有技术中上述缺陷，首先提供一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物。
[0005]本专利技术的第二个目的是提供上述用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物的制备方法。
[0006]本专利技术的第三个目的是提供上述用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物的应用。
[0007]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
[0008]一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，以重量百分比计，包括40
‑
55％山石斛提取物、10
‑
22％箴兰提取物、30
‑
45％莪术提取物。
[0009]优选的，所述的用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，以重量百分比计，包括45
‑
52％山石斛提取物、12
‑
20％箴兰提取物、35
‑
42％莪术提取物。
[0010]作为一种最优选的实施方式，所述的用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，以重量百分比计，包括45％山石斛提取物、18％箴兰提取物、37％莪术提取物。
[0011]优选的，所述山石斛提取物为山石斛的浓缩提取物，山石斛为兰科麦斛属麦斛兰的含根部全草，优选两年生山石斛含根部全草。
[0012]更优选的，所述山石斛提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：
[0013]S1、将山石斛鲜摘全草冲洗干净去杂，榨汁机搅碎滤渣取汁，分别获得山石斛初提汁和山石斛滤渣；
[0014]S2、将山石斛初提汁在40
‑
45℃下加热将其体积浓缩至原来的1/3至1/2，超声波处理4
‑
6分钟，获得山石斛初提汁预处理物；将山石斛滤渣与浓度为1M的氢氧化钠溶液和蒸馏水按质量体积比的(9
‑
10)：1：(40
‑
50)充分混合，35
‑
40℃下静置24
‑
36h，使用稀盐酸将pH值中和至7.0
‑
7.2，接着将其置于40
‑
45℃下加热将其体积浓缩至原来的1/3至1/2，获得山石斛滤渣预处理物；
[0015]S3、按质量体积比，将山石斛初提汁预处理物和山石斛滤渣预处理物按1：(2
‑
4)混合，接着加入蒸馏水100
‑
150体积份和纤维素酶2500
‑
3500IU，装入35
‑
40℃可调温的密闭发酵容器中，加入芽孢菌液态培养基3
‑
8体积份，加入含量为(2.5
‑
5.8)
╳
108cfu/g的芽孢菌10
‑
30g，发酵期间，间隔式搅拌和可调控式pH值调节，当培养液OD值为6.2
‑
7.2时结束发酵，将发酵容器中的混合物离心去渣，收集上清液，并分装密闭于121℃下高压灭菌15min，冷却后取出，接着将经高温灭菌的上清液利用无搅拌式超滤浓缩至原体积的10％
‑
30％，所获得复合物即为所述山石斛浓缩提取物。
[0016]其中，S1榨汁机的功率为2000W的家用榨汁机。
[0017]其中，S2超声波处理参数设置为200瓦，时间8秒，间隔15
‑
30秒，全程3
‑
5分钟，超声处理期间，样品容器保持冰浴。
[0018]其中，S3无搅拌式超滤浓缩的技术参数如下：环境温度25
‑
30℃条件下，操作压力为0.3～0.6Mpa，超滤膜的膜通量以50～100L/m2·
h为宜。
[0019]进一步地，上述的芽孢菌优选为纳豆芽孢杆菌分离株，枯草芽胞杆菌、地衣芽孢杆菌等芽孢杆菌功能上不能取代本专利技术分离到的纳豆芽孢杆菌。
[0020]进一步地，S3上述培养物离心优选在5000rpm离心，例如5000rpm离心10分钟。
[0021]在一个优选的实施方式中，所述山石斛提取物，由包含以下步骤的方法制备得到：
[0022]S1、将山石斛鲜摘全草冲洗干净去杂，榨汁机搅碎滤渣取汁，分别获得山石斛初提汁和山石斛滤渣；
[0023]S2、将山石斛初提汁在43℃下恒温加热将其体积浓缩至原来的1/2，超声波处理4分钟，获得山石斛初提汁预处理物；将山石斛滤渣与浓度为1M的氢氧化钠溶液和蒸馏水按质量体积比的10：1：50充分混合，40℃下静置24
‑
36h，使用稀盐酸将pH值中和至7.0
‑
7.2，接着将其置于45℃下恒温加热将其体积浓缩至原来的1/2，获得山石斛滤渣预处理物；
[0024]S3、按质量体积比，将山石斛初提汁预处理物和山石斛滤渣预处理物按1：3混合，接着加入蒸馏水100体积份和纤维素酶2800IU，装入35℃可调温的密闭发酵容器中，加入芽孢菌液态培养基5体积份，加入含量为4
╳
108cfu/g的芽孢菌20g，发酵期间，间隔式搅拌和可调控式pH值调节，当培养液OD值为7.0时结束发酵，将发酵容器中的混合物离心去渣，收集上清液，并分装密闭于121℃下高压灭菌15min，冷却后取出，接着将经高温灭菌的上清液利用无搅拌式超滤浓缩至原体积的20％，所获得复合物即为所述山石斛浓缩提取物。
[002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，其特征在于，以重量百分比计，包括40
‑
55％山石斛提取物、10
‑
22％箴兰提取物、30
‑
45％莪术提取物。2.根据权利要求1所述的用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，其特征在于，以重量百分比计，包括45
‑
52％山石斛提取物、12
‑
20％箴兰提取物、35
‑
42％莪术提取物。3.根据权利要求2所述的用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述山石斛提取物为山石斛的浓缩提取物，所述箴兰提取物为经过预处理的箴兰再经发酵和超滤浓缩的获得物，所述莪术提取物为莪术根部经过预处理、发酵和超滤浓缩获得的物质。4.根据权利要求3所述的用于抑制高盐度水环境哈维弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述山石斛提取物通过包含以下步骤的方法制备得到：S1、将山石斛鲜摘全草冲洗干净去杂，榨汁机搅碎滤渣取汁，分别获得山石斛初提汁和山石斛滤渣；S2、将山石斛初提汁在40
‑
45℃下加热将其体积浓缩至原来的1/3至1/2，超声波处理4
‑
6分钟，获得山石斛初提汁预处理物；将山石斛滤渣与浓度为1M的氢氧化钠溶液和蒸馏水按质量体积比的(9
‑
10)：1：(40
‑
50)充分混合，35
‑
40℃下静置24
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36h，使用稀盐酸将pH值中和至7.0
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7.2，接着将其置于40
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45℃下加热将其体积浓缩至原来的1/3至1/2，获得山石斛滤渣预处理物；S3、按质量体积比，将山石斛初提汁预处理物和山石斛滤渣预处理物按1：(2
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4)混合，接着加入蒸馏水100
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150体积份和纤维素酶2500
‑
3500IU，装入35
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40℃可调温的密闭发酵容器中，加入芽孢菌液态培养基3
‑
8体积份，加入含量为(2.5
‑
5.8)
╳
108cfu/g的芽孢菌10
‑
30g，发酵期间，间隔式搅拌和可调控式pH值调节，当培养液OD值为6.2
‑
7.2时结束发酵，将发酵容器中的混合物离心去渣，收集上清液，并分装密闭于121℃下高压灭菌15min，冷却后取出，接着将经高温灭菌的上清液利用无搅拌式超滤浓缩至原体积的10％<...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄锦炉，
申请(专利权)人：清远海贝生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：